人Sc5b-9末端復(fù)合物ELISA試劑盒質(zhì)量保證
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-17 15:31:11瀏覽次數(shù):145次
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人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒實(shí)驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
46306 GR (Glucocorticoid receptor) 糖皮質(zhì)激素受體 多肽 0.5mg
46307 Annexin II 膜粘連蛋白-2抗原 0.5mg
46308 GSK-3 Beta(NT) (Glycogen Synthase Kinase-3 Beta) 糖原合酶激酶-3β(抗原) 0.5mg
46309 CKR-L2( G protein-coupled receptor-2 ) G蛋白偶聯(lián)受體-2(抗原) 0.5mg
46310 GSK-3 Beta, (Glycogen Synthase Kinase-3) 葡萄糖合成激酶-3(抗原) 0.5mg
46311 GTP-CH-1 三磷酸鳥苷環(huán)水解酶(抗原) 0.5mg
46312 H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型(抗原) 0.5mg
46313 HCV-Core 丙型肝炎病毒-C區(qū)(多肽) 1mg
46314 HCV-NS1 丙型肝炎病毒-NS1(抗原) 0.5mg
46315 HCV-NS3 丙型肝炎病毒-NS3(抗原) 0.5mg
46316 HCV-NS4a 丙型肝炎病毒-NS4a(抗原) 0.5mg
46317 HEV 戊型肝炎病毒(抗原) 0.5mg
46318 HGV(Hepatitis G vivus) 庚型肝炎病毒(抗原) 0.5mg
46319 HisX6 聚*標(biāo)簽蛋白 0.5mg
46320 HIV gp120 艾滋病病毒(抗原) 0.5mg
46321 HSP-60( Heat shock protein-60) 熱休克蛋白-60(抗原) 0.5mg
46322 HSP-70 peptide 熱休克蛋白-70(多肽抗原) 0.5mg
46323 alpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原 0.5mg
46324 ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑(抗原) 0.5mg
46325 IDE 胰島素降解酶(抗原) 0.5mg
46326 IGF-1 R 人胰島素樣生長因子-I受體 0.5mg
46327 IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5) 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5(抗原) 0.5mg
46328 Isulin 胰島素(抗原) 0.5mg
46329 APC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原 0.5mg
46330 Apelin 脂肪炎癥因子Apelin抗原 0.5mg
46331 Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原 0.5mg
46332 APG4B/AUTL1 APG4B細(xì)胞自噬相關(guān)抗原 0.5mg
46333 apoA1 (Apolipoprotein/APOA1 protein )human 載脂蛋白A1抗原 0.5mg
46334 Apo J/Clusterin- Alpha/ Beta(Apolipoprotein J) 凝聚素α/β抗原 0.5mg
46335 Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原) 0.5mg
46336 Insulin Receptor-Alpha(ISR-Alpha) 胰島素受體-α(抗原) 0.5mg
46337 Insulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島素受體-β(抗原) 0.5mg
46338 IRS-1 胰島素受體底物-1(抗原) 0.5mg
46339 AQP3(aquaporin 3) 水通道蛋白-3抗原 0.5mg
46340 IRS-2 胰島素受體底物-2(抗原) 0.5mg
46341 AQP1(Aquaporin1) 水通道蛋白-1抗原 0.5mg
46342 IRS-3 胰島素受體底物-3(抗原) 0.5mg
46343 IRS-4 胰島素受體底物-4(抗原) 0.5mg
46344 AQP5(aquaporin Protein-5) 水通道蛋白-5抗原 0.5mg
46345 IRS P53 (Insulin receptor substrate P53)(多肽) 0.5mg
46346 PGE2 peptide 前列腺素E2抗原 0.5mg
46347 Integrin Beta chain (ITG- Beta3/ITGB3) 整合素-β3(抗原) 0.5mg
46348 AQP9(aquaporin Protein-9) 水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原) 0.5mg
46349 Leptin 瘦素(多肽抗原) 0.5mg
46350 Leptin receptor(long) 瘦素受體(長)(抗原) 0.5mg
46351 phospho-AR/androgen receptor( p-Ser580)peptide 雄激素受體(多肽) 0.5mg
46352 MAPK-1/2 絲裂原活化蛋白激酶(抗原) 0.5mg
46353 MAPKK2 絲裂原活化蛋白激酶激酶 0.5mg
46354 M2-PK ( pyruvate Kinase M2) 丙酮酸激酶-M2(抗原) 0.5mg
46355 M2-PK ( pyruvate Kinase M2 ) 丙酮酸激酶-M2(抗原) 0.5mg
46356 p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810) 磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗原人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒 0.5mg
46357 Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原) 0.5mg
46358 ARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原 0.5mg
46359 Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2) β-抑制蛋白1/2抗原 0.5mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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