大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒發(fā)表的sci文章
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更新時間:2017-02-14 18:32:49瀏覽次數(shù):149次
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人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
48236 SEI2/SERTAD2 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體 0.2ml
48237 SIPA1 信號誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
48238 AGER 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 0.1ml
48239 Fast skeletal Myosin/MRLC2 骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體 0.1ml
48240 TFDP3 轉(zhuǎn)錄因子DP3抗體(肝癌相關(guān)抗原661) 0.2ml
48241 BMP1 骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切酶抗體 0.2ml
48242 SMARCA2/BRM ATP依賴解旋酶SMARCA2抗體 0.2ml
48243 Ferritin Light Chain 鐵蛋白輕鏈抗體 0.1ml
48244 CECR5 貓眼綜合征染色體候選基因5抗體 0.2ml
48245 CEE 跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體 0.2ml
48246 CESK1 分子伴侶CESK1蛋白抗體 0.2ml
48247 CHCHD2 丙型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的基因10蛋白抗體 0.2ml
48248 CHKL/Ethanolamine kinase beta 乙醇胺激酶β抗體 0.2ml
48249 CHORDC1 含半*和*豐富域蛋白1抗體 0.2ml
48250 HIV2 gp36 人類免疫缺陷病毒2型抗體(艾滋病病毒) 0.1ml
48251 phospho-CDK5(Tyr15) 磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 0.1ml
48252 MRC2/CD280 巨噬細(xì)胞甘露糖受體2抗體 0.1ml
48253 Tetranectin/CLEC3B/TNA 四連接素TN抗體 0.2ml
48254 CLLD8/SETDB2 組蛋白H3-K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
48255 FbxO6 F-box蛋白相關(guān)蛋白6抗體 0.2ml
48256 C3c/Complement fragment 3c 補(bǔ)體片段C3c抗體 0.2ml
48257 phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 0.1ml
48258 phospho-PP2A alpha(Tyr307) 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗體 0.1ml
48259 phospho-PP2A alpha/beta(Tyr119) 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗體 0.1ml
48260 phospho-eIF4EBP1(Thr36) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
48261 phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體 0.1ml
48262 PI3 Kinase p110 beta 磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 0.1ml
48263 SNX27 SNX27蛋白抗體 0.2ml
48264 TRPV4/TRP12 瞬時受體電位蛋白12抗體 0.2ml
48265 TH/T-H glycoprotein TH糖蛋白抗體 0.2ml
48266 UHRF1 核蛋白95抗體 0.2ml
48267 PPP4C */*蛋白磷酸酶4C抗體 0.2ml
48268 GNLY/NKG5 顆粒溶素抗體 0.2ml
48269 Tuftsin 促吞噬肽抗體 0.2ml
48270 LHR/CGR 促黃體生成素受體抗體 0.1ml
48271 capsid protein 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白 0.1ml
48272 Cathelicidin 抗菌肽CAMP抗體 0.1ml
48273 TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase 端粒酶調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
48274 KIRREL1/NEPH1 腎病樣蛋白1抗體 0.2ml
48275 CYP11B2 醛固酮合成酶CYP11B2抗體 0.2ml
48276 ANKRD53 錨蛋白重復(fù)域53抗體 0.2ml
48277 LCA/Lens culinaris agglutinin 扁豆凝集素 0.2ml
48278 ZnT-1 鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 0.2ml
48279 NPD014 1號染色體開放閱讀框63抗體 0.1ml
48280 RBP/Retinol binding protein *結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
48281 PMCA1 細(xì)胞膜鈣ATP酶1抗體 0.2ml
48282 CDH11/OB-Cadherin 鈣粘附蛋白-11抗體 0.1ml
48283 Lin-28B RNA結(jié)合蛋白LIN28B抗體 0.2ml
48284 HSP1/Protamine P1 精子*P1抗體 0.2ml
48285 EGR3 早期生長反應(yīng)蛋白3抗體 0.1ml
48286 SOX10 轉(zhuǎn)錄因子SOX10抗體人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒 0.2ml
48287 PMCA4/Calcium Pump PMCA4 ATPase 細(xì)胞膜鈣ATP酶4抗體 0.2ml
48288 phospho-ER-beta(ser105) 磷酸化雌激素受體β抗體 0.1ml
48289 MFGE8/BA46 乳腺上皮細(xì)胞抗原BA46抗體 0.2ml
48290 CHRNA3/AChRα3 煙堿型乙酰*受體α3抗體 0.2ml
48291 PEN2 早老素γ分泌酶2抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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