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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-09 19:25:49瀏覽次數(shù):123次
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人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
44656 *標準品 Hydroxyurea 200mg 127-07-1
44657 鹽酸羥嗪標準品 Hydroxyzine Hydrochloride 500mg 2192-20-3
44658 鹽酸羥嗪相關(guān)物質(zhì)A標準品 25mg 303-26-4
44659 雙羥萘酸羥嗪標準品 Hydroxyzine Pamoate 500mg 10246-75-0
44660 天仙子胺相關(guān)物質(zhì)A標準品 10mg
44661 金絲桃甙標準品 Hyperoside 50mg 482-36-0
44662 醋酸琥珀羥丙甲纖維素標準品 Hypromellose Acetate Succinate 100mg 71138-97-1
44663 鄰苯二甲酸羥丙甲纖維素酯標準品 Hypromellose Phthalate 100mg 9050-31-1
44664 *標準品 Ibandronate Sodium 100mg 138926-19-9
44665 伊班膦酸相關(guān)物質(zhì)A標準品 25mg 625120-81-2
44666 *標準品 Ibuprofen 750mg 15687-27-1
44667 *相關(guān)物質(zhì)C標準品 0.2ml×3ampules 38861-78-8
44668 鹽酸依達比星標準品 Idarubicin Hydrochloride 50mg 57852-57-0
44669 *標準品 Idoxuridine 250mg 54-42-2
44670 異*標準品 Ifosfamide 500mg 3778-73-2
44671 咪唑標準品 Imidazole 200mg 288-32-4
44672 雙咪唑烷基脲標準品 Imidurea 200mg 39236-46-9
44673 亞氨基二芐標準品 Iminodibenzyl 25mg 494-19-9
44674 *一水合物標準品 Imipenem Monohydrate 100mg 74431-23-5
44675 鹽酸丙咪嗪標準品 Imipramine Hydrochloride 200mg 113-52-0
44676 *標準品 Indapamide 250mg 26807-65-8
44677 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 50mg 63968-75-2
44678 靛藍胭脂紅標準品 Indigotindisulfonate Sodium 500mg 860-22-0
44679 茚地那維標準品 Indinavir 100mg 180683-37-8
44680 茚地那維標準品(系統(tǒng)適應(yīng)用) Indinavir System Suitability 100mg 180683-37-8
44681 *標準品 Indocyanine Green 200mg 3599-32-4
44682 肌醇標準品 Inositol 500mg 87-89-8
44683 *標準品 Indomethacin 200mg 53-86-1
44684 胰島素標準品(2-8℃) Insulin 100mg 9004/10/8
44685 *標準品(2-8℃) ea
44686 人胰島素標準品(2-8℃) 100mg 11061-68-0
44687 高分子人體胰島素標準品 支 11061-68-0
44688 胰島素(牛)標準品(2-8℃) Insulin (Beef) 100mg 11070-73-8
44689 胰島素(豬)標準品(2-8℃) 100mg 12584-58-6
44690 賴脯胰島素標準品(2-8℃) Insulin Lispro 5.97mg 133107-64-9
44691 *標準品 Iodipamide 200mg 606-17-7
44692 *標準品 Iodixanol 200mg 92339-11-2
44693 *相關(guān)物質(zhì)C標準品 25mg
44694 *相關(guān)物質(zhì)D標準品 50mg 89797-00-2
44695 *相關(guān)物質(zhì)E標準品 25mg 255376-57-9
44696 鄰碘代馬尿酸標準品 o-Iodohippuric Acid 100mg 147-58-0
44697 碘代對苯二酚標準品 Iodoquinol 100mg 83-73-8
44698 *標準品 Iohexol 200mg 66108-95-0
44699 *相關(guān)化合物A標準品 100mg 31127-80-7
44700 *相關(guān)化合物B標準品 50mg 76801-93-9
44701 *相關(guān)物質(zhì)C標準品 100mg 76820-34-3
44702 *標準品人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 Iopamidol 200mg 60166-93-0
44703 *相關(guān)物質(zhì)A標準品 50mg 60166-98-5
44704 *相關(guān)物質(zhì)B標準品 100mg
44705 *相關(guān)物質(zhì)C標準品 40mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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