人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

45354 鹽酸吡哌酯標(biāo)準(zhǔn)品 Piperidolate Hydrochloride  200mg 129-77-1 
45355 *乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Pirbuterol Acetate (AS) 200mg 65652-44-0 
45356 吡羅克酮乙醇銨標(biāo)準(zhǔn)品 Piroctone Olamine  200mg 68890-66-4 
45357 吡羅克酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Piroctone Related Compound A 15mg
45358 吡羅克酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Piroctone Related Compound B 25mg 50650-75-4 
45359 *標(biāo)準(zhǔn)品 Piroxicam  200mg 36322-90-4 
45360 普卡霉素標(biāo)準(zhǔn)品 Plicamycin 50mg 18378-89-7 
45361 聚克利樹脂標(biāo)準(zhǔn)品 Polacrilex Resin 100mg
45362 波拉克林鉀標(biāo)準(zhǔn)品 Polacrilin Potassium  200mg 65405-55-2 
45363 泊洛沙姆標(biāo)準(zhǔn)品 Poloxalene  500mg 9003/11/6
45364 泊洛沙姆液標(biāo)準(zhǔn)品 Poloxamer Liquid 1ml 9003/11/6
45365 泊洛沙姆固體標(biāo)準(zhǔn)品 Poloxamer Solid  1g 9003/11/6
45366 聚葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 Polydextrose  200mg 68424-04-4 
45367 聚二甲基硅氧烷標(biāo)準(zhǔn)品 Polydimethylsiloxane  500mg 9016-00-6 
45368 聚乙二醇200標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 200 1g 25322-68-3 
45369 聚乙二醇300標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 300 1g 25322-68-3 
45370 聚乙二醇400標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 400  1g 25322-68-3 
45371 聚乙二醇600標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 600 1g 25322-68-3 
45372 聚乙二醇1000標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 1000  1g 25322-68-3 
45373 聚乙二醇1500標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 1500  1g 25322-68-3 
45374 聚乙二醇3000標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 3000 1g 25322-68-3 
45375 聚乙二醇3350標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 3350 1g 25322-68-3 
45376 聚乙二醇4000標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 4000 1g 25322-68-3 
45377 聚乙二醇6000標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 6000 1g 25322-68-3 
45378 聚乙二醇8000標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 8000 1g 25322-68-3 
45379 聚乙二醇10000標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 10000 1g 25322-68-3 
45380 聚乙二醇12000標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 12000 1g 25322-68-3 
45381 聚乙二醇20000標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 20000 1g 25322-68-3 
45382 聚乙二醇35000標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Glycol 35000 1g 25322-68-3 
45383 高密度聚乙烯標(biāo)準(zhǔn)品 High Density Polyethylene  3 strips 9002-88-4 
45384 低密度聚乙烯標(biāo)準(zhǔn)品 Low-Density Polyethylene  3 strips 9002-88-4 
45385 聚氧化乙烯標(biāo)準(zhǔn)品 Polyethylene Oxide 100mg 25322-68-3 
45386 聚對(duì)苯二甲酸乙二酯標(biāo)準(zhǔn)品 3 strips 25038-59-9 
45387 聚對(duì)苯二甲酸乙二酯G標(biāo)準(zhǔn)品 3 strips 25640-14-6 
45388 聚甘油-3 二異硬脂酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Polyglyceryl 3 Diisostearate 1ml 63705-03-3 
45389 聚異丁烯標(biāo)準(zhǔn)品 Polyisobutylene 1g 9003-27-4 
45390 聚乙二醇15羥基硬脂酸標(biāo)準(zhǔn)品 Polyoxyl 15 Hydroxystearate 500mg 70142-34-6 
45391 聚氧乙烯硬脂酸酯2標(biāo)準(zhǔn)品 Polyoxyl 2 Stearyl Ether (AS) 1g 9005-00-9 
45392 聚氧乙烯硬脂酸酯20標(biāo)準(zhǔn)品 Polyoxyl 20 Stearyl Ether (AS) 1g 9005-00-9 
45393 硬脂酸聚乙二醇50標(biāo)準(zhǔn)品 Polyoxyl 50 Stearate 200mg 9004-99-3 
45394 硬脂酸聚乙二醇40標(biāo)準(zhǔn)品 Polyoxyl 40 Stearate  200mg 9004-99-3 
45395 聚*酯20標(biāo)準(zhǔn)品 Polysorbate 20  2g 9005-64-5 
45396 聚*酯40標(biāo)準(zhǔn)品 Polysorbate 40 (AS) 2g 9005-66-7 
45397 聚*酯60標(biāo)準(zhǔn)品 Polysorbate 60 (AS) 2g 9005-67-8 
45398 聚*酯80標(biāo)準(zhǔn)品 Polysorbate 80  2g 9005-65-6 
45399 聚乙酸乙烯酯標(biāo)準(zhǔn)品人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒 Polyvinyl Acetate  1g 9003-20-7 
45400 聚乙烯乙酸酯分散體標(biāo)準(zhǔn)品 Polyvinyl Acetate Dispersion 1g 9003-20-7 
45401 *標(biāo)準(zhǔn)品 Polyvinyl Alcohol 100mg 9002-89-5 
45402 苯甲酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品 Potassium Benzoate (AS) 1g 582-25-2 

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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