人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

45058 糖酸莫米松標(biāo)準(zhǔn)品 Mometasone Furoate  200mg 83919-23-7 
45059 莫能菌素鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Monensin Sodium  200mg 22373-78-0 
45060 莫諾苯宗標(biāo)準(zhǔn)品 Monobenzone 200mg 103-16-2 
45061 乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品 Monoethanolamine  1ml 141-43-5 
45062 單甘酯標(biāo)準(zhǔn)品 Monoglycerides 125mg 68990-53-4 
45063 *一鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Monosodium Glutamate (AS) 1g 142-47-2 
45064 馬來酸單十八酯標(biāo)準(zhǔn)品 Monostearyl Maleate  100mg 2424-62-6 
45065 *標(biāo)準(zhǔn)品 Monukast Sodium 150mg 151767-02-1 
45066 酒石酸莫侖太爾標(biāo)準(zhǔn)品 Moran Tartrate  100mg 26155-31-7 
45067 *標(biāo)準(zhǔn)品 Moricizine Hydrochloride 250mg 29560-58-5 
45068 一水合*標(biāo)準(zhǔn)品 Morphine Monohydrate CII (AS) 50mg 6009-81-0 
45069 *標(biāo)準(zhǔn)品 Moxifloxacin Hydrochloride  200mg 186826-86-8 
45070 莫西沙星相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 151213-15-9
45071 *標(biāo)準(zhǔn)品 Mupirocin  50mg 12650-69-0 
45072 *鈣標(biāo)準(zhǔn)品 Mupirocin Calcium 200mg 115074-43-6 
45073 *鋰標(biāo)準(zhǔn)品 Mupirocin Lithium  100mg 73346-79-9 
45074 *標(biāo)準(zhǔn)品 Mycophenolate Mofetil  200mg 128794-94-5 
45075 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
45076 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 79081-87-1 
45077 肉豆蔻酸標(biāo)準(zhǔn)品 Myristic Acid 200mg 544-63-8 
45078 肉豆蔻醇標(biāo)準(zhǔn)品 Myristyl Alcohol 1g 112-72-1 
45079 *標(biāo)準(zhǔn)品 Nabumetone  200mg 42924-53-8 
45080 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 127053-22-9 
45081 康格爾標(biāo)準(zhǔn)品 Nadolol  200mg 42200-33-9 
45082 *標(biāo)準(zhǔn)品 Nafcillin Sodium  200mg 7177-50-6 
45083 *標(biāo)準(zhǔn)品 Naftifine Hydrochloride  200mg 65473-14-5 
45084 萘啶酮酸標(biāo)準(zhǔn)品 Nalidixic Acid  200mg 389-08-2 
45085 鹽酸烯丙*標(biāo)準(zhǔn)品 Nalorphine Hydrochloride CIII 250mg 57-29-4 
45086 納洛酮標(biāo)準(zhǔn)品 Naloxone  125mg 465-65-6 
45087 鈉曲酮標(biāo)準(zhǔn)品 Naltrexone  200mg 16590-41-3 
45088 鈉曲酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 131670-05-8 
45089 諾龍標(biāo)準(zhǔn)品 Nandrolone CIII 50mg 434-22-0 
45090 癸酸諾龍標(biāo)準(zhǔn)品 Nandrolone Decanoate CIII 250mg 360-70-3 
45091 *標(biāo)準(zhǔn)品 Nandrolone Phenpropionate CIII 250mg 62-90-8 
45092 *標(biāo)準(zhǔn)品 Naphazoline Hydrochloride  200mg 550-99-2 
45093 萘標(biāo)準(zhǔn)品 Naphthalene  200mg 91-20-3 
45094 *標(biāo)準(zhǔn)品 Naproxen  200mg 22204-53-1 
45095 *鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Naproxen Sodium  200mg 26159-34-2 
45096 甲基鹽霉素標(biāo)準(zhǔn)品 Narasin  125mg 55134-13-9 
45097 鹽酸那拉曲坦標(biāo)準(zhǔn)品 Naratriptan Hydrochloride 125mg 143388-64-1 
45098 那拉曲坦混合物標(biāo)準(zhǔn)品 Naratriptan Resolution Mixture 20mg
45099 納他霉素標(biāo)準(zhǔn)品 Natamycin  200mg 7681-93-8 
45100 *標(biāo)準(zhǔn)品 Nateglinide  200mg 105816-04-4 
45101 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Nateglinide Related Compound A 10mg 7077/5/6
45102 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒 10mg 105816-05-5 
45103 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 5mg 105816-06-6 
45104 近紅外系統(tǒng)適用性參考標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品 Near IR System Suitability ea
45105 萘法唑酮鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Nefazodone Hydrochloride 200mg 82752-99-6 

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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