人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

42029 * 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110717-200204
42030 酯蟾毒配基 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110718-200507
42031 * 含量測(cè)定 常溫，避光 100mg 110728-200506
42032 * 鑒別 常溫，避光 100mg 110735-200102
42033 * 含量測(cè)定 常溫，避光 200mg 110743-200905
42034 菝契皂苷元 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110744-200509
42035 馬兜鈴酸A TLC檢查 常溫，避光 20mg 110746-200507
42036 樟腦 含量測(cè)定 常溫，避光 100mg 110747-200507
42037 * 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110755-9003
42038 乙酸龍腦酯 含量測(cè)定 常溫，避光 0.2ml 110759-200604
42039 山姜素 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110762-200303
42040 小豆蔻明 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110763-200302
42041紫草素 鑒別 常溫，避光 20mg 110769-200405
42042 香草酸 含量測(cè)定 常溫，避光 50mg 110776-200402
42043 斑蟊素 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110783-200604
42044 * 鑒別 常溫，避光 20mg 110784-200303
42045 *精 含量測(cè)定 常溫，避光 0.1ml 110788-201004
42046 檀香油 鑒別 常溫，避光 0.1ml 110789-200005
42047 4-甲氧基水楊醛 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110790-200202
42048 對(duì)二甲氨基苯甲醛 內(nèi)標(biāo)無(wú)含測(cè) 常溫，避光 100mg 110791-9102
42049 土大黃苷 鑒別 常溫，避光 20mg 110794-200504
42050 吳茱萸內(nèi)酯 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110800-200404
42051 華蟾酥毒基 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110803-200605
42052 * 含量測(cè)定 常溫，避光 30mg 110806-200704
42053 血竭素高氯酸鹽 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110811-200704
42054 10-羥基-2-癸烯酸 含量測(cè)定 常溫，避光 50mg 110812-200506
42055 ?；悄懰徕c 鑒別 常溫，避光 20mg 110815-200707
42056 ?；?鈉 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110816-200507
42057 1，8—二羥基葸醌 含量測(cè)定 常溫，避光 40mg 110829-199702
42058 *對(duì)照品 鑒別 常溫，避光 20mg 110830-200202
42059 廣藿香油 鑒別 常溫，避光 1ml 110832-200604
42060 D-* 含量測(cè)定 常溫，避光 100mg 110833-200904
42061 甲基正壬酮 含量測(cè)定 常溫，避光 0.1ml 110834-200502
42062 對(duì)甲氧基桂皮酸乙酯 鑒別 常溫，避光 50mg 110835-199601
42063 異嗪皮啶 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110837-200304
42064 茴香醛 鑒別 常溫，避光 1ml 110838-200605
42065 辣椒素 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110839-200403
42066 聯(lián)苯 含量測(cè)定 常溫，避光 100mg 110843-9501
42067 2，3，5，4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110844-200908
42068 牛磺*鈉 鑒別 常溫，避光 20mg 110846-200506
42069 乙氧基白屈菜紅堿 鑒別 常溫，避光 20mg 110847-200601
42070 木香揮發(fā)油 鑒別 常溫，避光 0.1ml 110849-200004
42071 杜鵑素 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110850-200604
42072 原阿片堿 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110853-200402
42073 蟲草素 鑒別 常溫，避光 20mg 110858-200202
42074 湖貝甲素 TLC掃描法     含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110859-200301
42075 山柰酚 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110861-200808
42076 山柰素 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110861-200808
42077 銀杏內(nèi)酯C(暫行) 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110864-200505
42078 銀杏葉對(duì)照提取物 鑒別 常溫，避光 700mg 110866-200803
42079 * 含量測(cè)定 常溫，避光 100mg 110870-200001
42080 三七莖葉皂苷 鑒別 常溫，避光 50mg 110871-200201
42081 * 鑒別 常溫，避光 100mg 110872-
42082 * 鑒別 常溫，避光 100mg 110873-9802
42083 * 鑒別 常溫，避光 100mg 110874-200203
42084 瓜氨酸 鑒別 常溫，避光 20mg 110875-200506
42085 * 鑒別 常溫，避光 100mg 110876-200204
42086 兒茶素 含量測(cè)定 常溫，人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒避光 20mg 110877-200001
42087 表兒茶素 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110878-200102
42088 腺苷 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110879-200202
42089 木蘭脂素 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110882-200605

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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