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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 13:15:00瀏覽次數(shù):112次
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人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
44405 苯硫咪唑相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 10605-21-7
44406 苯硫咪唑相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 30mg
44407 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fenofibrate 200mg
44408 甲磺酸非諾多泮標(biāo)準(zhǔn)品 Fenoldopam Mesylate 200mg 67227-57-0
44409 非諾多泮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
44410 非諾多泮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
44411 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fenoprofen Calcium 500mg 53746-45-5
44412 非諾洛芬鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Fenoprofen Sodium 500mg 66424-46-2
44413 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 42019-78-3
44414 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 42017-89-0
44415 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 217636-48-1
44416 阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 1135-24-6
44417 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fexofenadine Hydrochloride 200mg 138452-21-8
44418 非索非那定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 76811-98-8
44419 非索非那定相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
44420 *標(biāo)準(zhǔn)品 Finasteride 200mg 98319-26-7
44421 魚油標(biāo)準(zhǔn)品 Fish Oil 1g 8016-13-5
44422 非索非那定相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
44423 *標(biāo)準(zhǔn)品 Flavoxate Hydrochloride 200mg 3717-88-2
44424 黃酮哌酯相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Flavoxate Related Compound A 25mg 3468/1/7
44425 黃酮哌酯相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Flavoxate Related Compound B 20mg 90101-87-4
44426 黃酮哌酯相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Flavoxate Related Compound C 20mg 35888-94-9
44427 醋酸氟卡尼標(biāo)準(zhǔn)品 Flecainide Acetate 200mg 54143-56-5
44428 氟卡尼相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Flecainide Related Compound A 75mg
44429 5-氟-2’-脫氧脲核苷標(biāo)準(zhǔn)品 Floxuridine 250mg 50-91-9
44430 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fluconazole 200mg 86386-73-4
44431 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 871550-15-1
44432 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 81886-51-3
44433 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 514222-44-7
44434 5-*標(biāo)準(zhǔn)品 Flucytosine 200mg 2022-85-7
44435 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fludarabine Phosphate 300mg 75607-67-9
44436 2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 Fludeoxyglucose 100mg 29702-43-0
44437
2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
15mg 23978-09-8
44438 2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 14685-79-1
44439 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fludrocortisone Acetate 250mg 514-36-3
44440 *標(biāo)準(zhǔn)品 Flumazenil 200mg 78755-81-4
44441 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
44442 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Flumazenil Related Compound B 20mg
44443 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Flumazenil Related Compound C 500mg 1188-33-6
44444 雙*叔戊酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Flumethasone Pivalate 200mg 2002-29-1
44445 氟尼縮松標(biāo)準(zhǔn)品 Flunisolide 200mg 77326-96-6
44446 氟尼辛*標(biāo)準(zhǔn)品 Flunixin Meglumine 300mg 42461-84-7
44447 醋酸膚輕松標(biāo)準(zhǔn)品 Fluocinolone Acetonide 100mg 67-73-2
44448 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fluocinonide 100mg 356-12-7
44449 熒光素標(biāo)準(zhǔn)品 Fluorescein 200mg 2321/7/5
44450 氟化牙粉:人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒氟化鈉/二氧化硅標(biāo)準(zhǔn)品 4.5oz
44451 氟化牙粉:氟化鈉/*粉標(biāo)準(zhǔn)品 4oz
44452 氟化牙粉:單氟磷酸鈉-碳酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品 4.6oz
44453 氟化牙粉:單氟磷酸鈉/*標(biāo)準(zhǔn)品 4.6oz
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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