人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

41967 β-桉葉醇 β-Eudesmol 20mg/支 51317-08-9
41968 環(huán)黃芪醇 Cycloastragenol 20mg/支 84605-18-5
41969 丹參素 Danshensu 20mg/支 22681-72-7
41970 二氫姜黃素 Dihydrocurcumin 20mg/支
41971 綿馬貫眾素ABBA Dryocrassin ABBA 東北貫眾素 20mg/支 12777-70-7
41972 刺甘草查爾酮 Echinatin 20mg/支 34221-41-5
41973 大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷 Emodin-8-glucoside 20mg/支 23313-21-5
41974 綿馬酸ABA Filixic acid ABA 20mg/支 38226-84-5
41975 異蓮心堿 Isoliensinine 20mg/支 6817-41-0
41976 甘草查爾酮A Licochalcone A 20mg/支 58749-22-7
41977 甘草查爾酮B Licochalcone B 20mg/支 58749-23-8
41978 甘草查爾酮C Licochalcone C 20mg/支 144506-14-9
41979 蓮心堿高氯酸鹽 Liensinine Perchlorate 20mg/支
41980 蓮心堿 Liensinine 20mg/支 2586-96-1
41981 芳樟醇 Linalool 20mg/支 78-70-6
41982 木蘭花堿 Magnoflorine chloride 20mg/支 6681-18-1
41983 甲基* Methyl hesperidin 20mg/支 11013-97-1
41984 甲基原* Methyl protodioscin 20mg/支 54522-52-0
41985 丹參酚酸B甲酯 Monomethyl lithospermate B 20mg/支
41986 桑辛素 Morusin 20mg/支 62596-29-6
41987 桑皮苷A Mulberroside A 20mg/支 102841-42-9
41988 桑皮苷C Mulberroside C 20mg/支 102841-43-0
41989 丁烯基苯酞 3-Butylidenephthalide 20mg/支 551-08-6
41990 甲基蓮心堿 Neferine 20mg/支 2292-16-2
41991 新*內(nèi)酯 Neoandrographolide 20mg/支 27215-14-1
41992 氧化芍藥苷 Oxypaeoniflorin 20mg/支 39011-91-1
41993 茯苓酸 Pachymic acid 20mg/支 29070-92-6
41994 偽金絲桃素 Pseudohypericin 假金絲桃素 20mg/支 55954-61-5
41995 大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside 20mg/支 113443-70-2
41996 桑根酮C Sanggenone C 20mg/支 80651-76-9
41997 洋川芎內(nèi)酯A Senkyunolide A 50mg/支 62006-39-7
41998 洋川芎內(nèi)酯H Senkyunolide H 20mg/支 94596-27-7
41999 洋川芎內(nèi)酯I Senkyunolide I 20mg/支 94596-28-8
42000 番瀉苷元A Sennidin A 番瀉甙元A 20mg/支 641-12-3
42001 番瀉苷元B Sennidin B 番瀉甙元B 20mg/支 517-44-2
42002 甜橙黃酮 Sinensetin 5,6,7,3',4'-五甲氧基黃酮 20mg/支 2306-27-6
42003 斯皮諾素 Spinosin 棘苷 20mg/支 72063-39-9
42004 具棲冬青苷 Pedunculoside 長(zhǎng)梗冬青苷; 具棲冬青甙; 長(zhǎng)梗冬青甙 20mg/支 42719-32-4
42005 姜酮 Zingerone 20mg/支 122-48-5
42006 α-香附酮 α-Cyperone 20mg/支 473-08-5
42007 桑根酮D Sanggenone D 20mg/支 81422-93-7
42008 連翹酯苷A Forsythoside A 連翹酯素 20mg/支 79916-77-1
42009 千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯 5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol 20mg/支 218916-52-0
42010 歐當(dāng)歸內(nèi)酯A Levistilide A 歐當(dāng)歸內(nèi)酯 20mg/支 分子式:C24H28O4 
分子量:380 
42011 五味子丙素 Schisandrin C 20mg/支 61301-33-5
42012 * Scopolamine hydrobromide; Hyoscine hydrobromide 東莨菪堿氫溴酸鹽 20mg/支 114-49-8
42013 漢* Wogonoside 漢黃芩甙 20mg/支 51059-44-0
42014 千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷 Oroxyloside 木蝴蝶素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷; 木蝴蝶素A-7-葡萄糖醛酸苷；千層紙素-7-葡萄糖醛酸苷 5mg/支 分子式:C22H20O11 
分子量:460.39
42015 黃獨(dú)素B Diosbulbin B 黃獨(dú)乙素；黃藥子素B 20mg/支 20086-06-0
42016 西貝母堿 Sipeimine 西貝素；西貝堿 20mg/支 61825-98-7
42017 木蝴蝶苷A Oroxin A 木蝴蝶甙A 20mg/支 分子式:C21H20O10 
分子量:432.38 
42018 木蝴蝶苷B Oroxin B 木蝴蝶甙B 20mg/支 分子式: C27H30O15 
分子量:594.52 
42019 金石蠶苷 Poliumoside 金石蠶甙 20mg/支 94079-81-9
42020 連翹酯苷B Forsythoside B 連翹酯甙B 20mg/支 分子式:C34H44O19 
分子量:756.70 
42021 棕櫚酸 Palmitic acid 20mg/支 1957-10-3
42022 鹽酸黃柏堿 Phellodendrine chloride 10mg/支 104112-82-5
42023 碘化木蘭花堿 Magnoflorine iodide 木蘭花堿; 唐松草堿; 玉蘭堿; 洋玉蘭堿 10mg/支 2141-9-5
42024 (-)-丁香樹(shù)脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷 (-)-Syringaresnol-4-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside 10mg/支 136997-64-3
42025 人參皂苷Rgl 含量測(cè)定 常溫人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒，避光 20mg 110703-200726
42026 * 含量測(cè)定 常溫，避光 1ml 110707-201011
42027 桂皮醛 含量測(cè)定 -20℃，避光 0.5ml 110710-201016
42028 鹽酸水蘇堿 含量測(cè)定 常溫，避光 20mg 110712-201010

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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