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人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽（PACAP）ELISA試劑盒

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人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

47455 beta-Amyloid(35-42)  β淀粉樣肽/Aβ42抗體 0.1ml
47456 ER α  雌激素受體α抗體 0.1ml
47457 CKLFSF2/CMTM2  趨化素樣因子超家族成員2抗體 0.2ml
47458 COX7A2  *氧化酶VIIA亞型2抗體 0.1ml
47459 CKLFSF2 isoform 1  趨化素樣因子超家族成員2亞型1抗體 0.2ml
47460 MAP65/ASE 1  擬南芥MAP65蛋白抗體 0.2ml
47461 Streptavidin/SA protein  鏈酶親和素抗體 0.1ml
47462 human Serum IgA  人血清型免疫球蛋白A抗體 0.2ml
47463 ETFA  電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白α抗體 0.2ml
47464 γ-taxilin/LSR5  脂多糖相關(guān)反應(yīng)蛋白5抗體 0.2ml
47465 T4/L-Thyroxine  甲狀腺素T4抗體 0.2ml
47466 HLA G(N-Terminus)  人類白細(xì)胞抗原G抗體（N端） 0.1ml
47467 HLA G(C-terminal)  人類白細(xì)胞抗原G抗體（C端） 0.1ml
47468 hemagglutinin protein/H  麻疹病毒血凝素抗體 0.2ml
47469 WIG-1/PAG608  野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體 0.1ml
47470 CD71/TFR/Transferrin receptor  轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體 0.1ml
47471 GAPDH(3E12)-Loading Control  3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體) 0.1ml
47472 GAPDH   3-磷酸甘油醛脫氫酶抗體(內(nèi)參抗體) 0.1ml
47473 beta-Actin (Loading Control)  β-肌動(dòng)蛋白抗體（內(nèi)參抗體） 0.1ml
47474 14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon)  14-3-3蛋白抗體 0.1ml
47475 phospho-14-3-3 protein zeta/delta(Ser58)  磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體 0.1ml
47476 14-3-3 family protein  蘋果14-3-3蛋白抗體(植物) 1ml
47477 GLI1/Zfp5  腦膠質(zhì)瘤相關(guān)蛋白抗體（鋅指蛋白5） 0.1ml
47478 Involucrin  囊包蛋白/內(nèi)披蛋白抗體 0.2ml
47479 human Fibrinogen  羊抗*抗體 0.1ml
47480 S100B/S100 beta  S100B蛋白抗體 0.2ml
47481 GDF8  生長(zhǎng)分化因子8/肌肉抑制素抗體 0.2ml
47482 2,4-D  2，4-二氯苯氧乙酸(除草劑)抗體 0.2ml
47483 2,4-D(24D1)  2，4-二氯苯氧乙酸(除草劑)單克隆抗體 0.1ml
47484 eIF4EBP1/4EBP1  eIF4E結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
47485 phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser64)  磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
47486 phospho-eIF4EBP1(Thr37/46)  磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
47487 phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70)  磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
47488 phospho-EIF4EBP1(Ser100)  磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
47489 phospho-EIF4EBP1(Ser111)  磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
47490 EIF5  真核翻譯起始因子5抗體 0.2ml
47491 4EBP2  eIF4E結(jié)合蛋白2抗體 0.1ml
47492 Cytokeratin 5/CK5  細(xì)胞角蛋白5抗體 0.1ml
47493 5-HT  5-羥色胺抗體 0.1ml
47494 HRPT2/CDC73/Parafibromin  甲狀旁腺功能亢進(jìn)蛋白2抗體（細(xì)胞分裂周期73） 0.2ml
47495 5-HTR1A  5-羥色胺受體1A抗體 0.1ml
47496 THOC2  轉(zhuǎn)錄因子THOC2抗體 0.2ml
47497 VEGF  血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體 0.1ml
47498 DNA Ligase IV/LIG4  DNA連接酶4抗體 0.2ml
47499 5-HTR1B  5-羥色胺受體1B抗體 0.1ml
47500 5-HTR2B  5-羥色胺受體2B抗體 0.1ml
47501 5-HTR2A人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒  5-羥色胺受體2A抗體 0.1ml
47502 5-HTT  5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.1ml
47503 5-HTR3  5-羥色胺受體3抗體 0.1ml
47504 5-HTR4  5-羥色胺受體4抗體 0.1ml

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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