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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
48464 ADA/Adenosine deaminase 腺苷脫氨酶抗體 0.1ml
48465 Cryopyrin/CIAS1/NALP3 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體 0.1ml
48466 Cyclin B2 周期素B2抗體 0.1ml
48467 PRX/periaxin 軸周蛋白PRX抗體 0.1ml
48468 Calumenin/CALU 鈣腔蛋白 0.1ml
48469 CD98 CD98重鏈抗原抗體 0.1ml
48470 Emerin Emerin蛋白抗體 0.1ml
48471 AQP0/MIP26 水通道蛋白0抗體 0.1ml
48472 TYK2 非受體*蛋白激酶2抗體 0.1ml
48473 HRH1 組胺受體H1抗體 0.1ml
48474 HRH2 組胺受體H2抗體 0.1ml
48475 phospho-HRH1(Ser398) 磷酸化組胺受體H1抗體 0.1ml
48476 HOXA11 同源盒蛋白HOXA11抗體 0.1ml
48477 HOXA9 同源盒蛋白HOXA9抗體 0.1ml
48478 HOXB5 同源盒蛋白HOXB5抗體 0.1ml
48479 ID4 DNA結(jié)合抑制因子4抗體 0.1ml
48480 IGF2R/M6PR/CD222/Mannose 6 Phosphate Receptor 胰島素樣生長因子2受體抗體 0.1ml
48481 KCND1/Kv4.1 電壓門控鉀通道Kv4.1抗體 0.2ml
48482 GIRK1 G蛋白激活內(nèi)向鉀通道1抗體 0.1ml
48483 GIRK3/KCNJ9 G蛋白激活內(nèi)向鉀通道3抗體 0.1ml
48484 KCNK9/KCNK3 酸敏感鉀離子通道蛋白3抗體 0.1ml
48485 KCNN4 鈣激活鉀通道蛋白4抗體 0.1ml
48486 LGR4/GPR48 G蛋白偶聯(lián)受體48抗體 0.1ml
48487 VMAT1/VAT1 嗜鉻顆粒胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1抗體 0.1ml
48488 M Cadherin M鈣粘附分子抗體 0.1ml
48489 MAOA 單氨氧化酶A抗體 0.1ml
48490 MEIS1 同源盒蛋白Meis1抗體 0.1ml
48491 BNIP1/TRG8 Bcl2相互作用蛋白1抗體(轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白) 0.1ml
48492 BNIP2 Bcl2相互作用蛋白2抗體 0.1ml
48493 CLDND1 膜蛋白CLDND1抗體 0.1ml
48494 SCN11A/NAV1.9 鈉通道蛋白11α抗體 0.2ml
48495 SCN10A/NAV1.8 鈉通道蛋白10α抗體 0.2ml
48496 ICAM5/encephalin 細(xì)胞間粘附分子5抗體 0.1ml
48497 SCN1B 鈉離子通道β1抗體 0.1ml
48498 SCN8A/Nav1.6 鈉通道蛋白8α抗體 0.1ml
48499 Transglutaminase 轉(zhuǎn)*酶1抗體 0.1ml
48500 Sertad1 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI1抗體 0.1ml
48501 Sema3C Sema3C蛋白抗體 0.2ml
48502 Serca2/SERCA2 ATPase 肌漿/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶2抗體 0.1ml
48503 AP2 gamma 轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體 0.1ml
48504 P45017A1/Cytochrome P450 17A1 * P450 17A1抗體 0.1ml
48505 TRPV2/VRL1 辣椒素受體樣蛋白1抗體 0.1ml
48506 DICER1/Dicer 核糖核酸酶Dicer抗體 0.1ml
48507 Cullin 4B CUL4B蛋白抗體 0.1ml
48508 TIAM1 T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)蛋白1抗體 0.1ml
48509 SRD5A2 類固醇5α還原酶2抗體 0.1ml
48510 ANAPC1 細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 0.1ml
48511 AGEs 晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體 0.1ml
48512 Calpastatin 鈣蛋白酶抑制蛋白抗體 0.1ml
48513 TRPC3 *相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml
48514 RAB7 RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AB7抗體 0.1ml
48515 Septin 2/Sept2/NEDD5 人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒 神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體 0.1ml
48516 Prkg1/cGKI cGMP依賴性蛋白激酶1抗體 0.1ml
48517 PP2A beta/PPP2CB 蛋白質(zhì)磷酸酶2B抗體 PP2A β PP2A-β 0.1ml
48518 PSCD1 細(xì)胞附著蛋白PSCD1抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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