人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

46976 NAP1 (nucleosome assembly protein 1)  核小體組裝蛋白1（多肽）  0.5mg
46977 N-cadherin  N-鈣粘附分子抗原  0.5mg
46978 E-cadherin  E-鈣粘附分子抗原  0.5mg
46979 Nephrin Protein  *  0.5mg
46980 Neurocan  神經(jīng)粘蛋白抗原  0.5mg
46981 NF2/merlin(neurofibromatosis type 2)  2型神經(jīng)纖維瘤抗原  0.5mg
46982 NFATc1  活化T細(xì)胞核因子1蛋白  0.5mg
46983 phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide  磷酸化細(xì)胞核因子/磷酸化k基因結(jié)合核因子抗原  0.5mg
46984 NF-KapBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB)  細(xì)胞核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗原  0.5mg
46985 NGN3(neurogenin 3; Neurog3)  神經(jīng)元素3抗原  0.5mg
46986 NGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6)  鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6（多肽）  0.5mg
46987 NIT2 (nitrilase family, member 2)  NIT2蛋白抗原  0.5mg
46988 NKA(Neurokinin A)  神經(jīng)激肽A抗原  0.5mg
46989 NKG2A/CD159a/KLRC1  NK細(xì)胞受體2A/自然殺傷細(xì)胞活化性受體2A抗原  0.5mg
46990 NKG2D(natural killer cell group 2D)  NK細(xì)胞受體/自然殺傷細(xì)胞活化性受體  0.5mg
46991 Nm23(NDP Kinase A,NDPKA)  腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗原  0.5mg
46992 Nm23-H1 (nucleoside dIPhosphatase kinase A)  腫瘤抑制基因抗原  0.5mg
46993 Nogo-B/A  軸索過度生長抑制因子-B/A抗原  0.5mg
46994 NOS-2 peptide  一氧化氮合成酶-2多肽抗原  0.5mg
46995 Notch1/MOTC(Neurogenic locus notch homolog protein 1)  跨膜受體蛋白Notch-1抗原  0.5mg
46996 NADPH peptide  還原型輔酶Ⅱ抗原  0.5mg
46997 proCNP/NPPC (pro-natriuretic peptide)  促尿鈉排泄肽前體C抗原  0.5mg
46998 NPY2R(Neuropeptide Y Receptor Type 2)  神經(jīng)肽Y受體2（多肽）  0.5mg
46999 NPY1R (neuropeptide Y1 receptor)  神經(jīng)肽Y1受體抗原  0.5mg
47000 NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase l)  醌氧化還原酶抗原  0.5mg
47001 NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  *受體1（多肽）  0.5mg
47002 NR1/NMDAR1/GLUR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  *受體1抗原  0.5mg
47003 NR1/NMDAR1  *受體1  0.5mg
47004 NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C)  *受體2C（多肽）  0.5mg
47005 N-ras  原癌基因抗原  0.5mg
47006 Nrf2 peptide  核因子2相關(guān)因子2抗原  0.5mg
47007 NRF-1(nuclear respiratory factor-1)  核呼吸因子-1抗原  0.5mg
47008 NSE (neuron specific enolase)  神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗原  0.5mg
47009 NTCP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide)  鈉離子/牛磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原  0.5mg
47010 Ghrelin 28  腦腸肽28  0.5mg
47011 OCLN(Occluding)  咬合蛋白抗原  0.5mg
47012 Oct-4(Octamer-4)  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗原  0.5mg
47013 ODC(Ornithine decarboxylase)  *脫羧酶抗原  0.5mg
47014 ompF(putative outer membrane porin F protein)  小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌膜通道蛋白抗原  0.5mg
47015 OLFM1 peptide  嗅球蛋白1多肽抗原  0.5ml
47016 ORX-A(orexin-A)  增食欲素-A/欲激素A抗原  0.5mg
47017 OTR(oxytocin receptor)  *受體  0.5mg
47018 OXR (Orexin receptor)  食欲素受體(多肽)  0.5mg
47019 P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related)  增殖潛能相關(guān)蛋白抗原  0.5mg
47020 P19ARF  p19ARF抑癌基因抗原  0.5mg
47021 phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) peptide  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗原  0.5mg
47022 MKK3(MAP Kinase Kinase 3)  絲裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗原  0.5mg
47023 P53(wt-p53)  腫瘤抑制基因抗原（野生型P53）  0.5mg
47024 Mtp53(Mutant type p53)  突變型P53抗原  0.5mg
47025 WIG-1(wtp53-induced gene 1)  野生型p53誘導(dǎo)基因1抗原  0.5mg
47026 P73 protein  P73腫瘤抑制基因抗原人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒  0.5mg
47027 p70 S6 Kinase/P70 Beta1  p70S6Kb抗原  0.5mg
47028 PALB2(partner and locaizer of BRCA2)  乳腺癌易感基因相關(guān)蛋白2  0.5mg
47029 PAFR/PTAFR  血小板活化因子受體抗原  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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