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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
43025 *雜質(zhì)A 檢查用 常溫,避光 30mg 100998-200701
43026 *雜質(zhì)B 檢查用 常溫,避光 30mg 100999-200701
43027 *雜質(zhì)C 檢查用 常溫,避光 30mg 101000-200701
43028 *雜質(zhì)D 檢查用 常溫,避光 30mg 101001-200701
43029 * HPLC法含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101003-200801
43030 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101004-200801
43031 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101006-200701
43032 R-甲磺酸* 檢查用 2-8℃,避光 50mg 101008-200701
43033 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101009-200701
43034 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101010-200701
43035 N-乙酰氨基葡萄糖 HPLC法含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101011-200801
43036 去甲* IR鑒別用 常溫,避光 100mg 101013-200701
43037 佐尼沙胺 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101014-200801
43038 *鎂 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101015-200801
43039 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101016-200801
43040 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101019-200801
43041 *雜質(zhì)A 檢查用 常溫,避光 50mg 101020-200801
43042 *鈣 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101028-201001
43043 * 供檢查用 常溫,避光 100mg 101032-200901
43044 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101033-200901
43045 鹽酸* 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101034-200801
43046 * 含量測(cè)定 常溫,避光 500mg 101035-200901
43047 2-氨基-4-氯* 供TLC檢查用 常溫,避光 50mg 101038-200901
43048 *雜質(zhì)I 供UV檢查用 常溫,避光 50mg 101039-201001
43049 *雜質(zhì)Ⅲ HPLC系統(tǒng) 常溫,避光 50mg 101040-201001
43050 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101041-200901
43051 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101044-201001
43052 * UV法含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101055-201001
43053 * HPLC法含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101056-201001
43054 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101058-200901
43055 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101060-201001
43056 * HPLC含量 常溫,避光 100mg 101061-201001
43057 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101063-201001
43058 * 供HPLC法 常溫,避光 100mg 101065-201001
43059 1,6-二氫-2-甲基-6-氧代 供檢查用 常溫,避光 30mg 101066-201001
43060 * 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101076-200901
43061 * HPLC含量 常溫,避光 100mg 101079-201001
43062 磷酸* 含量測(cè)定 常溫,避光 100mg 101096-200901
43063 * 供HPLC法 常溫,避光 100mg 101106-201001
43064 * 供檢查用 常溫,避光 50mg 101109-201001
43065 *磷酸酯 供HPLC法 常溫,避光 200mg 101116-201001
43066 *雜質(zhì)Ⅰ 供檢查用 常溫,避光 50mg 101121-201001
43067 *雜質(zhì)Ⅱ 供檢查用 常溫,避光 50mg 101122-201001
43068 2-巰基* 供檢查用 常溫,避光 30mg 101124-201001
43069 1,3-丙二醇 供檢查用 常溫,避光 100mg 101126-201001
43070 可的松 供HPLC法 常溫,避光 50mg 101128-201001
43071 * 供檢查用 常溫,避光 50mg 101132-201001
43072 *雜質(zhì)I 供HPLC含量 常溫,避光 20mg 101135-201001
43073 阿托酸6β-羥基-3α-托品酯 供HPLC含量 常溫,避光 20mg 101135-201001
43074 *雜質(zhì) 供檢查用 常溫,避光 50mg 101138-201001
43075 10-甲氧基-4-(1-甲基-4-哌啶基)-4H-苯并[4.5]環(huán)庚[1.2-b]噻吩-4-醇 供HPLC法系統(tǒng)適用性 常溫,避光 50mg 101141-201001
43076 *雜質(zhì)Ⅰ 供HPLC法系統(tǒng)適用性 常溫,避光 50mg 101141-201001
43077 * 供鑒別用 常溫,避光 100mg 101143-201001
43078 反式* 供檢查用 常溫,避光 50mg 101144-201001
43079 去氟* 供檢查用 常溫,避光 50mg 101145-201001
43080 N-甲基* 供檢查用 常溫,避光 50mg 101146-201001
43081 4-羥基間苯二甲酸 供檢查用 常溫,避光 50mg 101150-201001
43082 * 供GC法含量 常溫,人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒避光 50mg 101151-201001
43083 二* 供檢查用 常溫,避光 50mg 101152-201001
43084 間甲酚 供GC法含量 常溫,避光 100mg 101153-201001
43085 對(duì)甲酚 供GC法含量 2-8℃,密封 100mg 101154-201001
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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