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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
44198 二乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品 Diethanolamine 3ml 111-42-2
44199 枸櫞酸乙胺嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Diethylcarbamazine Citrate 200mg 1642-54-2
44200 二乙二醇標(biāo)準(zhǔn)品 Diethylene Glycol 0.5ml 111-46-6
44201 酞酸二乙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Diethyl Phthalate 200mg 84-66-2
44202 *鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 134-80-5
44203 癸二酸二乙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Diethyl Sebacate 1ml 110-40-7
44204 *標(biāo)準(zhǔn)品 Diethylstilbestrol 200mg 56-53-1
44205 避蚊胺標(biāo)準(zhǔn)品 Diethyltoluamide 3g 134-62-3
44206 醋酸雙氟拉松標(biāo)準(zhǔn)品 Diflorasone Diacetate 200mg 33564-31-7
44207 *標(biāo)準(zhǔn)品 Diflunisal 200mg 22494-42-4
44208 洋地黃標(biāo)準(zhǔn)品 Digitalis 3g 8031-42-3
44209 洋地黃毒甙標(biāo)準(zhǔn)品 Digitoxin 200mg 71-63-6
44210 二氫*標(biāo)準(zhǔn)品 Dihydrocapsaicin 25mg 19408-84-5
44211 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dihydrocodeine Bitartrate CII 200mg 5965-13-9
44212 17- 雌二醇標(biāo)準(zhǔn)品 17alpha-Dihydroequilin 50mg 651-55-8
44213 甲磺酸二氫麥角胺標(biāo)準(zhǔn)品 Dihydroergotamine Mesylate 500mg 6190-39-2
44214 雙氫*標(biāo)準(zhǔn)品 Dihydrostreptomycin Sulfate 200mg 5490-27-7
44215 雙氫速甾醇標(biāo)準(zhǔn)品 Dihydrotachysterol 30mg×4amplues 67-96-9
44216 二羥基丙酮標(biāo)準(zhǔn)品 Dihydroxyacetone 250mg 96-26-4
44217 糠酸二氯尼特標(biāo)準(zhǔn)品 Diloxanide Furoate 200mg 3736-81-0
44218 *卓標(biāo)準(zhǔn)品 Diltiazem Hydrochloride 200mg 1205003
44219 地爾硫卓相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
44220 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dimenhydrinate 200mg 523-87-5
44221 鹽酸奎尼卡因標(biāo)準(zhǔn)品 Dimethisoquin Hydrochloride 2g 2773-92-4
44222 二甲基亞砜標(biāo)準(zhǔn)品 Dimethyl Sulfoxide 3g 67-68-5
44223 地諾前列素*標(biāo)準(zhǔn)品 Dinoprost Tromethamine 50mg 38562-01-5
44224 地諾前列酮標(biāo)準(zhǔn)品 Dinoprostone 50mg 363-24-6
44225 二羥苯宗標(biāo)準(zhǔn)品 Dioxybenzone 150mg 131-53-3
44226 苯海拉明檸檬酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Diphenhydramine Citrate 125mg 88637-37-0
44227 *標(biāo)準(zhǔn)品 Diphenhydramine Hydrochloride 200mg 147-24-0
44228 *鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 3810-80-8
44229 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dipivefrin Hydrochloride 200mg 64019-93-8
44230 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dipyridamole 200mg 58-32-2
44231 地*標(biāo)準(zhǔn)品 Dirithromycin 200mg 62013-04-1
44232 5'-鳥苷酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Disodium Guanylate 350mg 5550/12/9
44233 *酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Disodium Inosinate 500mg 4691-65-0
44234 尿苷酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Disodium 5-Uridylate 500mg 3387-36-8
44235 磷酸丙吡胺標(biāo)準(zhǔn)品 Disopyramide Phosphate 200mg 22059-60-5
44236
4-氨基-6-(三氟甲基)苯-1,3-二磺酰胺標(biāo)準(zhǔn)品
30mg 654-62-6
44237 二硫化四乙基秋蘭姆標(biāo)準(zhǔn)品 Disulfiram 200mg 97-77-8
44238 雙*標(biāo)準(zhǔn)品 Divalproex Sodium 200mg 76584-70-8
44239 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dobutamine Hydrochloride 600mg 49745-95-1
44240 三水多烯*標(biāo)準(zhǔn)品 Docetaxel 200mg 148408-66-6
44241 *鑒別對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)品 Docetaxel Identification 50mg
44242 *系統(tǒng)適用性鑒別溶液 15mg標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
44243 順—二十二碳六烯酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)品 500mg 84494-72-4
44244 阿魏酸二十二酯標(biāo)準(zhǔn)品人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒 Docosyl Ferulate 50mg 101927-24-6
44245
磺基丁二酸-1,4-二(2-乙基己基)酯鈣鹽標(biāo)準(zhǔn)品
Docusate Calcium 500mg 128-49-4
44246 多庫(kù)脂鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Docusate Sodium 500mg 577-11-7
44247 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 40mg
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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