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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-22 04:56:17瀏覽次數(shù):237次
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人紅細(xì)胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人紅細(xì)胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人紅細(xì)胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
43596 *標(biāo)準(zhǔn)品 Aminosalicylic Acid 125mg 65-49-6
43597 3-氨基-2,4,6-三碘苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 3119-15-1
43598
5-氨基-3-羧基-2,4,6-三碘-N-甲基苯甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)品
50mg 2280-89-9
43599 *標(biāo)準(zhǔn)品 Amiodarone Hydrochloride 200mg 19774-82-4
43600 胺碘酮相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 Amiodarone Related Compound D 20mg 51-26-4
43601 胺碘酮相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 Amiodarone Related Compound E 25mg Amiodarone R...
43602 胺碘酮相關(guān)物質(zhì)H標(biāo)準(zhǔn)品 Amiodarone Related Compound H 20mg 869-24-9
43603 雙甲瞇標(biāo)準(zhǔn)品 Amitraz 200mg 33089-61-1
43604 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Amitriptyline Hydrochloride 200mg 549-18-8
43605 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 1210-35-1
43606 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 1159-03-1
43607 苯磺酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Amlodipine Besylate 350mg 111470-99-6
43608 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 113994-41-5
43609 季胺基甲基丙烯酸酯共聚物A型標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 33434-24-1
43610 季胺基甲基丙烯酸酯共聚物B型標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 33434-24-1
43611 碳酸銨標(biāo)準(zhǔn)品 Ammonium Carbonate (AS) 2g 8000-73-5
43612 氯化銨標(biāo)準(zhǔn)品 Ammonium Chloride 200mg 12125-02-9
43613 磷酸氫二銨標(biāo)準(zhǔn)品 1g 7783-28-0
43614 異戊*CII標(biāo)準(zhǔn)品 Amobarbital CII 200mg 57-43-2
43615 阿莫地喹鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Amodiaquine Hydrochloride 500mg 6398-98-7
43616 阿莫沙平標(biāo)準(zhǔn)品 Amoxapine 200mg 14028-44-5
43617 *標(biāo)準(zhǔn)品 Amoxicillin 200mg 61336-70-7
43618 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
43619 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
43620 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
43621 *相關(guān)物質(zhì)G標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
43622 *相關(guān)物質(zhì)I標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
43623 *標(biāo)準(zhǔn)品 125mg 1397-89-3
43624 氨芐*標(biāo)準(zhǔn)品 Ampicillin 200mg 69-53-4
43625 氨芐*鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Ampicillin Sodium 125mg 69-52-3
43626 氨芐*三水酸標(biāo)準(zhǔn)品 Ampicillin Trihydrate 200mg 7177-48-2
43627 安普羅銨標(biāo)準(zhǔn)品 Amprolium 200mg 121-25-5
43628 *標(biāo)準(zhǔn)品 Amrinone 500mg 60719-84-8
43629 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Amrinone Related Compound A 100mg 62749-46-6
43630 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
43631 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Amrinone Related Compound C 50mg
43632 *標(biāo)準(zhǔn)品 Anastrozole 200mg 120511-73-1
43633 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 120511-72-0
43634 *內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品 Andrographolide 500mg 5508-58-7
43635 *提取物標(biāo)準(zhǔn)品 Powdered Andrographis Extract 500mg 90244-84-1
43636 醋酸阿奈可他標(biāo)準(zhǔn)品 Anecortave Acetate 200mg
43637 醋酸阿奈可他相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
43638 茴香腦標(biāo)準(zhǔn)品 Anethole (AS) 2ml 4180-23-8
43639 1,6-脫水吡喃葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 1,6-anhydro-D-glucose 50mg 498-07-7
43640 *標(biāo)準(zhǔn)品 Anileridine Hydrochloride CII 250mg 126-12-5
43641 茴香醚標(biāo)準(zhǔn)品人紅細(xì)胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒 Anisole 1.2ml×3ampules 100-66-3
43642 磷酸安他唑啉標(biāo)準(zhǔn)品 Antazoline Phosphate 200mg 154-68-7
43643 *標(biāo)準(zhǔn)品 Anthralin 200mg 1143-38-0
43644 *標(biāo)準(zhǔn)品 Antipyrine 200mg 60-80-0
43645 芹菜素標(biāo)準(zhǔn)品 Apigenin 30mg 520-36-5
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人紅細(xì)胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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