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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-22 18:03:26瀏覽次數(shù):185次
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人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
46866 IL-17(Interleukin-17)human 白介素-17抗原(人) 0.5mg
46867 IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白細(xì)胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子 0.5mg
46868 IL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原 0.5mg
46869 IL-1 Alpha (Interleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原 0.5mg
46870 IL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠) 0.5mg
46871 IL-2 (Interleukin-2)Human IL-2抗原(人) 0.5mg
46872 IL-23(Interleukin-23) 白介素-23抗原 0.5mg
46873 IL-4(Interleukin-4) 白介素4抗原 0.5mg
46874 IL-4(Interleukin-4)human peptide 白介素4抗原 0.5mg
46875 IL-5 peptide 白細(xì)胞介素5抗原 0.5mg
46876 IL-6 (Interleukin-6) Human 白介素6 0.5mg
46877 IL-7(Interleukin-7) 白介素7抗原 0.5mg
46878 IL-6R Alpha (IL6R-alpha) 白細(xì)胞介素6受體α抗原 0.5mg
46879 gp130/IL-6R 白介素-6受體抗原 0.5mg
46880 IL-7Ra/CD127 peptide 白細(xì)胞介素-7受體a抗原 0.5mg
46881 ING1/p33(inhibitor of growth gene 1) 生長(zhǎng)抑制因子基因1抗原 0.5mg
46882 Inhibin Alpha 抑制素α抗原 0.5mg
46883 Inhibin beta A peptide 抑制素beta A抗原 0.5mg
46884 Inhibin beta B 抑制素βB抗原 0.5mg
46885 Integrin Alpha3 整合素α3抗原 0.5mg
46886 Integrin Beta5 整合素β5抗原 0.5ml
46887 Integrin alpha 1 整合素α1抗原 0.5mg
46888 Integrin Alpha4 Beta7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7) 整合素α4β7抗原 0.5mg
46889 Integrin AlphaE2/CD103 整合素αE2抗原 0.2ml
46890 ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原 0.5mg
46891 IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mg
46892 IRF-1(Interferon regulatory factor-1) 干擾素調(diào)節(jié)因子抗原 0.5mg
46893 IRAK 2 白介素-1受體相關(guān)激酶2 0.5mg
46894 IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide 白介素-1受體拮抗劑抗原 0.5mg
46895 Integrin a7(integrin alpha 7) 整合素α7抗原 0.5mg
46896 integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29) 粘附分子整合素β1抗原 0.5mg
46897 Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e) 粘附分子整合素α5抗原 0.5mg
46898 Integrin alpha V/CD51 peptide 整合素αV抗原 0.5mg
46899 JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 蛋白質(zhì)*激酶JAK-1抗原 0.5mg
46900 JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2) 蛋白質(zhì)*激酶JAK-2抗原 0.5ml
46901 phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008) 磷酸化蛋白*激酶JAK-2抗原 0.5mg
46902 JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3) c-Jun氨基末端激酶1/3多肽抗原 0.5mg
46903 phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 磷酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原 0.2ml
46904 Ki-67(Antigen identified by monoclonal antibody Ki 67) Ki-67 Antigen 0.5mg
46905 Klf4 (Kruppel likefactor 4) 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子抗原 0.5mg
46906 phospho-KLF5/Krueppel-like factor 5 (pSer272) 磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原 0.5mg
46907 phospho-Klf5/CKLF/Kruppel like factor 5, Human, mo, rat, horse, bovine, rabbit, pig, dog 磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗原 0.5mg
46908 LDH(Lactate Dehydrogenase) 乳酸脫氫酶抗原 0.5mg
46909 Leptin receptor 瘦素受體 0.5mg
46910 PAFAH2/Lp-PLA2/PLA2G7(plaet-activating factor acetylhydrolase 2) 脂蛋白磷脂酶A2抗原 0.2mg
46911 Lgr5/GPR49 腸上皮干細(xì)胞蛋白(多肽) 0.5mg
46912 LH(Luteinizing Hormone) 促黃體生成素抗原 0.5mg
46913 LH(Luteinizing Hormone) 人促黃體生成素(多肽) 0.5mg
46914 LH/CG Receptor(Luteinizing Hormone/Choriogonadotropin Receptor) 人促黃體生成素受體抗原 0.5mg
46915 L-HDC (L-Histidine decarboxylase) L-*脫羧酶抗原 0.5mg
46916 LIF peptide 白血病抑制因子抗原 0.5mg
46917 LIFR/CD118 peptide 白血病抑制因子受體抗原 0.5mg
46918 Lingo-1 Nogo受體作用蛋白抗原人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒 0.5mg
46919 LIS1(Lissencephaly-1 protein) 無腦回的致病基因LIS1抗原 0.5mg
46920 LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原 0.5mg
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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