人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

41917 胡麻屬苷 Sesamoside 20mg/支 117479-87-5
41918 路路通酸 20mg/支
41919 表木栓醇 20mg/支
41920 鴨腳樹葉堿 20mg/支
41921 山柰酚-3-O-蕓香糖苷 20mg/支
41922 4'-去甲氧基表* 4'-Demethylepipodophyllotoxin 20mg/支 6559-91-7
41923 *B 20mg/支
41924 漢黃芩素 Wogonin 20mg/支 632-85-9
41925 松蘿酸 Usnic acid 松羅酸 20mg/支 125-46-2
41926 7-羥基香豆素 Umbelliferone 傘形花內(nèi)酯; 傘形酮 20mg/支 93-35-6
41927 8-姜酚 8-Gingerol 20mg/支 23513-08-8; 30462-35-2
41928 10-姜酚 10-Gingerol 20mg/支 23513-15-7
41929 石斛堿 Dendrobine 20mg/支 2115-91-5
41930 *內(nèi)酯酮 Triptonide 雷藤酮; *羰內(nèi)酯 20mg/支 38647-11-9
41931 異阿魏酸 3-Hydroxy-4-methoxycinnamic acid 20mg/支 537-73-5
41932 刺芒柄花苷 Ononin 芒柄花苷 20mg/支 486-62-4
41933 沒食子兒茶素 GC; (-)-gallocatechin 棓兒茶酸; 沒食子酰兒茶素 20mg/支 3371-27-5
41934 牡荊素葡萄糖苷 Glucosyl-vitexin 20mg/支 76135-82-5
41935 毛蕊異黃酮 Calycosin 20mg/支 20575-57-9
41936 毛蕊異黃酮苷 Calycosin-7-O-β-D-glucoside 毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷;毛蕊異黃酮葡萄糖苷 20mg/支 20633-67-4
41937 京尼平 Genipin 20mg/支 6902-77-8
41938 黃柏堿 Phellodendrine 10mg/支 6873-13-8
41939 朝藿定A1 Epimedin A1 20mg/支 分子式:C39H50O20 
分子量:838.80
41940 楊梅苷 Myricetrin 楊梅甙; 五羥基黃酮-3-鼠李糖苷 20mg/支 17912-87-7
41941 人參皂苷Ro Ginsenoside Ro 竹節(jié)參苷V 20mg/支 34367-04-9
41942 灰氈毛忍冬皂苷乙 Macranthoidin B 20mg/支 136849-88-2
41943 銀杏內(nèi)酯J Ginkgolide J 白果苦內(nèi)酯J 20mg/支 107438-79-9
41944 特女貞苷 Specnuezhenide 20mg/支 39011-92-2
41945 京尼平苷酸 Geniposidic acid 梔子酸 20mg/支 27741-01-1
41946 川續(xù)斷皂苷乙 Dipsacoside B 20mg/支 33289-85-9
41947 表告依春 Epigoitrin (R)-5-乙烯基-2-惡唑啉硫酮 20mg/支 1072-93-1
41948 大車前苷 Plantamajoside 20mg/支 104777-68-6
41949 8-O-乙酰山梔苷甲酯 8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester 20mg/支 57420-46-9
41950 水晶蘭苷 Monotropein 水晶蘭甙 10mg/支 5945-50-6
41951 黃杞苷 Engeletin 20mg/支 572-31-6
41952 巴豆苷 Crotonoside 異鳥苷 10mg/支 1818-71-9
41953 沙苑子苷A Complanatoside A 10mg/支 146501-37-3
41954 穗花杉雙黃酮 Amentoflavone 阿曼托黃酮 20mg/支 1617-53-4
41955 土荊皮乙酸 Pseudolaric Acid B 土荊乙酸; 土槿皮乙酸 20mg/支 82508-31-4
41956 去甲異波爾定 Norisoboldine 去甲基異波爾定 10mg/支 23599-69-1
41957 鹽酸益母草堿 Leonurine hydrochloride 20mg/支 24697-74-3
41958 魯斯考皂苷元 Ruscogenin 魯斯可皂苷元 20mg/支 472-11-7
41959 6-姜烯酚 6-Shogaol 姜烯酚 20mg/支 555-66-8
41960 白綿馬素AA Albaspidin AA 20mg/支 3570-40-9
41961 白綿馬素AP Albaspidin AP 20mg/支 59092-91-0
41962 知母皂苷B Anemarsaponin B 20mg/支 139051-27-7
41963 知母皂苷E Anemarsaponin E 知母皂苷BI 20mg/支 136565-73-6
41964 牛蒡苷元 Arctigenin 牛蒡子苷元 20mg/支 7770-78-7
41965 蒼術(shù)素 Atractylodin 20mg/支 55290-63-6
41966 苯甲酰芍藥苷 Benzoylpaeoniflorin 20mg/支 38642-49-8
41967 β-桉葉醇 β-Eudesmol 20mg/支 51317-08-9
41968 環(huán)黃芪醇 Cycloastragenol 20mg/支 84605-18-5
41969 丹參素 Danshensu 20mg/支 22681-72-7
41970 二氫姜黃素 Dihydrocurcumin 20mg/支
41971 綿馬貫眾素ABBA Dryocrassin ABBA 東北貫眾素 20mg/支 12777-70-7
41972 刺甘草查爾酮 Echinatin 20mg/支 34221-41-5
41973 大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷 Emodin-8-glucoside 20mg/支 23313-21-5
41974 綿馬酸ABA Filixic acid ABA 20mg/支 38226-84-5
41975 異蓮心堿 Isoliensinine 20mg/支 人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒6817-41-0
41976 甘草查爾酮A Licochalcone A 20mg/支 58749-22-7
41977 甘草查爾酮B Licochalcone B 20mg/支 58749-23-8
41978 甘草查爾酮C Licochalcone C 20mg/支 144506-14-9

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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