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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-14 13:15:07瀏覽次數(shù):114次
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人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
44858 葉黃素標(biāo)準(zhǔn)品 Lutein 1ml
44859 番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品 Lycopene 500mg
44860 利奈孕醇標(biāo)準(zhǔn)品 Lynestrenol 20mg 52-76-6
44861 L-賴氨酸醋酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 L-Lysine Acetate 200mg 57282-49-2
44862 L-賴氨酸鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 L-Lysine Hydrochloride 200mg 657-27-2
44863 L-溶血*標(biāo)準(zhǔn)品 350mg 9008-30-4
44864 油酸聚烴氧酯標(biāo)準(zhǔn)品 Polyoxyl Oleate 500mg 9004-96-0
44865 聚氧乙烯硬脂酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Polyoxyl 10 Stearyl Ether 1g 9005-00-9
44866 醋酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Mafenide Acetate 400mg 13009-99-9
44867 *標(biāo)準(zhǔn)品 Magaldrate 200mg 74978-16-8
44868 碳酸鎂標(biāo)準(zhǔn)品 Magnesium Carbonate (AS) 2g 546-93-0
44869 氯化鎂標(biāo)準(zhǔn)品 Magnesium Chloride (AS) 1g 7791-18-6
44870 *標(biāo)準(zhǔn)品 Magnesium Hydroxide (AS) 1g 1309-42-8
44871 磷酸鎂標(biāo)準(zhǔn)品 Magnesium Phosphate (AS) 2g 7757-87-1
44872 *標(biāo)準(zhǔn)品 Magnesium Salicylate 200mg 18917-95-8
44873 *標(biāo)準(zhǔn)品 Magnesium Stearate (AS) 5g 557-04-0
44874 馬拉硫磷標(biāo)準(zhǔn)品 Malathion 500mg 121-75-5
44875 馬來酸標(biāo)準(zhǔn)品 Maleic Acid 300mg 110-16-7
44876 蘋果酸標(biāo)準(zhǔn)品 Malic Acid 500mg 6915-15-7
44877 麥芽糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 Maltitol 200mg 585-88-6
44878 麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品 Maltol 4g 118-71-8
44879 麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)品 Maltose Monohydrate 500mg 6363-53-7
44880 扁桃酸標(biāo)準(zhǔn)品 Mandelic Acid (AS) 500mg 90-64-2
44881 錳福地吡三鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Mangafodipir Trisodium 200mg 140678-14-4
44882 錳福地吡相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
44883 錳福地吡相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
44884 錳福地吡相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
44885 *標(biāo)準(zhǔn)品 Mannitol 200mg 69-65-8
44886 氯標(biāo)準(zhǔn)品 Manganese Chloride (AS) 1g 13446-34-9
44887 甘露糖標(biāo)準(zhǔn)品 Mannose 300mg 3458-28-4
44888 *標(biāo)準(zhǔn)品 Maprotiline Hydrochloride 200mg 10347-81-6
44889 *標(biāo)準(zhǔn)品 Mazindol CIV 350mg 22232-71-9
44890 甲苯達(dá)唑標(biāo)準(zhǔn)品 Mebendazole 200mg 31431-39-7
44891 甲溴菲寧標(biāo)準(zhǔn)品 Mebrofenin 100mg 78266-06-5
44892 鹽酸美加明標(biāo)準(zhǔn)品 Mecamylamine Hydrochloride 200mg 826-39-1
44893 美加明相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 22321-23-9
44894 恩比興標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 55-86-7
44895 *標(biāo)準(zhǔn)品 Meclizine Hydrochloride 500mg 31884-77-2
44896 磺基水楊酸氯甲烯*標(biāo)準(zhǔn)品 Meclocycline Sulfosalicylate 300mg 73816-42-9
44897 甲氯滅酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Meclofenamate Sodium 500mg 6385-02-0
44898 醋酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Medroxyprogesterone Acetate 200mg 71-58-9
44899 醋酸*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
44900 甲羥松標(biāo)準(zhǔn)品 Medrysone 500mg 2668-66-8
44901 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Mefloquine Hydrochloride 100mg 51773-92-3
44902 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Mefloquine Related Compound A 20mg
44903 *標(biāo)準(zhǔn)品 Megestrol Acetate 500mg 595-33-5
44904 *標(biāo)準(zhǔn)品 Meglumine (AS) 500mg 6284-40-8
44905 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒 250mg 108-78-1
44906 美侖孕酮醋酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Melengestrol Acetate 125mg 2919-66-6
44907 美侖孕酮醋酸酯相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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