elisa檢測(cè),Sc5b-9末端補(bǔ)體復(fù)合物試劑盒
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人制瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人制瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人制瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
48003 WSTF 轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體 0.2ml
48004 Wnt8A 信號(hào)通路WNT8A抗體 0.2ml
48005 WNT2 信號(hào)通路Wnt2抗體 0.2ml
48006 CtIP/RBBP8 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白8抗體 0.2ml
48007 EID1 乙?;D(zhuǎn)移酶EID1抗體 0.2ml
48008 KDM5B/PLU1/Jarid1B 組蛋白去甲基化酶JARID1B抗體 0.2ml
48009 KMT8/Riz1/Riz2 轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體 0.2ml
48010 GLIPR1 腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
48011 RING1 環(huán)指蛋白1抗體 0.2ml
48012 PIG3/TP53I3 p53誘導(dǎo)蛋白3抗體 0.2ml
48013 PRMT4 組蛋白*甲基轉(zhuǎn)移酶CARM1抗體 0.2ml
48014 TP53I13 腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白13(腫瘤抑制基因) 0.2ml
48015 p53 DINP1 p53誘導(dǎo)核蛋白1抗體 0.2ml
48016 p73 alpha p53相關(guān)蛋白P73α抗體 0.2ml
48017 Frizzled 1/Wnt receptor Wnt信號(hào)受體蛋白抗體 0.1ml
48018 GNAT3 G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3抗體 0.2ml
48019 GPR124 G蛋白偶聯(lián)受體124抗體(腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記物) 0.2ml
48020 GPR172B G蛋白偶聯(lián)受體172B抗體 0.2ml
48021 GNAQ/Gα q G蛋白α亞單位蛋白Q抗體 0.2ml
48022 RAP1GDS1 G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1抗體 0.2ml
48023 RASGEF1A *核苷酸交換因子rasgef1a抗體 0.2ml
48024 RAB4 癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab4A抗體 0.2ml
48025 NSP1/SH2D3A SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體 0.2ml
48026 STARD8 GTP酶激活因子STARD8抗體 0.1ml
48027 WASF3 Verprolin同源結(jié)構(gòu)域包含蛋白3抗體 0.2ml
48028 ARL3 ADP核糖基化樣因子ARL3抗體 0.2ml
48029 DIRAS1 RAS相關(guān)抑細(xì)胞生長蛋白1抗體 0.2ml
48030 GRAP2 生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白2抗體 0.2ml
48031 DPOLA/DNA polymerase alpha DNA聚合酶α抗體 0.2ml
48032 NET1 神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1抗體 0.2ml
48033 RAB8B ras癌基因家族RAB8B抗體 0.2ml
48034 RALB Ras樣蛋白B抗體 0.2ml
48035 RALA+RALB Ras樣蛋白A+B抗體 0.2ml
48036 RASGAP RAS的GTP酶激活蛋白抗體 0.2ml
48037 RIAM/APBB1 interacting protein 1 β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體 0.2ml
48038 Rab11 ras癌基因家族Rab11蛋白抗體 0.1ml
48039 RAB2/RAB2A ras癌基因家族Rab2抗體 0.2ml
48040 RAB5 ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 0.1ml
48041 RAB8 ras癌基因家族Rab8蛋白抗體(原癌基因c MEL) 0.1ml
48042 RAB9 ras癌基因家族Rab9蛋白抗體 0.1ml
48043 RAB20 ras癌基因家族RAB20抗體 0.2ml
48044 RAB3A ras癌基因家族Rab3a抗體 0.1ml
48045 Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D ras癌基因家族Rab3A--Rab3D抗體 0.2ml
48046 RBP4 *結(jié)合蛋白4抗體 0.1ml
48047 REG1A 胰島細(xì)胞再生因子ICRF抗體 0.2ml
48048 Renin 腎素/血管緊張素形成酶Ren1抗體 0.1ml
48049 RSPO1 分泌性蛋白R(shí)SPO1抗體 0.2ml
48050 SERPIN A11 *蛋白酶抑制劑A11抗體 0.2ml
48051 SERPING1/C1 Inactivator 酯酶抑制蛋白C1IN抗體 0.2ml
48052 Alpha 2 antiplasmin α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體 0.2ml
48053 SOX9/SRA1 轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 人制瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒 0.1ml
48054 Thyroxine Binding Globulin/TBG/Serpin A7 甲狀腺素結(jié)合球蛋白抗體 0.2ml
48055 phospho-SOX9(Ser181) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 0.1ml
48056 H3-K4-HMTase SETD7 組蛋白H4-K4甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
48057 Slitrk1 神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人制瘤素M受體(OSMR)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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