人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

Docusate Potassium 100mg 7491-09-0
44249 多非利特標(biāo)準(zhǔn)品 Dofetilide 200mg 115256-11-6
44250 多非利特相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Dofetilide Related Compound A 20mg 176447-94-2
44251 甲磺酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Dolasetron Mesylate 200mg 115956-13-3
44252 甲磺酸*相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
44253 *標(biāo)準(zhǔn)品 Donepezil Hydrochloride 200mg 120011-70-3
44254 多奈哌齊A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 145546-80-1
44255 *標(biāo)準(zhǔn)品 Doxapram Hydrochloride 200mg 7081-53-0
44256 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dopamine Hydrochloride 200mg 62-31-7
44257 鹽酸多佐胺標(biāo)準(zhǔn)品 Dorzolamide Hydrochloride 200mg 130693-82-2
44258 鹽酸多佐胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 122028-36-8
44259 *標(biāo)準(zhǔn)品 Doxazosin Mesylate 200mg 77883-43-3
44260 多沙唑嗪相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 70918-74-0
44261 多沙唑嗪相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Doxazosin Related Compound B 20mg 28888-44-0
44262 多沙唑嗪相關(guān)雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Doxazosin Related Compound C 20mg 23680-84-4
44263 多沙唑嗪相關(guān)雜質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 3663-80-7
44264 多沙唑嗪相關(guān)雜質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 27631-29-4
44265 多沙唑嗪相關(guān)雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 617677-53-9
44266 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Doxepin Hydrochloride 500mg 1229-29-4
44267 *相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Doxepin Related Compound A 50mg 4504-87-4
44268 *相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Doxepin Related Compound B 50mg 4504-88-5
44269 *相關(guān)雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Doxepin Related Compound C 25mg 4504-96-5
44270 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Doxorubicin Hydrochloride 50mg 25316-40-9
44271 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Doxycycline Hyclate 200mg 24390-14-5
44272 *相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 3219-99-6
44273 琥珀酸多西拉敏標(biāo)準(zhǔn)品 Doxylamine Succinate 300mg 562-10-7
44274 甲酚曲唑標(biāo)準(zhǔn)品 Drometrizole 25mg 2440-22-4
44275 甲酚曲唑三硅氧烷標(biāo)準(zhǔn)品 Drometrizole Trisiloxane 200mg 155633-54-8
44276 甲酚曲唑三硅氧烷相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 2170-37-8
44277 甲酚曲唑三硅氧烷相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 98809-58-6
44278 甲酚曲唑三硅氧烷相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 150mg
44279 甲酚曲唑三硅氧烷相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
44280 甲酚曲唑三硅氧烷相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 150mg
44281 七甲基三硅氧烷標(biāo)準(zhǔn)品 Heptamethyl Trisiloxane 150mg 1873-88-7
44282 氟派利多標(biāo)準(zhǔn)品 Droperidol 250mg 548-73-2
44283 屈螺酮屈螺酮標(biāo)準(zhǔn)品 Drospirenone 200mg 67392-87-4
44284 屈螺酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 90457-65-1
44285 度洛西汀標(biāo)準(zhǔn)品 Duloxetine Hydrochloride 100mg 136434-34-9
44286 度洛西汀雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 910138-96-4
44287 度洛西汀相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 1104890-90-5
44288 度洛西汀相關(guān)物質(zhì)H標(biāo)準(zhǔn)品 ea 199191-66-7
44289 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dyclonine Hydrochloride 200mg 536-43-6
44290 去氫孕酮標(biāo)準(zhǔn)品 Dydrogesterone 200mg 152-62-5
44291 二羥丙*標(biāo)準(zhǔn)品 Dyphylline 200mg 479-18-5
44292 依莰舒溶液標(biāo)準(zhǔn)品 Ecamsule Solution 0．5ml 92761-26-7
44293 依莰舒三乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品 Ecamsule Triethanolamine 200mg 92841-53-7
44294 依莰舒相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Ecamsule Related Compound A 50mg 589-29-7
44295 依莰舒相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Ecamsule Related Compound B 50mg 3006-96-0
44296 依莰舒相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Ecamsule Related Compound C 50mg 100-21-0
44297 依莰舒相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 Ecamsule Related Compound D 50mg 5872/8/2
44298 依莰舒相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 Ecamsule Related Compound E 25mg
44299 依莰舒相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 Ecamsule Related Compound F 25mg
44300 依莰舒相關(guān)物質(zhì)G標(biāo)準(zhǔn)品 Ecamsule Related Compound G 25mg
44301 紫錐菊粉末提取物標(biāo)準(zhǔn)品人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒 1g 84696-11-7
44302 蒼白松果菊標(biāo)準(zhǔn)品 1g 97281-15-7
44303 狹葉紫錐菊提取物標(biāo)準(zhǔn)品 1g 90028-20-9

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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