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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-25 22:32:16瀏覽次數(shù):258次
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人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
44506 富馬酸*系統(tǒng)適用性用混合物標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
44507 富馬酸*分離度用混合物標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
44508 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Mafenide Related Compound A 50mg
44509 10-甲酰*標(biāo)準(zhǔn)品 10-Formylfolic Acid 25mg 134-05-4
44510 磷*標(biāo)準(zhǔn)品 Fosphenytoin Sodium 250mg 92134-98-0
44511 D-(-)-果糖標(biāo)準(zhǔn)品 Fructose 125mg 57-48-7
44512 L-巖藻糖標(biāo)準(zhǔn)品 L-Fucose (AS) 200mg 2438-80-4
44513 氟維司群標(biāo)準(zhǔn)品 Fulvestrant 150mg 129453-61-8
44514 氟維司群系統(tǒng)適用性用混合物標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
44515 富馬酸標(biāo)準(zhǔn)品 Fumaric Acid 200mg 110-17-8
44516 *標(biāo)準(zhǔn)品 Furazolidone 200mg 67-45-8
44517 *標(biāo)準(zhǔn)品 Furosemide 200mg 54-31-9
44518 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 4818-59-1
44519 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 3086-91-7
44520 *標(biāo)準(zhǔn)品 Gabapentin 250mg 60142-96-3
44521 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 64744-50-9
44522 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 133481-09-1
44523 *相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 1076198-17-8
44524 *相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 667465-00-1
44525 釓雙胺標(biāo)準(zhǔn)品 Gadodiamide 500mg 131410-48-5
44526 釓雙胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
44527 釓雙胺相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
44528 釓噴酸單*標(biāo)準(zhǔn)品 Gadopentetate Monomeglumine 500mg 92923-57-4
44529 釓特醇標(biāo)準(zhǔn)品 Gadoteridol 500mg 120066-54-8
44530 釓特醇相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 120041-08-9
44531 釓特醇相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 112188-16-6
44532 釓特醇相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 220182-19-4
44533 釓弗塞胺標(biāo)準(zhǔn)品 Gadoversetamide 200mg 131069-91-5
44534 釓弗塞胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
44535 吡喃葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 Galactose 200mg 3646-73-9
44536 半乳糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 Galactitol 500mg 608-66-2
44537 D-氨基半乳糖鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Galactosamine Hydrochloride 300mg 1772-03-8
44538 *標(biāo)準(zhǔn)品 Galantamine Hydrobromide 200mg 1953/4/4
44539 *外消旋體標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 193146-85-9
44540 *相關(guān)物質(zhì)混合物標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
44541 加拉碘銨標(biāo)準(zhǔn)品 Gallamine Triethiodide 200mg 65-29-2
44542 *標(biāo)準(zhǔn)品 Ganciclovir 200mg 82410-32-0
44543 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 86357-09-7
44544 *1-N-甲基*標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
44545 *標(biāo)準(zhǔn)品 Gatifloxacin 300mg
44546 *標(biāo)準(zhǔn)品 Gemcitabine Hydrochloride 200mg 122111-03-9
44547 *標(biāo)準(zhǔn)品 Gemfibrozil 200mg 25812-30-0
44548 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 500904-61-0
44549 染料木苷標(biāo)準(zhǔn)品 Genistin 30mg 529-59-9
44550 金雀異黃素標(biāo)準(zhǔn)品 Genistein 15mg 446-72-0
44551 龍膽紫標(biāo)準(zhǔn)品 Gentian Violet 650mg 548-62-9
44552 赤霉酸標(biāo)準(zhǔn)品 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒Gibberellic Acid 200mg 1977/6/5
44553 姜素混合物標(biāo)準(zhǔn)品 Ginger Constituent Mixture 0.2mg
44554 生姜粉標(biāo)準(zhǔn)品 Powdered Ginger 500mg
44555 銀杏酸標(biāo)準(zhǔn)品 Ginkgolic Acids 10mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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