人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

46028 BSA (bovine serum albumin)  牛血清白蛋白（第五組分）  5g
46029 KLH (keyhole limpet hemocyanin)  血藍(lán)蛋白  10mg
46030 OVA (ovalbumin)  雞卵白蛋白  10mg
46031 THY (thyroglobulin,TG)  甲狀腺球蛋白  10mg
46032 HSA/human Serum albumin  人血清白蛋白  10mg
46033 Hu Fibrinogen  *  10mg
46034 Streptavidin, SA  鏈霉親和素  1mg
46035 Protein G/FITC  FITC標(biāo)記蛋白-G  0.5ml
46036 Protein A  蛋白A  1mg
46037 GST-Tag protein  重組*-轉(zhuǎn)移酶  0.5mg
46038 Cholesterol  *  100g
46039 Beta-Amyloid(1-16)  β淀粉樣肽1-16（多肽蛋白）  0.5mg
46040 Beta-Amyloid (31-35)  β淀粉樣肽31-35（多肽蛋白）  0.1mg
46041 Beta-Amyloid(1-28)  β淀粉樣肽1-28（多肽蛋白）  0.5mg
46042 Beta-Amyloid(1-40)  β淀粉樣肽（1-40）（多肽蛋白）  0.1mg
46043 A Beta1-40 (mutation type, MT) peptide  突變型β淀粉樣肽1-40  0.1mg
46044 A Beta1-40 (H-3-me6;H-3-me13;H-3-me14; Beta-Amyloid 1-40)  β淀粉樣肽1-40（結(jié)構(gòu)改造）  0.1mg
46045 A Beta29-40( Beta-Amyloid 29-40)  β淀粉樣肽29-40(野生型)  0.1mg
46046 A Beta29-42( Beta-Amyloid 29-42)  β淀粉樣肽29-42(野生型)  0.1mg
46047 Beta-Amyloid (1-42)  β淀粉樣肽（1-42）  0.1mg
46048 Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35)  β淀粉樣肽25-35（多肽）  1mg
46049 Beta-Amyloid 1-42 CT  β淀粉樣肽 1-42 (C端多肽)  0.1mg
46050 Amylin  糖尿病相關(guān)肽（胰島淀粉樣肽）  0.5mg
46051 APP695-770 (Amyloid protein precursor)  淀粉樣肽前體蛋白（多肽抗原）  0.5mg
46052 Neuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14)  神經(jīng)保護(hù)肽  0.5mg
46053 Amylin(1-37) amide  糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽  0.5mg
46054 CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP)   瓜氨酸環(huán)肽  0.5mg
46055 CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP)  瓜氨酸環(huán)肽  0.5mg
46056 Streptococcus suis 2 (Cell protein)  2型豬鏈球菌菌體蛋白  1mg
46057 GLP-1(Glucagon-like peptide-1)(7-36)peptide  胰高血糖素樣肽-1（多肽）  0.1mg
46058 ADM (Adrenomedullin)ProAM-N20 Rat, human, mo, pig, dog, bov  腎上腺髓質(zhì)素蛋白(N端20肽)  0.5mg
46059 AGEs  晚期糖基化終末產(chǎn)物AGEs  50mg
46060 AGEs control article(advanced glycosylation end products control article)  晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對照品  50mg
46061 ET-1(Endothelin-1)  內(nèi)皮素-1（蛋白多肽 活性蛋白）  50ug
46062 GRGDS peptide  粘附多肽GRGDS  1mg
46063 PACAP(1-38 Peptide)  腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38（全蛋白）  0.5mg
46064 MBP(Myelin Basic Protein, MBP 68-86)  髓鞘堿性蛋白(多肽抗原)  0.5mg
46065 Bursin  囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽  100mg
46066 NPY ( Neuropeptide Y)1-36  神經(jīng)肽 Y（1-36多肽）  0.5mg
46067 Leupeptin   亮抑酶肽  1mg
46068 GRP( Gastrin Releasing Peptide )  促胃泌素釋放肽（抗原）  0.5mg
46069 BSA(標(biāo)準(zhǔn))  牛血清白蛋白（標(biāo)準(zhǔn)）  1mg
46070 MBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide  髓鞘堿性蛋白(多肽）大鼠  0.5mg
46071 MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG)  髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白(活性多肽)  1mg
46072 IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I )  胰島素樣生長因子-I（抗原）  0.5mg
46073 VIP (Vasoactive Intestinal peptide)  血管活性腸肽  0.5mg
46074 IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II )  胰島素樣生長因子-II（抗原）  0.5mg
46075 TP-5(Thymopentin)  *  0.5mg
46076 Galanin  神經(jīng)節(jié)肽  0.5mg
46077 GLP-2(Glucagon-like peptide-2)  胰高血糖素樣肽-2蛋白  0.5mg
46078 ADNP (NAP) 人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒(Activity-dependent Neuroprotective protein )  活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽(抗原）  0.5mg
46079 AACT(Alpha-1-Anti-chymotrypsin)  α-1抗胰*  10mg
46080 AACT protein(Alpha chymotrypsin protein)  胰*  5mg
46081 ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(1-39)  促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)（抗原）  0.1mg
46082 ADM 1-52/AM 1-52 (Adrenomedullin 1-52)  腎上腺髓質(zhì)素(1-52)  0.1mg
46083 Biotin/KLH  *偶聯(lián)血藍(lán)蛋白  2mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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