人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

46360 ARIP2B(Activin receptor 2B)  激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體  0.5mg
46361 MTR-1A (Melatonin receptor-1A)  褪黑素受體（抗原）  0.5mg
46362 MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱：MYC  致癌基因（抗原）  0.5mg
46363 N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1)  核受體輔助抑制因子（抗原）  0.5mg
46364 Nestin  巢蛋白（神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白）（抗原）  0.5mg
46365 AR Alpha1( Alpha1-adrenergic receptor)  α1腎上腺素能受體抗原  0.5mg
46366 Apelin36  脂肪炎癥因子Apelin36  1mg
46367 Nestin  巢蛋白（神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白）（抗原）  0.5mg
46368 ASCL1/MASH1(Achaete-scute homolog 1)  神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子抗原  0.5mg
46369 ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1)  p53凋亡刺激蛋白1抗原  0.5mg
46370 ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2)  P53凋亡刺激蛋白2抗原  0.5mg
46371 neurofasciu-155  神經(jīng)束蛋白-155  0.5mg
46372 NGF- Beta  神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β(多肽片斷抗原)  0.5mg
46373 Ang I/AT1(Angiotensin I)  血管緊張素I抗原  0.5mg
46374 NGF-R(p75NTR)  神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（抗原）  0.5mg
46375 AT1R(Angiotensin II Type 1 Receptor)  血管緊張素Ⅱ-1型受體抗原  0.5mg
46376 AT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor)  血管緊張素Ⅱ-1型受體抗原  0.5mg
46377 NIK，NF-kappaB-Inducing Kinase  NFkB誘導(dǎo)的激酶（抗原）  0.5mg
46378 ATF1 (Activating Transcription Factor1)  活化復(fù)制因子1  0.5mg
46379 NKB (Neurokinins B)  神經(jīng)激肽B（抗原）  0.5mg
46380 ATF2 (Activating Transcription Factor2)  活化復(fù)制因子2（多肽）  0.5mg
46381 phospho-ATF2(pSer490/pSer498)  磷酸化活化復(fù)制因子2抗原  0.5mg
46382 NKR ； Neurokin B receptor (Neuromedin K receptor; NK-4 receptor)  神經(jīng)激肽-B受體（抗原）  0.5mg
46383 ATF3 (Activating Transcription Factor3)  活化轉(zhuǎn)錄因子3抗原  0.5mg
46384 ATM(ataxia angiectasia mutated)  毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗原  0.5mg
46385 ATF6(activating transcription factor 6)  活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原  0.5mg
46386 ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide)  鈉鉀ATP酶通道蛋白抗原  0.5mg
46387 Kir6.2 peptide  ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原  0.5mg
46388 AVPR2(arginine vasopressin receptor 2)  *加壓素受體2抗原  0.5mg
46389 Aurora B  極光激酶B抗原  0.5mg
46390 Nociceptin  孤菲肽（痛敏肽）（抗原）  0.2mg
46391 B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1)  程序性死亡配體1（多肽）  0.5mg
46392 Nociceptin receptor  孤菲肽受體（痛敏肽受體）（抗原）  0.5mg
46393 Nogo-A  軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-A（抗原）  0.5mg
46394 Nogo-66 1-40  Nogo-66 (1-40)  0.5mg
46395 Nogo R  軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子受體（多肽抗原）  0.5mg
46396 Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter)  相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原  0.5mg
46397 Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter)  相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原  0.5mg
46398 phospho-BAD(pSer128)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體  0.5mg
46399 Bak(BCL2 homologous antagonist/killer)  Bcl-2同源拮抗劑Bak（多肽）  0.2mg
46400 NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1)  一氧化氮合成酶-1（抗原）  0.5mg
46401 NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible  一氧化氮合成酶-2（抗原）  0.5mg
46402 Batroxobin  蛇毒巴曲酶抗原  0.5mg
46403 NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS  一氧化氮合成酶-3（抗原）  0.5mg
46404 NPY ( Neuropeptide Y)  神經(jīng)肽 Y（抗原）  0.5mg
46405 NR2B (Glutamate receptor)  *受體（抗原）  0.5mg
46406 NT-3  神經(jīng)生長(zhǎng)因子-3（抗原）  0.5mg
46407 NT-4,NT-5  神經(jīng)生長(zhǎng)因子4/5（抗原）  0.5mg
46408 NTN (Neurturin)  神經(jīng)生長(zhǎng)因子（抗原）  0.5mg
46409 Bcl-xL(human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse)  Bcl-xL蛋白抗原  0.5mg
46410 phospha-Bcl-xL (pSer62) peptide (human, mo, rat, bovine, dog, pig, sheep, horse)  磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒  0.5mg
46411 BCHE(butyrylcholinesterase)NT  丁酰*脂酶抗原(N端)  0.5mg
46412 BCHE(butyrylcholinesterase)CT  丁酰*脂酶抗原(C端)  0.5mg
46413 Nurr1  核受體相關(guān)因子-1（抗原）  0.5mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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