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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
44756 卡瓦提取物粉標(biāo)準(zhǔn)品 Powdered Kava Extract 1g
44757 醉椒素標(biāo)準(zhǔn)品 Kawain 200mg 500-64-1
44758 *標(biāo)準(zhǔn)品 Ketoconazole 200mg 65277-42-1
44759 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 68432-95-1
44760 *相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 66067-44-5
44761 *標(biāo)準(zhǔn)品 Ketoprofen 200mg 22071-15-4
44762 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 107257-20-5
44763 *標(biāo)準(zhǔn)品 Labetalol Hydrochloride 200mg 32780-64-6
44764 酮咯酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Ketorolac Tromethamine 200mg 74103-07-4
44765 無(wú)水乳糖標(biāo)準(zhǔn)品 Anhydrous Lactose 100mg 63-42-3
44766 乳糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 Lactitol 500mg 81025-04-9
44767 B-D-半乳糖苷酶標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 9031/11/2
44768 乳糖一水標(biāo)準(zhǔn)品 Lactose Monohydrate 500mg 5989-81-1
44769 乳酸標(biāo)準(zhǔn)品 Lactic Acid 1.5ml×3ampules 50-21-5
44770 *標(biāo)準(zhǔn)品 Lamotrigine 100mg 84057-84-1
44771 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 50-45-3
44772 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
44773 *相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 252186-79-1
44774 *標(biāo)準(zhǔn)品 Lactulose 750mg 4618-18-2
44775 乳糖酸標(biāo)準(zhǔn)品 Lactobionic Acid 200mg
44776 *標(biāo)準(zhǔn)品 Lamivudine 200mg 134678-17-4
44777 *溶液混合物A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
44778 *溶液混合物B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
44779 羊毛脂標(biāo)準(zhǔn)品 Lanolin (20 g) 20g 8006-54-0
44780 羊毛脂醇標(biāo)準(zhǔn)品 Lanolin Alcohols 5g 8027-33-6
44781 蘭素拉唑標(biāo)準(zhǔn)品 Lansoprazole 150mg 103577-45-3
44782 蘭素拉唑相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 131926-99-3
44783 *雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 ea 103577-40-8
44784 月桂酸標(biāo)準(zhǔn)品 Lauric Acid 500mg 143-07-7
44785 月桂酰聚氧甘油酯標(biāo)準(zhǔn)品 Lauroyl Polyoxylglycerides 500mg
44786 *標(biāo)準(zhǔn)品 Leflunomide 200mg 75706-12-6
44787 *標(biāo)準(zhǔn)品 Letrozole 200mg 112809-51-5
44788 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 112809-52-6
44789 L-*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Leucine 200mg 61-90-5
44790 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 455-14-1
44791 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 108605-62-5
44792 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 61643-23-0
44793 亞*鈣標(biāo)準(zhǔn)品 Leucovorin Calcium 500mg 1492-18-8
44794 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 74381-53-6
44795 左*鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Levalbuterol Hydrochloride 200mg 50293-90-8
44796 左*鹽酸鹽相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg
44797 左*鹽酸鹽相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 18910-68-4
44798 左*鹽酸鹽相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 18910-70-8
44799 左*鹽酸鹽相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 30mg
44800 左*鹽酸鹽相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 754926-25-5
44801 左*鹽酸鹽相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 174607-68-2
44802 左*鹽酸鹽相關(guān)物質(zhì)G標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 182676-90-0
44803 *相關(guān)物質(zhì)H標(biāo)準(zhǔn)品 5mg 870076-72-5
44804 鹽酸咪唑標(biāo)準(zhǔn)品 Levamisole Hydrochloride 125mg 16595-80-5
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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