人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

43269 氟氯西林 含量測(cè)定 2-8℃，避光 100mg 130529-200301
43270 *·3/2H2O 紅外鑒別 2-8℃，避光 50mg 130531-200201
43271 侖氨西林 含量測(cè)定 2-8℃，避光 100mg 130534-200301
43272 * 紅外鑒別 2-8℃，避光 50mg 130535-200301
43273 甲磺酸* 紅外鑒別 2-8℃，避光 100mg 130536-200301
43274 鹽酸左* 紅外鑒別 2-8℃，避光 100mg 130537-200301
43275 7-氨基頭孢烷酸（7-ACA) 檢查 2-8℃，避光 50mg 130538-200301
43276 *S HPLC系統(tǒng)適應(yīng)性 2-8℃，避光 100mg 130539-200402
43277 *B HPLC系統(tǒng)適應(yīng)性 2-8℃，避光 100mg 130540-200402
43278 * 含量測(cè)定 2-8℃，避光 100mg 130541-200401
43279 * 含量測(cè)定 2-8℃，避光 100mg 130542-200601
43280 鹽酸* 紅外鑒別 2-8℃，避光 100mg 130546-200401
43281 *B 系統(tǒng)適應(yīng)性 2-8℃，避光 50mg 130548-200501
43282 *鈉 鑒別 2-8℃，避光 50mg 130549-200501
43283 ** 鑒別 2-8℃，避光 100mg 130552-200501
43284 *雜質(zhì)A 檢查 2-8℃，避光 50mg 130553-200501
43285 *K29 檢查 2-8℃，避光 50mg 130553-200501
43286 *雜質(zhì)A 系統(tǒng)適應(yīng)性 2-8℃，避光 50mg 130554-201002
43287 氟喹啉酸 系統(tǒng)適應(yīng)性 2-8℃，避光 50mg 130554-201002
43288 柔* 含量測(cè)定 2-8℃，避光 50mg 130559-200501
43289 * 2-8℃，避光 50mg 130560-
43290 2-乙基己酸 GC檢查 2-8℃，避光 0.5ml 130561-200702
43291 頭孢替安 含量測(cè)定 2-8℃，避光 100mg 130565-200902
43292 阿洛西林 含量測(cè)定 2-8℃，避光 100mg 130566-200601
43293 * 含量測(cè)定 2-8℃，避光 100mg 130567-200902
43294 * 含量測(cè)定 2-8℃，避光 100mg 130568-200501
43295 * 含量測(cè)定 2-8℃，避光 100mg 130569-200601
43296 *鈉 紅外鑒別 2-8℃，避光 100mg 130570-200501
43297 * 含量測(cè)定 2-8℃，避光 200mg 130572-200701
43298 1,3－萘二酚 鑒別 2-8℃，避光 50mg 130573-200701
43299 *B 有關(guān)物質(zhì) 2-8℃，避光 50mg 130576-200901
43300 反式頭孢吡肟 有關(guān)物質(zhì) 2-8℃，避光 100mg 130579-200901
43301 * HPLC含量 2-8℃，避光 100mg 130585-201001
43302 *雜質(zhì)B 有關(guān)物質(zhì) 2-8℃，避光 50mg 130601-201001
43303 *雜質(zhì)Ⅰ 有關(guān)物質(zhì) 2-8℃，避光 50mg 130605-201001
43304 *雜質(zhì)J 有關(guān)物質(zhì) 2-8℃，避光 50mg 130650-200901
43305 改良馬丁對(duì)照培養(yǎng)基 培養(yǎng)基適應(yīng)性 常溫，避光 11.4g/400ml 135002-201002
43306 營(yíng)養(yǎng)瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基 培養(yǎng)基適應(yīng)性 常溫，避光 9.0g/400ml 135003-201002
43307 營(yíng)養(yǎng)肉湯zui找培養(yǎng)基 培養(yǎng)基適應(yīng)性 常溫，避光 1.8g/400ml 135004-201002
43308 玫瑰紅鈉對(duì)照培養(yǎng)基 培養(yǎng)基適應(yīng)性 常溫，避光 9.0g/400ml 135005-201002
43309 膽鹽乳糖對(duì)照培養(yǎng)基 培養(yǎng)基適應(yīng)性 常溫，避光 3.6g/400ml 135006-201002
43310 *氯化鈉瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基 培養(yǎng)基適應(yīng)性 常溫，避光 33.3g/400ml 135007-201002
43311 沙氏葡萄糖肉湯對(duì)照培養(yǎng)基 培養(yǎng)基適應(yīng)性 常溫，避光 3.0g/400ml 135008-201002
43312 麥康凱瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基 培養(yǎng)基適應(yīng)性 常溫，避光 15.6g/400ml 135009-201002
43313 沙門、志賀菌屬瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基 培養(yǎng)基適應(yīng)性 常溫，避光 18.0g/400ml 135010-201002
43314 可溶性淀粉 效價(jià)測(cè)定 常溫，避光 10g 140602-200313
43315 *（UK） 供*效價(jià)測(cè)定用試劑 -20℃，避光 1280IU/支 140604-200623
43316 *（牛血） 供*效價(jià)測(cè)定用 -20℃，避光 190BP/支 140605-200424
43317 纖維蛋白溶酶原（牛血） 供*效價(jià)測(cè)定用試劑 -20℃，避光 10U/支 140606-201024
43318 纖維蛋白原（牛血） 供*效價(jià)測(cè)定用 -20℃，避光 98.9mg/支 140607-200736
43319 牛血紅蛋白 供*效價(jià)測(cè)定用試劑 常溫，避光 5g 140608-201014
43320 L-* 效價(jià)測(cè)定 常溫，避光 100mg 140609-200711
43321 溶酶小球菌底物 效價(jià)測(cè)定 常溫，避光 15mg 140610-200612
43322 磷酸轉(zhuǎn)乙?；?供*效價(jià)測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)試劑 -20℃，避光 41U/支 140613-200644
43323 乙酰磷酸二鋰鹽 效價(jià)測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)底物 -20℃，避光 300mg 140614-200613
43324 * 效價(jià)測(cè)定 -20℃，人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒避光 0.1g 140615-200206
43325 蛋白低分子量標(biāo)準(zhǔn)（SDS法） 分子量測(cè)定 2-8℃，避光 約3mg 140618-200302
43326 血清白蛋白（牛） 蛋白含量測(cè)定 -20℃，避光 13.7mg/200919 140619-200919
43327 豬胰* 效價(jià)測(cè)定 -20℃，避光 46Iu/支 140621-200906
43328 腸膜狀明串珠菌 供右旋糖酐用生產(chǎn) 2-8℃，避光 0.2ml凍干粉 140622-200610
43329 糞腸球菌 供*生產(chǎn)用 2-8℃，避光 / 140623-200708

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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