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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-01 02:03:24瀏覽次數(shù):252次
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人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
42102 D-果糖 含量測定 常溫,避光 30mg 111504-200001
42103 L(+)阿拉伯糖 鑒別 常溫,避光 30mg 111506-200001
42104 蔗糖 含量測定 常溫,避光 50mg 111507-200001
42105 D-木糖 含量測定 常溫,避光 50mg 111508-200404
42106 三十烷醇 含量測定 常溫,避光 20mg 111509-200302
42107 異龍腦 含量測定 常溫,避光 20mg 111512-200201
42108 7-甲氧基香豆素 薄層鑒別 常溫,避光 20mg 111513-200001
42109 棉酚 鑒別 常溫,避光 20mg 111517-200001
42110 升麻苷 含量測定 常溫,避光 20mg 111522-201008
42111 毛兩面針素 鑒別 常溫,避光 20mg 111531-200902
42112 富馬酸 含量測定 常溫,避光 20mg 111541-200001
42113 荊芥油 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111542-200001
42114 生姜油 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111543-200502
42115 * 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111544-200703
42116 * 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111545-200001
42117 魚腥草油 鑒別 2-8℃,避光 0.2ml 111546-
42118 牡荊油 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111547-200602
42119 小茴香油 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111548-200001
42120 紫蘇油 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111549-200101
42121 * 鑒別 2-8℃,避光 0.2ml 111550-200001
42122 * 鑒別 常溫,避光 0.5ml 111551-200702
42123 九里香酮 鑒別 常溫,避光 20mg 111552-200602
42124 * 鑒別 常溫,避光 50mg 111553-200201
42125 * 鑒別 常溫,避光 20mg 111555-200602
42126 茴香醚 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111556-200101
42127 劍葉龍血素C 鑒別 常溫,避光 20mg 111559-200302
42128 金利油 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111560-200101
42129 *內(nèi)酯醇 TLC掃描法 含量測定 常溫,避光 20mg 111567-200502
42130 紫丁香苷 含量測定 常溫,避光 20mg 111574-200502
42131 白黎醇苷 含量測定 常溫,避光 20mg 111575-200502
42132 L-* 鑒別 常溫,避光 100mg 111576-200201
42133 * 鑒別 常溫,避光 100mg 111577-
42134 降香揮發(fā)油 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111579-200201
42135 青陽參苷元 含量測定 常溫,避光 20mg 111582-200201
42136 西紅花苷-Ⅱ 常溫,避光 20mg 111589-
42137 重樓皂苷Ⅱ 含量測定 常溫,避光 20nm 111591-200402
42138 重樓皂苷Ⅵ 含量測定 常溫,避光 10mg 111592-200402
42139 重樓皂苷Ⅶ 含量測定 常溫,避光 10mg 111593-200402
42140 總銀杏酸(套) 鑒別 常溫,避光 30mg 111594-200603
42141 胡黃連苷-Ⅱ 含量測定 常溫,避光 20mg 111596-200402
42142 *酯甲 TLV掃描法 含量測定 常溫,避光 20mg 111597-200503
42143 脫水*內(nèi)酯琥珀酸半酯 含量測定 -20℃,避光 20mg 111598-200807
42144 丹參酮ⅡA磺酸鈉 鑒別 常溫,避光 20mg 111605-200301
42145 金龍膽草提取物 鑒別 常溫,避光 500mg 111608-200301
42146 苯* 鑒別 常溫,避光 20mg 111615-200301
42147 ?;撬?含量測定 常溫,避光 20mg 111616-200301
42148 二甲基甲酰胺 內(nèi)標物 常溫,避光 0.5ml 111617-200602
42149 * 鑒別 常溫,避光 50mg 111618-200301
42150 氧化鋅 UV法含量測定 常溫,避光 100mg 111619-200301
42151 硒 含量測定 常溫,避光 100mg 111620-200301
42152 油酸 含量測定 -20℃,避光 0.2ml 111621-201004
42153 * 含量測定 -20℃,避光 0.2ml 111622-200602
42154 柯里拉京 含量測定 常溫,避光 20mg 111623-200301
42155 α-亞麻酸甲酯 含量測定 -20℃,避光 0.2ml 111624-200602
42156 *甲酯 含量測定 -20℃,避光 0.2ml 111625-200502
42157 沙棘油 鑒別 常溫,避光 0.2ml 111627-200301
42158 糠酸 鑒別 常溫,避光人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒 20mg 111630-200301
42159 α-亞麻酸 含量測定 -20℃,避光 0.2ml 111631-200502
42160 射干苷 含量測定 常溫,避光 20mg 111632-200501
42161 正十八烷 含量測定 常溫,避光 0.2ml 111636-200402
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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