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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-24 01:13:46瀏覽次數(shù):196次
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人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
45561 二類殘留溶劑-氯仿標準品 1.2ml×3ampules
45562 二類殘留溶劑-環(huán)己烷標準品 1.2ml×3ampules 110-82-7 (Cy...
45563 二類殘留溶劑-1,2-二氯乙烯標準品 1.2ml×3ampules 540-59-0 (1,...
45564 二類殘留溶劑-二氯甲烷標準品 1.2ml×3ampules
45565 二類殘留溶劑-N,N-二甲基乙酰胺標準品 1.2ml×3ampules 127-19-5 (N,...
45566 二類殘留溶劑-N,N-二甲基甲酰胺標準品 1.2ml×3ampules
45567 二類殘留溶劑-1,4-二惡烷標準品 1.2ml×3ampules
45568 二類殘留溶劑-乙二醇標準品 1.2ml×3ampules
45569 二類殘留溶劑-甲酰胺標準品 1.2ml×3ampules
45570 二類殘留溶劑-己烷標準品 1.2ml×3ampules
45571 二類殘留溶劑-甲醇標準品 1.2ml×3ampules
45572 二類殘留溶劑-2-甲氧基乙醇標準品 1.2ml×3ampules 109-86-4 (2-...
45573 二類殘留溶劑-甲氧丁基酮標準品 1.2ml×3ampules 591-78-6 (Me...
45574 二類殘留溶劑-六氫化甲苯標準品 1.2ml×3ampules 108-87-2 (Me...
45575 二類殘留溶劑-N-甲基吡咯烷酮標準品 1.2ml×3ampules 872-50-4
45576 二類殘留溶劑-硝基甲烷標準品 1.2ml×3ampules 75-52-5 (Nit...
45577 二類殘留溶劑-吡啶標準品 1.2ml×3ampules
45578 二類殘留溶劑-環(huán)丁砜標準品 1.2ml×3ampules 126-33-0 (Su...
45579 二類殘留溶劑-四氫呋喃標準品 1.2ml×3ampules
45580 二類殘留溶劑-四氫萘標準品 1.2ml×3ampules 119-64-2 (Te...
45581 二類殘留溶劑-甲苯標準品 1.2ml×3ampules
45582 二類殘留溶劑-三氯乙烯標準品 1.2ml×3ampules
45583 二類殘留溶劑-二甲苯標準品 1.2ml×3ampules
45584 *標準品 Resorcinol 200mg 108-46-3
45585 棕櫚酸視黃酯標準品 Retinyl Palmitate 200mg
45586 *標準品 Ribavirin 200mg 36791-04-5
45587 *2標準品 Riboflavin (Vitamin B2) 500mg 83-88-5
45588 D-核糖標準品 Ribose 300mg 50-69-1
45589 利福布丁標準品 Rifabutin 50mg 72559-06-9
45590 *標準品 Rifampin 300mg 13292-46-1
45591 *醌標準品 Rifampin Quinone 25mg 13983-13-6
45592 *標準品 Riluzole 200mg 1744-22-5
45593 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 Riluzole Related Compound A 25mg 461-82-5
45594 *標準品 Rimantadine Hydrochloride 300mg 1501-84-4
45595 瑞美松龍標準品 Rimexolone 100mg 49697-38-3
45596 *標準品 Risedronate Sodium 350mg 115436-72-1
45597 利塞膦酸相關(guān)物質(zhì)A標準品 20mg 105462-23-5
45598 利塞膦酸相關(guān)物質(zhì)B標準品 20mg
45599 利塞膦酸相關(guān)物質(zhì)C標準品 20mg 75755-10-1
45600 *標準品 Risperidone 200mg
45601 *系統(tǒng)適用性用混合物標準品 10mg
45602 *雜質(zhì)混合物標準品 ea
45603 *標準品 Ritodrine Hydrochloride 200mg 23239-51-2
45604 *標準品 Ritonavir 200mg 155213-67-5
45605 *相關(guān)物質(zhì)混合物標準品 50mg
45606 卡巴拉汀酒石酸鹽K-異構(gòu)體人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒 20mg NA
45607 酒石酸卡巴拉汀標準品 Rivastigmine Tartrate 200mg 129101-54-8
45608 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 15mg 32634-68-7
45609 *相關(guān)物質(zhì)B標準品 15mg 25081-93-0
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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