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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-23 23:33:43瀏覽次數(shù):209次
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人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
46582 Cdc2/P34CDC2/CDK1(Cell division control protein 2) 周期素依賴激酶1抗原 0.5mg
46583 CD339/Jagged1 CD339/Jagged1抗原 0.5mg
46584 Cdc34 peptide 細(xì)胞周期調(diào)控因子34抗原 0.5mg
46585 CDK1 (Cyclin-Dependent Kinase 1) 周期素依賴性激酶1抗原 0.5mg
46586 CDK5(Cyclin Dependent Kinase 5) 周期素依賴性激酶5抗原 0.5mg
46587 CDK6 (Cyclin Dependent Kinase 6) 周期素依賴性激酶6抗原 0.5mg
46588 CDK7/Cyclin H/MAT1 周期素依賴性激酶7抗原 0.5mg
46589 CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8) 周期素依賴性激酶8抗原 0.5mg
46590 Cdkn1c/p57/Kip2 (Cyclindependent kinase inhibitor 1C) 周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗原 0.5mg
46591 CGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 ) 軟骨糖蛋白39(多肽) 0.5mg
46592 CEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原 0.5mg
46593 Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽) 0.5mg
46594 HER2 receptor(erbB-2 isoform 2) c-erbB-2受體抗原 0.5mg
46595 ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 表皮生長因子受體3(抗原) 0.5mg
46596 C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4) c-erbB-4癌基因抗原 0.5mg
46597 CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子抗原 0.5mg
46598 CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mg
46599 CGA(Chromogranin A) 嗜鉻粒素A抗原 0.5mg
46600 CGB(Chromogranin B) 嗜鉻粒素B抗原 0.5mg
46601 ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 毒蕈堿型乙酰*受體M1抗原 0.5mg
46602 ChRM3 peptide 毒蕈堿型乙酰*受體M3抗原 0.5mg
46603 CK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18(多肽) 0.5mg
46604 CK18 peptide 細(xì)胞角蛋白18多肽抗原 0.5mg
46605 CK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18抗原(C端) 0.5ml
46606 CK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原 0.5mg
46607 CK16(Cytokeratin 16) 細(xì)胞角蛋白16抗原 0.5mg
46608 CK17(Cytokeratin 17) 細(xì)胞角蛋白17抗原 0.5mg
46609 CK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原 0.5mg
46610 CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide 細(xì)胞角蛋白1/8/19抗原 0.5mg
46611 CK2(casein kinase 2) 細(xì)胞角蛋白2抗原 0.5mg
46612 CK5(Cytokeratin 5) 細(xì)胞角蛋白5抗原 0.5mg
46613 CK7(Cytokeratin 7)human 細(xì)胞角蛋白7抗原 0.5mg
46614 CK8(Cytokeratin 8) 細(xì)胞角蛋白8(多肽) 0.5mg
46615 CKIP-1(casein kinase 2 interaction protein 1) 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原 0.5mg
46616 CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4) 鈣激活氯離子通道4抗原 0.5mg
46617 C-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase) c-mer原癌基因*激酶抗原 0.5mg
46618 c-Myc tag c-Myc tag標(biāo)簽多肽 0.5mg
46619 AU5 tag AU5 tag標(biāo)簽抗原 0.5mg
46620 AU1 tag peptide AU1 tag標(biāo)簽多肽 0.5mg
46621 Glu-Glu Tag peptide Glu-Glu Tag多肽蛋白 0.5mg
46622 CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗原 0.5mg
46623 CNP/CNPase ( 2',3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase) C型鈉尿肽抗原 0.5mg
46624 CNTF(Ciliary Neurotrophic Factor) 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原 0.5mg
46625 factor V(Vcoagulation factor) *5抗體 0.5mg
46626 Collagen III (Anti-Collagen Type III ) 抗Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原) 0.5mg
46627 Collagen III (Anti--Collagen Type III ) Ⅲ型膠原抗原(Collagen Ⅲ Ⅲ型膠原) 0.5mg
46628 Collagen IV IV型膠原(Collagen Ⅳ Ⅳ 型膠原) 0.5mg
46629 Collagen I(Anti-Collagen Type I) I型膠原蛋白 0.5mg
46630 Collagen V (Anti--Collagen Type V ) Ⅴ型膠原(多肽) 0.5mg
46631 CLDN1(Claudin 1) 人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒緊密連接蛋白1抗原 0.5mg
46632 Claudin-11 peptide 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗原 0.5mg
46633 CLDN1(Claudin 1)C-term 緊密連接蛋白1抗原(C端) 0.5mg
46634 COX-1 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-1) 前列腺素氧化環(huán)化酶1抗原 0.5mg
46635 CPT1A peptide 肉毒堿棕櫚酰基轉(zhuǎn)移酶1A多肽抗原 0.5mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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