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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-07 09:53:33瀏覽次數(shù):157次
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人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
47947 LLGL1/2 相似腫瘤抑制基因HUGL抗體 0.2ml
47948 phospho-LLGL1 + LLGL2(Ser650+Ser654) 磷酸化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體 0.1ml
47949 LRP12 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白12抗體(抑制腫瘤蛋白7) 0.2ml
47950 MCC 大腸癌腫瘤突變蛋白抗體 0.2ml
47951 MFSD2A 促進(jìn)調(diào)解蛋白家族2A抗體 0.2ml
47952 MIA2 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體 0.2ml
47953 MTSS1 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1 0.2ml
47954 MTUS1/Angiotensin II Type 2 Receptor 血管緊張素Ⅱ2型受體相互作用蛋白抗體 0.1ml
47955 NIT1 腈水解酶1抗體 0.2ml
47956 RASSF3 Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 0.2ml
47957 NPR2L/G21 protein G21蛋白質(zhì)抗體 0.2ml
47958 XAB2/SYF1 XAB2蛋白抗體 0.2ml
47959 PDGFRL 血小板源性生長(zhǎng)因子受體β樣蛋白抗體 0.2ml
47960 PDSS2 抑癌蛋白DLP1抗體 0.2ml
47961 PHAP1 蛋白磷酸酶2A抑制劑1抗體 0.2ml
47962 POU6F2 轉(zhuǎn)錄因子RPF1抗體 0.2ml
47963 PRKCDBP 蛋白激酶C delta結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
47964 Pinin 橋粒相關(guān)蛋白DRS抗體 0.2ml
47965 RASAL1 RAS蛋白樣激活劑1抗體 0.2ml
47966 RBM5/LUCA15 腫瘤抑制基因LUCA15抗體 0.2ml
47967 RERG Ras相關(guān)雌激素調(diào)節(jié)生長(zhǎng)抑制蛋白 0.2ml
47968 RHOBTB1 Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1抗體 0.2ml
47969 RIL 抑癌基因PDLIM4抗體 0.1ml
47970 RIN1 RAS抑制蛋白1抗體 0.2ml
47971 RND3/RHOE Rho家族GTP酶3抗體 0.1ml
47972 RSRC2 食道癌抑制生長(zhǎng)蛋白抗體 0.2ml
47973 PARG1/Rho GTPase activating protein 29 Rho GTP酶激活蛋白29抗體 0.2ml
47974 SASH1 腫瘤抑制基因PEPE1抗體 0.2ml
47975 SESN3 Sestrin3抗體 0.2ml
47976 LSP1 白細(xì)胞F肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
47977 E-cadherin/CD324 上皮鈣粘附分子抗體 0.1ml
47978 RUNX1T1/ETO 周期素D相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
47979 LARG Rho的*核苷酸交換因子12抗體 0.2ml
47980 SCHIP1/IQCJ IQCJ抗體 0.1ml
47981 SEZ6L 癲癇樣相關(guān)蛋白6抗體 0.2ml
47982 SHPRH 組蛋白連接作用蛋白抗體 0.2ml
47983 SIRT3 線粒體乙?;?抗體 0.2ml
47984 SLC5A8 鈉碘轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白8抗體 0.2ml
47985 HLTF 解旋酶樣轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.2ml
47986 SNF5 轉(zhuǎn)錄調(diào)控激活蛋白SNF5抗體 0.2ml
47987 SPARCL1/Ecm2 細(xì)胞外基質(zhì)蛋白2抗體 0.2ml
47988 SSBP2 抑癌基因SSDP2抗體 0.2ml
47989 ST5/DENND2B 抑癌蛋白5抗體 0.2ml
47990 TCHP 抑癌蛋白TCHP抗體 0.2ml
47991 TUSC1 肺癌抑癌蛋白1抗體 0.2ml
47992 TUSC3 前列腺癌抑癌蛋白3抗體 0.2ml
47993 TUSC5 抑癌基因5抗體 0.2ml
47994 Tomoregulin-1 腦腫瘤抑癌蛋白1抗體 0.2ml
47995 VILIP1 神經(jīng)視錐蛋白樣1抗體(神經(jīng)鈣蛋白) 0.2ml
47996 ZNF185 鋅指蛋白185抗體 0.2ml
47997 RBMX 糖蛋白P43抗體人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒 0.2ml
47998 PRB2/p130 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白p130抗體 0.1ml
47999 p95 NBS1/Cell cycle regulatory protein p95 細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體 0.2ml
48000 phospho-p95 NBS1(Ser343) 磷酸化滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體 0.1ml
48001 FAM123B/AMER1 腎母細(xì)胞瘤X蛋白抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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