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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-14 20:15:31瀏覽次數(shù):176次
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人*11(KLK 11)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人*11(KLK 11)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人*11(KLK 11)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
48406 Galectin 1 半乳糖凝集素1抗體 0.1ml
48407 CENPB 著絲粒蛋白B抗體 0.2ml
48408 STMN3 原癌基因18家族STMN3蛋白抗體 0.1ml
48409 NPHS2/Podocin 腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體 0.1ml
48410 Cofilin 肌動蛋白結合蛋白CFL抗體 0.1ml
48411 EphA5/Eph receptor A5 *蛋白激酶A5受體抗體 0.1ml
48412 HHEX/HMPH 同源盒蛋白PRH抗體 0.1ml
48413 ETS1 associated protein II/EAPII ETS1相關蛋白2抗體 0.1ml
48414 TLR7 Toll樣受體7抗體 0.1ml
48415 HSD17B1/HSD17 羥類固醇脫氫酶17β抗體 0.1ml
48416 BCNG1/HCN1 腦環(huán)核苷酸門控通道蛋白1抗體 0.1ml
48417 BCAS3 乳腺癌相關蛋白3抗體 0.1ml
48418 MRGX1/MRGPRC/SNSR G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體 0.1ml
48419 TSPY1 睪丸特異定蛋白質(zhì)編碼Y1抗體 0.1ml
48420 DDCT/DDT D型多巴色素脫羧酶 0.2ml
48421 Cyclophilin B 親環(huán)蛋白PPIB抗體 0.2ml
48422 BCAS2 乳腺癌相關蛋白2抗體 0.1ml
48423 PLRP1/PNLIPRP1 胰脂肪酶相關蛋白1抗體 0.1ml
48424 BMP15 骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體 0.1ml
48425 BCAT1 胞漿支鏈氨基酸酸轉(zhuǎn)氨酶抗體 0.1ml
48426 BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 0.1ml
48427 Hepatic lipase 肝脂酶抗體 0.2ml
48428 GABA Transporter 1/GAT-1 γ氨基丁酸運載蛋白1抗體 0.1ml
48429 PAPPA 妊娠相關血漿蛋白A抗體 0.1ml
48430 PPT1 棕櫚酰蛋白硫酯酶1抗體 0.2ml
48431 CRHR2 促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體 0.1ml
48432 CHX10 CHX10蛋白抗體 0.1ml
48433 Glycophorin C/CD236 糖蛋白C抗體 0.1ml
48434 Frizzled 2 Wnt信號受體FZD2蛋白抗體 0.1ml
48435 IHH HHG2抗體 0.2ml
48436 Insig2 胰島素誘導基因2抗體 0.1ml
48437 MCHR/GPR24 G蛋白偶聯(lián)受體24抗體 0.1ml
48438 PSMC1/Proteasome 19S S4 26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型抗體 0.1ml
48439 ZDHHC17/HIP14 NFκB激活蛋白205抗體 0.1ml
48440 FANK1 HSD13蛋白抗體 0.1ml
48441 Destrin 19/ADF 肌動蛋白解聚因子19抗體 0.1ml
48442 Neurotensin/NTS 神經(jīng)緊張素抗體 0.1ml
48443 NESG1/CCDC19 鼻咽上皮細胞特異性蛋白1抗體 0.1ml
48444 FOXL2 小瞼裂綜合征蛋白BPES抗體 0.1ml
48445 XPC DNA補充修復XPC細胞蛋白抗體 0.1ml
48446 EPHA10 *蛋白激酶受體A10抗體 0.1ml
48447 TP53I8/EI24 腫瘤蛋白p53誘導蛋白8 0.1ml
48448 EVC2 膜蛋白EVC2抗體 0.1ml
48449 BMPR1B 骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體 0.1ml
48450 Vinculin 粘著斑蛋白抗體 0.1ml
48451 DNA Ligase 1 DNA連接酶1抗體 0.1ml
48452 FOXC1/FREAC3 叉頭相關轉(zhuǎn)錄因子3抗體 0.1ml
48453 SCYL1BP1 SCYL結合蛋白1抗體 0.1ml
48454 Gephyrin 橋尾蛋白抗體 0.1ml
48455 WNT7A 原癌基因wnt7a蛋白抗體 0.1ml
48456 BLK/MODY11 B淋巴細胞*激酶抗體 0.1ml
48457 COG1 COG1蛋白抗體 0.1ml
48458 BAP31 BAP31蛋白抗體人*11(KLK 11)ELISA試劑盒 0.1ml
48459 ADORA1/Adenosine A1 Receptor 腺苷A1受體抗體 0.1ml
48460 SDHB 鉻細胞瘤患者抑癌基因SDHB抗體 0.1ml
48461 ApoER2 載脂蛋白E2受體抗體 0.1ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人*11(KLK 11)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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