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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-12 14:41:51瀏覽次數(shù):234次
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人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
48520 CaIPLA2/PLA2G6 胞漿鈣獨立磷脂酶A2抗體 0.1ml
48521 Netrin G1 ligand 軸突生長誘向因子G1配體抗體 0.2ml
48522 Netrin 4 軸突生長誘向因子4抗體 0.1ml
48523 PAX4 配對盒同源基因4抗體 0.1ml
48524 Laminin 5 層粘連蛋白5(laminin γ2)抗體 0.2ml
48525 UGCGL2 二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體 0.2ml
48526 UGDH/UDPGDH 尿苷二磷酸葡萄糖脫氫酶抗體 0.2ml
48527 Uricase 尿酸酶 0.1ml
48528 NALP2/PAN1/PYPAF2 富含*重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 0.1ml
48529 Dystrophin/DMD 肌營養(yǎng)不良蛋白 0.1ml
48530 LGI1/ETL1 富含*膠質(zhì)瘤失活蛋白1抗體 0.1ml
48531 GANAB/alpha Glucosidase II α葡萄糖苷酶2抗體 0.1ml
48532 NLG1/KIRREL2 腎病樣蛋白1抗體 0.1ml
48533 MAPK organizer 1/Morg1 絲裂原活化蛋白激酶組織蛋白1抗體 0.1ml
48534 PNPLA6/NTE 含patatin樣磷脂酶6抗體 0.1ml
48535 OTC *氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶抗體 0.1ml
48536 Desmoglein 1/DSG1 橋粒芯糖蛋白1 0.1ml
48537 CAMKIV/CAMK4 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體 0.1ml
48538 phospho-CAMK4(Thr196 + Thr200) 磷酸化鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體 0.1ml
48539 LBP1/Upstream Binding Protein 1 上游結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
48540 SDF4 基質(zhì)細胞衍生因子4抗體(鈣結(jié)合蛋白) 0.2ml
48541 SECTM1 分泌和跨膜蛋白1抗體 0.2ml
48542 SERBP1 纖溶酶原激活物抑制劑1 RNA結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
48543 SFR19 剪接因子,*/*豐富19 0.2ml
48544 SOX11 轉(zhuǎn)錄因子SOX-11蛋白抗體 0.2ml
48545 SVH/ARMC10 肝癌蛋白剪接變異體蛋白抗體 0.2ml
48546 THRSP 甲狀腺激素反應(yīng)蛋白抗體 0.2ml
48547 TIMM17A 線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位酶抗體 0.2ml
48548 TMEM49 跨膜蛋白49抗體 0.2ml
48549 TMS1/ASC 凋亡相關(guān)斑點樣蛋白ASC抗體 0.2ml
48550 TPD52/Prostate and colon associated protein 前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白 0.2ml
48551 TPD54/TPD52L2 腫瘤蛋白D54蛋白抗體 0.2ml
48552 TRIM47 星形細胞瘤高表達蛋白抗體(環(huán)指蛋白100) 0.2ml
48553 TSP50 腫瘤/睪丸抗原20抗體 0.2ml
48554 TULP2/CT65/Cancer testis antigen 65 腫瘤/睪丸抗原65 0.2ml
48555 TERT/EST2/omerase reverse transcriptase 端粒酶相關(guān)蛋白2抗體(端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶) 0.2ml
48556 UBAP1 泛素相關(guān)蛋白1抗體(鼻咽癌相關(guān)基因20蛋白) 0.2ml
48557 UXT/Ubiquitously expressed transcript 廣泛表達轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體 0.2ml
48558 WDR16 WD重復(fù)蛋白16抗體 0.2ml
48559 WDR19 WD重復(fù)膜蛋白19抗體 0.2ml
48560 WSB2/WD SOCS box protein 2 信號傳導(dǎo)抑制蛋白WD重復(fù)蛋白2抗體 0.2ml
48561 WWP1 WW結(jié)構(gòu)域E3泛素連接酶1抗體 0.2ml
48562 YY1AP1/HCCA2 肝癌相關(guān)蛋白2抗體(轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體) 0.2ml
48563 ZNF146 鋅指蛋白146抗體 0.2ml
48564 ZNF23 鋅指蛋白23抗體 0.2ml
48565 ZNF364/BCA2/RNF115 乳腺癌相關(guān)基因2抗體(鋅指蛋白364) 0.2ml
48566 FAM89B/MMTV-R 乳腺腫瘤病毒受體同源蛋白抗體 0.2ml
48567 IL-11RA 白介素11受體α/IL-11Rα抗體 0.2ml
48568 KCNQ-1 鉀離子通道蛋白家族KCNQ1抗體 0.1ml
48569 IL-10 白細胞介素-10抗體 0.1ml
48570 LIPG/Endothelial lipase 內(nèi)皮脂肪酶抗體 0.2ml
48571 MSR1/CD204 人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒 巨噬細胞清道夫受體1/2/3抗體 0.2ml
48572 NPC1/Niemann Pick C1 尼曼匹克C1前體蛋白抗體 0.2ml
48573 Perilipin A+B 脂滴包被蛋白A+B抗體 0.2ml
48574 FLIP delta + gamma 凋亡調(diào)節(jié)蛋白δ+γ抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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