人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

47031 PAK7/PAK5/MBT  激活激酶PAK7/PAK5抗原  0.5mg
47032 PAR-1 (Protease-activated receptors-1)  蛋白酶激活受體-1抗原  0.5mg
47033 PAR-2 (Protease-activated receptors-2)  蛋白酶激活受體-2抗原  0.5mg
47034 PAR4 (protease-activated receptor 4)  蛋白酶活化受體4/前列腺細胞凋亡反應(yīng)蛋白4抗原  0.5mg
47035 PARP(poly ADP-ribose polymerase)N-Terminus  多腺苷二磷酸多聚酶抗原(N端)  0.5mg
47036 PAX8(Paired box gene 8)  配對盒基因8抗原  0.5mg
47037 PAX9(Paired box gene 9)  配對盒基因9抗原  0.5mg
47038 P-cadherin(placental)  P-鈣粘附分子抗原  0.5mg
47039 LI-cadherin(liver-intestine cadherin)  肝腸鈣粘連蛋白抗原  0.5mg
47040 PDCD4(programmed cell death 4)  凋亡相關(guān)蛋白4抗原  0.5mg
47041 TFAR19(TF-1 cell apoptsis-related gene 19)  凋亡相關(guān)蛋白TFAR19抗原  0.5mg
47042 PCNA(phosphos Dyr211)peptide  磷酸化增殖細胞核多肽抗原  0.5mg
47043 PCX/PODXL(Podocalyxin)  足細胞特異蛋白抗原  0.5mg
47044 PDGF-BB peptide  血小板源性生長因子-BB抗原  0.5mg
47045 Pdx1(pancreatic and duodenal homeobox 1)  胰十二指腸同源異型盒基因抗原  0.5mg
47046 pectinesterase inhibitor 18 peptide  果膠酶抗原  0.5mg
47047 PEG10(Paternally expressed gene 10)  肝癌高表達基因抗原  0.5mg
47048 PENK/Enkephalin A(Preproencephalin A)  腦啡肽  0.5mg
47049 PEPT2 (Peptide-transporters 2)  腸道肽轉(zhuǎn)運蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運蛋白2抗原  0.5mg
47050 PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase)  蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗原  0.5mg
47051 FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein)  纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗原  0.5mg
47052 P-GP(P-glycoprotein)  P-糖蛋白抗原  0.5mg
47053 Pepsinogen C peptide  *原C蛋白抗原  0.5mg
47054 PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha)  過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗原  0.2mg
47055 PGRN (progranulin)  顆粒蛋白前體抗原  0.5mg
47056 PHB(Prohibitin)  抑制素/腫瘤抑制因子抗原  0.5mg
47057 PKA(Protein Kinase A)  蛋白激酶A(多肽)  0.5mg
47058 PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase)  *型纖溶酶原激活因子（多肽）  0.5mg
47059 Podoplanin Protein  平足蛋白抗原  0.5mg
47060 Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor)  “撲克蒙"蛋白又稱“波克曼"蛋白  0.5mg
47061 Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1)  多囊腎蛋白1抗原  0.5mg
47062 Polycystin 2(polycystic kidney disease 2)  多囊腎蛋白2抗體  0.5mg
47063 phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide  磷酸化蛋白激酶B抗原（*磷酸化位點：473）  0.5mg
47064 RKIP(Raf kinase inhibitor protein)  Raf激酶抑制蛋白抗原  0.5mg
47065 pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus  乙肝病毒pre-X蛋白抗原（N端）  0.5mg
47066 pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus]  乙肝病毒pre-X蛋白抗原（C端）  0.5mg
47067 PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3)  *羥化酶(多肽)  0.5mg
47068 ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 )  新型金屬基質(zhì)蛋白酶(抗原)  0.5mg
47069 Adiponectin  脂聯(lián)素（多肽抗原）  0.5mg
47070 Adipo R1(adiponectin receptor 1)  脂聯(lián)素受體-1(抗原)  0.5mg
47071 Adipo R2(adiponectin receptor 2)  脂聯(lián)素受體-2(抗原)  0.5mg
47072 PSAP/PAP peptide  前列腺酸性磷酸酶抗原  0.5mg
47073 PSAP/PAP peptide (human)  前列腺酸性磷酸酶抗原(人)  0.5mg
47074 P-selectin  P選擇素抗原  0.5mg
47075 CD63/MLA1  溶酶體膜糖蛋白抗原  0.5mg
47076 PTEN/MMAC1(CT)human, mo, rat, pig, dog, bovine, horse, chicken  一種腫瘤抑制基因抗原（C端）  0.5mg
47077 Parvalbumin  微白蛋白/細小清蛋白抗原  0.5mg
47078 Peptide YY  酪酪肽多肽（1-36）  0.5mg
47079 Rad51  Rad51抗原  0.5mg
47080 RAP1A (RAS-related protein-1a precursor)  Rap1A抗原  0.2ml
47081 RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta)  維甲酸受體-β抗原  0.5mg
47082 RASSF1A(Ras association domain family 1A)  Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗原  0.5mg
47083 Resistin  抵抗素抗原人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒  0.5mg
47084 RGS2 peptide  G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗原  0.5mg
47085 RhoA (RhoA protein)  RhoA抗原  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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