人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

48800 RASD2/Tumor endothelial marker 2  腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記蛋白2抗體  0.2ml
48801 RNF43  環(huán)指蛋白43抗體  0.2ml
48802 RPLP2  酸性核糖體磷蛋白P2抗體  0.2ml
48803 SART3  T淋巴細(xì)胞識(shí)別的鱗狀細(xì)胞癌SART3抗體  0.2ml
48804 SDCCAG10  結(jié)腸癌抗原10抗體  0.2ml
48805 SDCCAG8  結(jié)腸癌抗原8抗體  0.2ml
48806 SPANX  腫瘤/睪丸抗原11.3抗體  0.1ml
48807 SSX5  滑膜肉瘤X斷點(diǎn)蛋白5抗體  0.2ml
48808 STEAP4/TNFAIP9  腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原4抗體  0.2ml
48809 STK31  */*蛋白激酶31抗體  0.2ml
48810 UTP14A/SDCCAG16  結(jié)腸癌抗原16抗體  0.2ml
48811 XAGE2  腫瘤/睪丸抗原12家族2抗體  0.2ml
48812 ITIH1  衍生透明質(zhì)酸相關(guān)蛋白抗體  0.2ml
48813 GBP5/Guanylate binding protein 5  *核苷酸結(jié)合蛋白5抗體  0.2ml
48814 IFNA17/Interferon alpha 17/IFNA88  干擾素α17抗體  0.2ml
48815 IFNA21/IFNA F  干擾素α21抗體  0.2ml
48816 IFNAR2/IFNABR  干擾素α受體2抗體  0.2ml
48817 IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11  干擾素α11抗體  0.2ml
48818 IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C  干擾素α10抗體  0.2ml
48819 Otoraplin/OTOR/Fibrocyte derived protein  纖維細(xì)胞源性蛋白  0.2ml
48820 HSP10/CPN10  熱休克蛋白10抗體  0.2ml
48821 ANGPTL6  血管生成素相關(guān)蛋白6抗體  0.2ml
48822 RCAN2/DSCR1L1  鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白2抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1）  0.1ml
48823 EDIL3  表皮生長(zhǎng)因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體  0.2ml
48824 GLMN/FK506 binding protein associated protein  FK506結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白抗體（*相關(guān)蛋白）  0.2ml
48825 Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR  芳香烴受體抗體  0.2ml
48826 MEOX 2  間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體  0.2ml
48827 EphA3/Eph receptor A3  *蛋白激酶受體A3抗體  0.2ml
48828 EphA6/Eph receptor A6  *蛋白激酶受體A6抗體  0.2ml
48829 EphA7/Eph receptor A7  *蛋白激酶受體A7抗體  0.2ml
48830 EphA8/Eph receptor A8  *蛋白激酶受體A8抗體  0.2ml
48831 EphB1/Eph receptor B1  *蛋白激酶受體B1抗體  0.2ml
48832 phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317)  磷酸化*蛋白激酶受體B1抗體  0.1ml
48833 phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr331)  磷酸化*蛋白激酶受體B1抗體  0.1ml
48834 Kidins220  220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體  0.2ml
48835 phospho-Kidins220 (Ser918)  磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體  0.1ml
48836 ELF1/E74 like factor 1  轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體  0.2ml
48837 Ephrin B3  *蛋白激酶B3抗體  0.2ml
48838 EphB1+EphB2  *蛋白激酶受體B1+B2抗體  0.2ml
48839 EphB1+EphB2+EphB3+EphB4  *蛋白激酶受體B1+B2+B3+B4抗體  0.2ml
48840 ANGPTL5  血管生成素相關(guān)蛋白5  0.2ml
48841 FGF11  成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子11抗體  0.2ml
48842 INPPL1  肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體  0.2ml
48843 TNFAIP2  腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白2(TNFα-IP 2)抗體  0.2ml
48844 CMG1  毛細(xì)管形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體  0.2ml
48845 DENTT  細(xì)胞分裂核仁蛋白1抗體  0.2ml
48846 phospho-Myosin light chain(Ser20)  磷酸化肌球蛋白輕鏈抗體  0.1ml
48847 ELOVL2  長(zhǎng)鏈脂肪酸延長(zhǎng)酶ELOVL2抗體  0.2ml
48848 ELOVL5  長(zhǎng)鏈脂肪酸延長(zhǎng)酶長(zhǎng)ELOVL5抗體  0.2ml
48849 ELOVL6  長(zhǎng)鏈脂肪酸延長(zhǎng)酶長(zhǎng)ELOVL6抗體  0.2ml
48850 FTO/Protein fatso  脂肪堆積和肥胖相關(guān)蛋白抗體  0.2ml
48851 GCKR/Glucokinase regulatory protein  葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白抗體  0.2ml
48852 MMP-9  基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒  0.1ml
48853 NT5C1A  胞質(zhì)5'核苷酸酶1A抗體  0.2ml
48854 FAIM1  FAS凋亡抑制分子1抗體  0.2ml
48855 DEDD1  死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體  0.2ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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