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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-30 20:58:22瀏覽次數(shù):163次
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人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
47505 5 lipoxygenase/ALOX5 5-脂氧合酶抗體 0.1ml
47506 Phospho-5-Lipoxygenase(Ser271) 磷酸化5-脂氧合酶抗體 0.1ml
47507 Phospho-5-Lipoxygenase(Ser663) 磷酸化5-脂氧合酶抗體 0.1ml
47508 ALOX12/12 Lipoxygenase 12脂氧合酶抗體 0.1ml
47509 Penicillin G *G抗體 0.1ml
47510 8-OHdG 8-羥基脫氧鳥苷抗體 0.1ml
47511 RYBP/APAP1/CD337 凋亡相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
47512 Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1 心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 0.2ml
47513 ADORA1 腺苷A1A受體抗體 0.2ml
47514 AMP deaminase 1 腺苷單磷酸脫氨酶1抗體 0.2ml
47515 A2AR/Adenosine A2a receptor 腺苷A2A受體抗體 0.1ml
47516 AACT-Alpha1/A1ACT α-1抗胰*抗體 0.1ml
47517 AAK1 AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體 0.2ml
47518 Cyp2-j3 細胞色素P450Ⅱj3抗體 0.2ml
47519 OST-beta 有機溶質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白OSTβ抗體 0.2ml
47520 AANAT 芳香胺N-乙?;D(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
47521 AT2R2 血管緊張素Ⅱ受體2抗體 0.2ml
47522 Influenza A virus (Duck) 鴨流感病毒抗體 0.2ml
47523 TNF-alpha 腫瘤壞死因子-α抗體 0.1ml
47524 AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2抗體 0.2ml
47525 TDRD9/HIG1 缺氧誘導蛋白HIG1抗體 0.2ml
47526 SIRT1/sirtuin 1 沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1ml
47527 Spindly/CCDC99 亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
47528 TBX-5 轉(zhuǎn)錄因子Tbx5抗體 0.1ml
47529 AAT/Tryptase α-1抗*抗體 0.1ml
47530 AATK AATK細胞凋亡關(guān)聯(lián)*激酶抗體 0.2ml
47531 NMP-22 核基質(zhì)蛋白22 0.1ml
47532 AATF 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.2ml
47533 ABCA1/ABC1 腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體 0.1ml
47534 ABCD1/CCL22 嗜酸粒細胞趨化蛋白22抗體 0.1ml
47535 ABCB5 ATP結(jié)合蛋白家族5抗體 0.1ml
47536 ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體 0.1ml
47537 ABCF1 ATP結(jié)合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體 0.1ml
47538 ABCG1 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體 0.1ml
47539 ABCG2/CD338 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體 0.1ml
47540 KAT4 細胞周期基因1蛋白抗體 0.1ml
47541 ABCG4 ABC膜轉(zhuǎn)運蛋白抗體 0.1ml
47542 ABCG5 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體 0.2ml
47543 ABCG8 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員8抗體 0.2ml
47544 c-Abl/Abl1 非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47545 phospho-c-Abl(Tyr134) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47546 phospho-c-Abl(Tyr412) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47547 phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47548 phospho-c-Abl(Tyr204) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47549 phospho-c-Abl(Ser735) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47550 phospho-c-Abl(Tyr89) 人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47551 phospho-c-Abl(Tyr251) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47552 phospho-c-Abl(Tyr272) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47553 phospho-c-Abl(Tyr276) 磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體 0.1ml
47554 SPTLC1 *棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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