人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

47258 c-phycocyanin(C-PC)  C-藻藍(lán)素(藻藍(lán)蛋白)  0.5mg
47259 CTGF (connective tissue growth factor)  結(jié)締組織生長因子(多肽抗原)  0.5mg
47260 Cyclin E  周期素E/原癌基因抗原  0.5mg
47261 Dnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A)  DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α(抗原)  0.5mg
47262 Cyclin C  周期素 C(抗原)  0.5mg
47263 CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP)  降鈣素基因相關(guān)肽  0.5mg
47264 CULLIN (Cdc53/CUL)    0.5mg
47265 CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase)  細(xì)胞色素P450單氧化酶(多肽抗原)  0.5mg
47266 CXorf36(uncharacterized protein Cxorf36 precursor)  脫羧酶蛋白體36 cxorf36抗原  0.5mg
47267 Deltex-1  (DTX1) (Deltex protein 1)抗原  0.5mg
47268 DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT)  DISC1 N端抗原  0.5mg
47269 DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT)  DISC1 C端抗原  0.5mg
47270 DR3/TRAMP (death receptor-3)  DR3 死亡受體（抗原）  0.5mg
47271 E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16)  人乳頭瘤病毒16型E7蛋白抗原  0.5mg
47272 EGF-R (Epidemal growth factor receptor)  表皮生長因子受體（抗原）  0.5mg
47273 Eukaryotic aspartyl protease(Rice)  天冬氨酸蛋白酶家族蛋白(水稻蛋白的一種)（抗原）  0.5mg
47274 FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor)  一種新型的胰島細(xì)胞因子(抗原)  0.5mg
47275 Fabp2 (fatty acid binding protein 2, intestinal)  脂肪酸結(jié)合蛋白2(抗原)  0.5mg
47276 ECG2 (sophagus cancer-related gene-2)  食道癌相關(guān)基因（抗原）  0.5mg
47277 Fibronectin (FN)  纖維連結(jié)蛋白(多肽抗原)  0.5mg
47278 FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor)  成纖維細(xì)胞生長因子-7/纖維母細(xì)胞生長因子 (抗原)  0.5mg
47279 FGFR1 peptide  堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體-1（多肽抗原）  0.5mg
47280 FGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2)  成纖維細(xì)胞生長因子受體2抗原  0.5mg
47281 FGF-8/HBGF-8 (Fibroblast growth factor 8)  成纖維細(xì)胞生長因子-8/纖維母細(xì)胞生長因子-8 (抗原)  0.5mg
47282 GAD-65 (glutamate decarboxylase)  *脫羧酶-65(C端多肽)  0.5mg
47283 GAPDH(Ribbt Anti-glyceraldehyde-3-phosphate Dehydrogease )   3-磷酸甘油醛脫氫酶（抗原）  0.5mg
47284 Galectin-3   半乳糖凝集素-3(抗原)  0.5mg
47285 GCS (glucosylceramide synthase, GCS)  葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶（抗原）  0.5mg
47286 GFP  綠色熒光蛋白  0.5mg
47287 Recombinant EGFP protein  重組增強(qiáng)型綠色熒光  100ug
47288 ER-alpha  雌激素受體alpha  0.5mg
47289 GHR (growth hormone receptor)  生長激素受體(抗原)  0.5mg
47290 GLUT1(Glucose transporter type 1)  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（抗原）  0.5mg
47291 hypothetical protein (LOC55652)  hypothetical protein 抗原  0.5mg
47292 HCCR-1(BRI3 binding protein)  人宮頸癌基因/bri3結(jié)合蛋白(抗原)  0.5mg
47293 pre S1/S2 protein [HBV]  乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2(抗原)  0.5mg
47294 HCV-HCBP1/ACY-3(Hepatitis C virus core-binding protein 1)  丙型肝炎病毒核心蛋白結(jié)合蛋白-1（抗原）  0.5mg
47295 HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P)  人類皰疹病毒8抗原  0.5mg
47296 HHV8/ORF K2/vIL-6(Human herpesvirus 8)  人類皰疹病毒8抗原  0.5mg
47297 HIF-1Alpha  缺氧誘導(dǎo)因子1α 多肽  0.5mg
47298 histone H3-like protein  組蛋白H3樣蛋白多肽  0.5mg
47299 histone H3-like protein  組蛋白H3樣蛋白（C端多肽）  0.5mg
47300 histone H3-like protein  組蛋白H3樣蛋白（N端多肽）  0.5mg
47301 HIV-1(human immunodeficiency virus type 1)  艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)  0.5mg
47302 HIV-1(human immunodeficiency virus type 1)  艾滋病病毒-1/人類免疫缺陷病毒1型(抗原)  0.5mg
47303 Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein)  麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽  0.5mg
47304 Measles virus protein(Plant2 derived measles virus hemagglutinin protein)  麻疹病毒紅血球凝集素蛋白多肽  0.5mg
47305 HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1)  高遷移率族蛋白-1(抗原)  0.5mg
47306 HSL(hormone-sensitive lipase)  荷爾蒙敏感脂肪酸（抗原）  0.5mg
47307 HSP-27(Heat Shock Protein 27)  熱休克蛋白-27(抗原)  0.5mg
47308 HSP-90Alpha(Heat Shock Protein 90Alpha )  熱休克蛋白90α(抗原)  0.5mg
47309 HSP-90 Beta (heat sock protein-90 Beta)  熱休克蛋白-90β （抗原）  0.5mg
47310 IASPP(inhibitory member of the ASPP family)  腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員(抗原)  0.5mg
47311 CD54/ICAM-1 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒 細(xì)胞間粘附分子-1  0.5mg
47312 IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta)  白介素1β（白細(xì)胞介素-1β）(多肽抗原)  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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