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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-22 04:58:46瀏覽次數(shù):177次
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人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
46250 CT-R (Calcitonin receptor) 降鈣素受體(抗原) 0.5mg
46251 Ferritin peptide 鐵蛋白抗原 0.5mg
46252 Cytochrome C 細胞色素 C(抗原) 0.5mg
46253 ADRB3/ Beta3-AR ( Beta3-adrenergic receptor) 腎上腺素能受體β3 0.5mg
46254 Cytomegalovirus (CMV)PP65 細胞巨化病毒(多肽) 0.5mg
46255 DDC (DOPA decarboxylase) 多巴胺脫羧酶(抗原) 0.5mg
46256 EGFR- V III 人表皮生長因子受體-8(多肽片斷抗原) 0.5mg
46257 Alpha-AF/ Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase) α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原 0.5mg
46258 SCCA peptide 鱗狀細胞癌抗原 0.5mg
46259 Endothelin-1 內(nèi)皮素-1(多肽抗原) 0.5mg
46260 Endothelin-1 (ET-1) 內(nèi)皮素-1(抗原) 0.5mg
46261 ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白(抗原) 0.5mg
46262 ER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原) 0.5mg
46263 TIMP-1(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1(抗原) 0.5mg
46264 ER-Alpha/ Beta Estrpgen Receptor Alpha/ Beta 雌激素受體(抗原) 0.5mg
46265 ER- Beta (Estrogen receptor beta)peptide 雌激素受體(多肽抗原) 0.5mg
46266 Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mg
46267 EXPB-2 植物延展素-β(抗原) 0.5mg
46268 factor VIII 第八因子相關(guān)抗原(多肽片斷抗原) 0.5mg
46269 FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1 0.5mg
46270 Agrin peptide 聚集蛋白抗原 0.5mg
46271 Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a) 血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原 0.5mg
46272 FasL(抗原) 0.5mg
46273 Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原 0.5mg
46274 Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原) 0.5mg
46275 FGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素結(jié)合生長因子( 酸性成纖維細胞生長因子)(多肽片斷抗原) 0.5mg
46276 ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關(guān)基因(抗原) 0.5mg
46277 fgL2 (Fibrinogen-like 2) *原酶 (又稱:纖維介素蛋白;前凝血素) 0.5mg
46278 FLIP S/L peptide 凋亡調(diào)節(jié)基因之一(多肽抗原) 0.5mg
46279 FoxP3 叉頭蛋白3-T細胞轉(zhuǎn)錄因子(多肽抗原) 0.5mg
46280 GAD-65 (glutamate decarboxylase) *脫羧酶-65(抗原) 0.5mg
46281 GAP-43 ( Growth associated protein-43 ) 生長相關(guān)蛋白-43(抗原) 0.5mg
46282 Gastrin 胃泌素(抗原) 0.5mg
46283 AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基酰基*消旋酶抗原 0.5mg
46284 GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein) 膠質(zhì)纖維酸性蛋白(抗原) 0.5mg
46285 AMPK Beta1 (AMP-activated Protein Kinase beta-1) 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗原 0.5mg
46286 MMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1 0.5mg
46287 MMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2(多肽抗原) 0.5mg
46288 beta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,小鼠) 0.5mg
46289 MMP-3(matrix metalloproteinase-3/Transin-1/SL-1/Stromelysin-1 precursor) 基質(zhì)金屬蛋白酶-3(抗原) 0.5mg
46290 MMP-7(Matrilysin/matrix metalloproteinases-7) 基質(zhì)金屬蛋白酶-7(抗原) 0.5mg
46291 MMP-14(Matrix metalloproteinase-14) 金屬基質(zhì)蛋白酶-14 0.5mg
46292 GFRAlpha-1(GDNF family receptor alpha-1) GDNF家族受體α-1(抗原) 0.5mg
46293 Ang- II (Angiotensin II ) 血管緊張素II抗原 0.5mg
46294 GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(抗原) 0.5mg
46295 ANP(atrial natriuretic peptide) 心鈉肽(心鈉素)抗原 0.5mg
46296 GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原) 0.5mg
46297 GHRF (GHRH) 生長激素釋放激素(因子)(抗原) 0.5mg
46298 ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗原 0.5mg
46299 GLUT4(Glucose transporter type 4) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(抗原) 0.5mg
46300 GIP (Gastric Inhibitory polypeptide) 胃泌素抑制肽(抗原) 0.5mg
46301 ANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2) 血管位蛋白樣2/血管生成素樣蛋白-2(多肽) 人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒0.5mg
46302 GLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素樣肽-2(多肽抗原) 0.5mg
46303 GRP94 (gp96) 94kDa 糖調(diào)節(jié)蛋白(抗原) 0.5mg
46304 Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原 0.5mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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