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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-18 15:48:47瀏覽次數(shù):139次
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人神經降壓素(NT)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人神經降壓素(NT)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人神經降壓素(NT)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
47667 ADAMTS1 整合素樣金屬蛋白酶與*1型抗體 0.1ml
47668 ADAMTS4 整合素樣金屬蛋白酶與*4型抗體 0.1ml
47669 SLC25A20 線粒體二羧酸載體蛋白20抗體 0.1ml
47670 P2Y2 嘌呤ATP受體抗體 0.2ml
47671 PIH1D1/7 核仁同源蛋白17抗體 0.2ml
47672 Vesicle docking protein p115 囊泡對接蛋白p115抗體 0.2ml
47673 ADAMTS7 整合素樣金屬蛋白酶與*1型-7抗體 0.1ml
47674 BRLF1 EBV立即早期基因BRLF1抗體 0.2ml
47675 Cancer/testis antigen 1B/1A 腫瘤/睪丸抗原1B/1A 0.2ml
47676 ADAMTS7(NT) 整合素樣金屬蛋白酶與*1型-7抗體 (N端抗體) 0.1ml
47677 CTAG1B/Cancer/testis antigen 1 腫瘤/睪丸抗原1B 0.2ml
47678 ADAMTS8 整合素樣金屬蛋白酶與*8型抗體 0.2ml
47679 PRRSV M protein 豬藍耳病病毒M蛋白抗體 1ml
47680 CPN10 葉綠體伴侶蛋白抗體(蘋果) 1ml
47681 FMDV Polyprotein (3D polymerase) 口蹄疫病毒 0.2ml
47682 Clenbuterol Hydrochloride(Spiropent) */瘦肉精抗體 0.1ml
47683 Chloramphenicol *抗體 0.2ml
47684 ADAR1 (N-terminus) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(N端) 0.2ml
47685 BRLF1 立即早期癌基因BRLF1抗體(鼻咽癌基因) 0.2ml
47686 ADAR1 (C-terminus) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端) 0.2ml
47687 Ractopamine /PAYLEAN (1B12) 小鼠抗萊克多巴胺單克隆抗體 0.2ml
47688 Cellulase 纖維素酶 1ml
47689 Pectinesterase 果膠酶抗體 1ml
47690 DLK1/Delta/DLL1 (C-terminus) 穿膜蛋白DLK1抗體(C端) 0.1ml
47691 ADD1/alpha Adducin 內收蛋白a1抗體 0.2ml
47692 Gibberellins ?;撬?β-氨基乙磺酸抗體 0.1ml
47693 EGF 表皮生長因子抗體 0.1ml
47694 EGF 小鼠抗表皮生長因子抗體 0.1ml
47695 EGF 抗表皮生長因子抗體 0.1ml
47696 IL-6 白介素6抗體 0.1ml
47697 IGF I 胰島素樣生長因子1抗體 0.1ml
47698 PPAR Gamma 過氧化酶活化增生受體γ抗體 0.1ml
47699 C9orf156 9號染色體開放閱讀框156抗體 0.1ml
47700 P14ARF/CDKN2A 抑癌基因p16抗體 0.1ml
47701 MMP9 基質金屬蛋白酶9抗體 0.1ml
47702 TIMP-1(CT) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(C端) 0.1ml
47703 Adducin protein 內收蛋白抗體 0.1ml
47704 phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
47705 Gibberellins 抗赤霉素抗體 0.1ml
47706 phospho-AQP2(Ser264/261) 磷酸化水通道蛋白2抗體 0.1ml
47707 Mycobacterium bovis 牛結核桿菌菌體蛋白抗體 0.2ml
47708 CK12/Cytokeratin 12 細胞角蛋白12抗體 0.2ml
47709 HE4/Epididymal secretory protein E4 附睪分泌蛋白4抗體 0.2ml
47710 Beta galactosidase β半乳糖苷酶抗體 0.2ml
47711 NR2C2/TAK1 孤兒核受體TAK1抗體 0.1ml
47712 Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基爾曼氏細小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端 1ml
47713 Kilham Rat Virus/KRV-VP1/KRV-VP2 (C-terminus) 基爾曼氏細小病毒VP1/VP2抗體(大鼠潛在病毒KRV)C端 1ml
47714 Capsid protein VP1 大鼠細小病毒H-1株(H-1)抗體(N端) 1ml
47715 CRLF2 胸腺基質淋巴細胞生成素受體抗體 0.2ml
47716 ASB10 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體 0.1ml
47717 MARK4 */*蛋白激酶MARK4抗體 0.1ml
47718 phospho-MARK4(Ser423) 磷酸化*/*蛋白激酶MARK4抗體 0.1ml
47719 phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39) 磷酸化轉錄因子3抗體 0.1ml
47720 IgHV/IgH 免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗體人神經降壓素(NT)ELISA試劑盒 0.2ml
47721 Mammaglobin A 乳腺珠蛋白1抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人神經降壓素(NT)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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