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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
45459 *標(biāo)準(zhǔn)品 Procaine Hydrochloride 200mg 1951/5/8
45460 鹽酸甲基芐肼標(biāo)準(zhǔn)品 Procarbazine Hydrochloride 200mg 366-70-1
45461 馬來(lái)酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Prochlorperazine Maleate 200mg 1984/2/6
45462 鹽酸丙環(huán)定標(biāo)準(zhǔn)品 Procyclidine Hydrochloride 200mg 1508-76-5
45463 孕酮標(biāo)準(zhǔn)品 Progesterone 200mg 57-83-0
45464 氯胍相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Proguanil Related Compound C 25mg 13590-98-2
45465 氯胍相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 Proguanil Related Compound D 25mg 35708-82-8
45466 L-*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Proline 200mg 147-85-3
45467 鹽酸丙嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Promazine Hydrochloride 200mg 53-60-1
45468 *標(biāo)準(zhǔn)品 Promethazine Hydrochloride 500mg 58-33-3
45469 *標(biāo)準(zhǔn)品 Propafenone Hydrochloride 200mg 34183-22-7
45470 普羅帕酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Propafenone Related Compound B 50mg 88308-22-9
45471 1-丙醇標(biāo)準(zhǔn)品 1-Propanol 1.2ml×3ampules 71-23-8
45472 2-丙醇標(biāo)準(zhǔn)品 2-Propanol 1.2ml×3ampules 67-63-0
45473 2-異丙醇系統(tǒng)適用性 3X1ml標(biāo)準(zhǔn)品 2-Propanol System Suitability ea
45474 3-氨基丙醇標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 156-87-6
45475 *標(biāo)準(zhǔn)品 Propantheline Bromide 200mg 50-34-0
45476 *標(biāo)準(zhǔn)品 Proparacaine Hydrochloride 200mg 5875/6/9
45477 丙酸標(biāo)準(zhǔn)品 Propionic Acid (AS) 1.5ml×3ampules 1979/9/4
45478 二異丙酚標(biāo)準(zhǔn)品 Propofol 200mg 2078-54-8
45479 二異丙酚混合物標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
45480 二異丙酚相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
45481 二異丙酚相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 1988-11-0
45482 二異丙酚相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 141214-18-8
45483 鹽酸丙氧卡因標(biāo)準(zhǔn)品 Propoxycaine Hydrochloride 200mg 550-83-4
45484 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Propoxyphene Hydrochloride CII 1g 1639-60-7
45485 萘磺酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Propoxyphene Napsylate CII 1g 26570-10-5
45486 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
45487 *標(biāo)準(zhǔn)品 Propranolol Hydrochloride 200mg 318-98-9
45488 乙酸正丙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Propyl Acetate 1.2ml×3ampules 109-60-4
45489 碳酸丙烯酯標(biāo)準(zhǔn)品 Propylene Carbonate 200mg 108-32-7
45490 丙二醇單辛酸酯I型標(biāo)準(zhǔn)品 1g 31565-12-5
45491 丙二醇單辛酸酯II型標(biāo)準(zhǔn)品 1g 31565-12-5
45492 丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 1ml 68583-51-7
45493 丙二醇標(biāo)準(zhǔn)品 Propylene Glycol 1ml 57-55-6
45494 丙二醇二月桂酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Propylene Glycol Dilaurate 500mg 22788-19-8
45495 丙二醇單月桂酸酯I型標(biāo)準(zhǔn)品 500mg 27194-74-7
45496 丙二醇單月桂酸酯II型標(biāo)準(zhǔn)品 500mg 37321-62-3
45497 沒(méi)食子酸丙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Propyl Gallate 200mg 121-79-9
45498 羥苯丙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Propylparaben 200mg 94-13-3
45499 丙基硫氧嘧啶標(biāo)準(zhǔn)品 Propylthiouracil 200mg 51-52-5
45500 前列腺素A1標(biāo)準(zhǔn)品 Prostaglandin A1 25mg 14152-28-4
45501 前列腺素B1標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 13345-51-2
45502 蛋白A標(biāo)準(zhǔn)品 ea
45503 重組蛋白A標(biāo)準(zhǔn)品 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒ea NA
45504 原兒茶酸標(biāo)準(zhǔn)品 Protocatechuic Acid 25mg
45505 鹽酸普羅替林標(biāo)準(zhǔn)品 Protriptyline Hydrochloride 200mg 1225-55-4
45506 水楊梅提取物標(biāo)準(zhǔn)品 Pygeum Extract 150mg 94279-95-5
45507 *標(biāo)準(zhǔn)品 Pyran Pamoate 500mg 22204-24-6
45508 噻嘧啶相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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