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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-16 03:29:31瀏覽次數(shù):143次
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人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
41534 紅景天苷 Salidroside 紅景天甙 20mg/支 10338-51-9
41535 絡(luò)塞琳 Rosarin 20mg/支 84954-93-8
41536 絡(luò)塞維 Rosavin 20mg/支 84954-92-7
41537 絡(luò)緦 Rosin 20mg/支 85026-55-7
41538 絡(luò)塞定 Rosiridin 20mg/支 100462-37-1
41539 槐果堿 Sophocarpine 20mg/支 145572-44-7
41540 花旗松素 Taxifolin 二氫槲皮素;紫杉葉素;黃杉素 20mg/支 480-18-2
41541 槲皮素 Quercetin 20mg/支 117-39-5
41542 槲皮苷 Quercitrin 榭黃甙;槲皮甙;櫟素;橡皮苷 20mg/支 522-12-3
41543 * Artemether 20mg/支 71963-77-4
41544 姜黃素 Curcumin 20mg/支 458-37-7
41545 去甲氧基姜黃素 Demethoxycurcumin 20mg/支 24939-17-1
41546 雙去氧基姜黃素 Bisdemethoxycurcumin 雙去甲氧基姜黃素 20mg/支 24939-16-0
41547 莪術(shù)醇 Curcumol 姜黃醇 20mg/支 4871-97-0
41548 金絲桃苷 Hyperoside 槲皮素-3-半乳糖苷 20mg/支 482-36-0
41549 金絲桃素 Hypericin 10mg/支 548-04-9
41550 絞股藍(lán)皂苷XLIX Stevenleaf 20mg/支 此產(chǎn)品為絞股藍(lán)總皂苷
41551 苦杏仁苷 Amygdalin 扁桃苷 20mg/支 29883-15-6
41552 * Matrine 20mg/支 519-02-8
41553 * Caffeic acid 3,4-二羥基肉桂酸 20mg/支 331-39-5
41554 * D-Glucosamine hydrochloride D-* 20mg/支 66-84-2
41555 * Rotundine 四氫巴馬汀;延胡索乙素 20mg/支 10097-84-4
41556 落新婦苷 Astilbin 20mg/支 29838-67-3
41557 *甲素 Triptolide *內(nèi)酯醇;*多甙 20mg/支 38748-32-2
41558 *乙素 Tripdiolide *乙素;*羥內(nèi)酯;*內(nèi)酯二醇 20mg/支 38647-10-8
41559 *內(nèi)酯甲 Wilforlide A *酯甲 20mg/支 84104-71-2
41560 木犀草素 Luteolin 藤黃菌素 20mg/支 491-70-3
41561 木犀草苷 Cynaroside 木犀草素-7-O-葡萄糖苷;青蘭苷 20mg/支 1268798
41562 沒食子酸 Gallic acid 3,4,5-三羥基苯甲酸 20mg/支 149-91-7
41563 蒙花苷 Buddleoside 20mg/支 480-36-4
41564 莽草酸 Shikimic acid 20mg/支 138-59-0
41565 芹菜素 Apigenin 芹黃素;5,7,4'-三羥基黃酮 20mg/支 520-36-5
41566 青藤堿 Sinomenine 20mg/支 115-53-7
41567 * Oleanolic acid 土當(dāng)歸酸 20mg/支 508-02-1
41568 * Sodium Aescinate 20mg/支 20977-05-3
41569 * Xylitol 戊五醇;五羥基戊烷;1,2,3,4,5-五羥基戊烷 20mg/支 87-99-0
41570 鹽酸育亨賓 Yohimbine Hydrochloride 20mg/支 65-19-0
41571 煙堿 L-Nicotine 尼古丁 20mg/支 20033
41572 金雀花堿 Cytisine 野靛堿 20mg/支 485-35-8
41573 * Colchicine 秋水仙素 20mg/支 64-86-8
41574 *元 Diosgenin 薯蕷皂素;地奧配質(zhì) 20mg/支 512-04-9
41575 * Dioscin 薯蕷皂甙; 重樓皂苷III; 重樓皂甙III 20mg/支 19057-60-4
41576 原* Protodioscin 原薯蕷皂甙 20mg/支 55056-80-9
41577 蛇床子素 Osthole 20mg/支 484-12-8
41578 麝香酮 Muscone 0.15ml/支 541-91-3
41579 山奈酚 Kaempferol 山柰酚 20mg/支 520-18-3
41580 水楊苷 D-(?)-Salicin 水楊甙;水楊素 20mg/支 138-52-3
41581 * Silymarin *;西利馬林 20mg/支 22888-70-6
41582 蕓香柚皮苷 Narirutin 10mg/支 14259-46-2
41583 鼠李糖 L-Rhamnose 20mg/支 6155-35-7
41584 甜菜堿 Betaine 20mg/支 107-43-7
41585 甜菊苷 Stevioside 甜菊糖 20mg/支 57817-89-7
41586 * Gastrodin 天麻苷 20mg/支 62499-27-8
41587 熊果酸 Ursolic acid 烏蘇酸;烏索酸 20mg/支 77-52-1
41588 熊果苷 Arbutin 20mg/支 497-76-7
41589 辛弗林 Synephrine 辛福林堿;辛佛寧;交感醇;昔奈福林 20mg/支 34520
41590 香豆素 人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒Coumarin 20mg/支 91-64-5
41591 對香豆酸 p-Coumaric acid 20mg/支 501-98-4
41592 延胡索乙素 Tetrahydropalmatine 20mg/支
41593 淫羊藿苷 Icariin 20mg/支 489-32-7
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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