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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 13:13:55瀏覽次數(shù):126次
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人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
42041 紫草素 鑒別 常溫,避光 20mg 110769-200405
42042 香草酸 含量測定 常溫,避光 50mg 110776-200402
42043 斑蟊素 含量測定 常溫,避光 20mg 110783-200604
42044 * 鑒別 常溫,避光 20mg 110784-200303
42045 *精 含量測定 常溫,避光 0.1ml 110788-201004
42046 檀香油 鑒別 常溫,避光 0.1ml 110789-200005
42047 4-甲氧基水楊醛 含量測定 常溫,避光 20mg 110790-200202
42048 對二甲氨基苯甲醛 內(nèi)標(biāo)無含測 常溫,避光 100mg 110791-9102
42049 土大黃苷 鑒別 常溫,避光 20mg 110794-200504
42050 吳茱萸內(nèi)酯 含量測定 常溫,避光 20mg 110800-200404
42051 華蟾酥毒基 含量測定 常溫,避光 20mg 110803-200605
42052 * 含量測定 常溫,避光 30mg 110806-200704
42053 血竭素高氯酸鹽 含量測定 常溫,避光 20mg 110811-200704
42054 10-羥基-2-癸烯酸 含量測定 常溫,避光 50mg 110812-200506
42055 ?;悄懰徕c 鑒別 常溫,避光 20mg 110815-200707
42056 ?;?鈉 含量測定 常溫,避光 20mg 110816-200507
42057 1,8—二羥基葸醌 含量測定 常溫,避光 40mg 110829-199702
42058 *對照品 鑒別 常溫,避光 20mg 110830-200202
42059 廣藿香油 鑒別 常溫,避光 1ml 110832-200604
42060 D-* 含量測定 常溫,避光 100mg 110833-200904
42061 甲基正壬酮 含量測定 常溫,避光 0.1ml 110834-200502
42062 對甲氧基桂皮酸乙酯 鑒別 常溫,避光 50mg 110835-199601
42063 異嗪皮啶 含量測定 常溫,避光 20mg 110837-200304
42064 茴香醛 鑒別 常溫,避光 1ml 110838-200605
42065 辣椒素 含量測定 常溫,避光 20mg 110839-200403
42066 聯(lián)苯 含量測定 常溫,避光 100mg 110843-9501
42067 2,3,5,4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 含量測定 常溫,避光 20mg 110844-200908
42068 牛磺*鈉 鑒別 常溫,避光 20mg 110846-200506
42069 乙氧基白屈菜紅堿 鑒別 常溫,避光 20mg 110847-200601
42070 木香揮發(fā)油 鑒別 常溫,避光 0.1ml 110849-200004
42071 杜鵑素 含量測定 常溫,避光 20mg 110850-200604
42072 原阿片堿 含量測定 常溫,避光 20mg 110853-200402
42073 蟲草素 鑒別 常溫,避光 20mg 110858-200202
42074 湖貝甲素 TLC掃描法 含量測定 常溫,避光 20mg 110859-200301
42075 山柰酚 含量測定 常溫,避光 20mg 110861-200808
42076 山柰素 含量測定 常溫,避光 20mg 110861-200808
42077 銀杏內(nèi)酯C(暫行) 含量測定 常溫,避光 20mg 110864-200505
42078 銀杏葉對照提取物 鑒別 常溫,避光 700mg 110866-200803
42079 * 含量測定 常溫,避光 100mg 110870-200001
42080 三七莖葉皂苷 鑒別 常溫,避光 50mg 110871-200201
42081 * 鑒別 常溫,避光 100mg 110872-
42082 * 鑒別 常溫,避光 100mg 110873-9802
42083 * 鑒別 常溫,避光 100mg 110874-200203
42084 瓜氨酸 鑒別 常溫,避光 20mg 110875-200506
42085 * 鑒別 常溫,避光 100mg 110876-200204
42086 兒茶素 含量測定 常溫,避光 20mg 110877-200001
42087 表兒茶素 含量測定 常溫,避光 20mg 110878-200102
42088 腺苷 含量測定 常溫,避光 20mg 110879-200202
42089 木蘭脂素 含量測定 常溫,避光 20mg 110882-200605
42090 葫蘆巴堿 含量測定 常溫,避光 20mg 110883-200502
42091 腺嘌呤 含量測定 常溫,避光 20mg 110886-200001
42092 尿苷 薄層鑒別 常溫,避光 20mg 110887-200202
42093 環(huán)維黃楊星D 含量測定 常溫,避光 20mg 110888-200503
42094 * 鑒別 常溫,避光 100mg 110889-200102
42095 * 鑒別 常溫,避光 100mg 110890-200001
42096 黃山藥皂苷提取物 鑒別 常溫,避光 200mg 110891-200001
42097 雪上一枝蒿甲素 含量測定 常溫,人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒避光 20mg 110895-200303
42098 α-蒎烯 含量測定 常溫,避光 0.1ml 110897-200001
42099 二十八烷醇 含量測定 常溫,避光 10mg 110899-200302
42100 祖師麻甲素 含量測定 常溫,避光 20mg 110900-200405
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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