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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-05 11:29:01瀏覽次數(shù):226次
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人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
41471 橄欖苦苷 Oleuropein 橄欖苦甙 20mg/支 32619-42-4
41472 黨參炔苷 Lobetyolin 黨參炔甙 10mg/支 136085-37-5
41473 鼠尾草酸 Carnosic acid 20mg/支 639426
41474 迷迭香酸 Rosmarinic acid 20mg/支 20283-92-5
41475 黃豆黃苷 Glycitin 黃豆黃甙 20mg/支 40246-10-4
41476 黃豆黃素 Glycitein 20mg/支 40957-83-3
41477 大豆苷 Daidzin 大豆甙 20mg/支 552-66-9
41478 大豆苷元 Daidzein 大豆甙元;* 20mg/支 486-66-8
41479 染料木素 Genistein 染料木黃酮;金雀異黃酮 20mg/支 446-72-0
41480 染料木苷 Genistin 5,7-三羥異黃酮-7-糖苷 20mg/支 529-59-9
41481 歐前胡素 Imperatorin 20mg/支 482-44-0
41482 異歐前胡素 Isoimperatorin 20mg/支 482-45-1
41483 遠志酸 Polygalacic acid 20mg/支 22338-71-2
41484 遠志皂苷元 Senegenin 20mg/支 2469-34-3
41485 萊苞迪甙A Rebaudioside A 萊苞迪苷A 10mg/支 58543-16-1
41486 * Baicalin 黃芩甙 20mg/支 21967-41-9
41487 野* Scularin 野黃芩甙;燈盞花乙素;* 20mg/支 27740-01-8
41488 黃芩素 Baicalein *元; 黃芩黃素 20mg/支 491-67-8
41489 秦皮素 Fraxetin 秦皮亭;白蠟樹內(nèi)酯 20mg/支 574-84-5
41490 秦皮甲素 Esculin 20mg/支 531-75-9
41491 秦皮乙素 6,7-Dihydroxycoumarin 20mg/支 305-01-1
41492 綠原酸 Chlorogenic acid 20mg/支 327-97-9
41493 1-咖啡??鼘幩?20mg/支
41494 1,5-二咖啡??鼘幩?1,5-Dicaffeoylquinic acid 20mg/支 30964-13-7
41495 鹽酸巴馬汀 Palmatine hydrochloride *;棕櫚堿 20mg/支 10605-02-4
41496 * Hesperidin 橙皮甙 20mg/支 520-26-3
41497 新* Neohesperidin 新橙皮甙 20mg/支 13241-33-3
41498 柴胡皂苷B Saikosaponin B 柴胡皂甙B 20mg/支 此產(chǎn)品為柴胡皂苷B1和B2的混合體
41499 橙皮素 Hesperitin 20mg/支 520-33-2
41500 甘草酸 Glycyrrhizic acid 甘草甜素;甘草皂苷 20mg/支 1405-86-3
41501 甘草次酸 Glycyrrhetinic acid 20mg/支 1449-05-4;471-53-4?
41502 *鹽 Glycyrrhizic acid ammonium salt 甘草酸銨 20mg/支 53956-04-0
41503 甘草苷 Liquiritin 甘草甙 20mg/支 551-15-5
41504 異甘草苷 Isoliquiritin 異甘草甙 10mg/支 5041-81-6
41505 甘草素 Liquiritigenin 甘草醇 20mg/支 578-86-9
41506 大黃酸 Rhein 20mg/支 478-43-3
41507 大黃素甲醚 Physcion 20mg/支 521-61-9
41508 蘆薈大黃素 Aloeemodin 蘆薈瀉素 20mg/支 481-72-1
41509 楊梅素 Myricetin 楊梅黃酮;楊梅酮 20mg/支 529-44-2
41510 二氫楊梅素 Dihydromyricetin 20mg/支 27200-12-0
41511 阿魏酸 Ferulic acid 20mg/支 1135-24-6
41512 白藜蘆醇 Resveratrol 20mg/支 501-36-0
41513 虎杖苷 Polydatin 白藜蘆醇苷 20mg/支 27208-80-6
41514 薄荷醇
41515 丹皮酚 Paeonol 芍藥醇;牡丹酚 20mg/支 552-41-0
41516 丹酚酸A Salvianolic acid A 丹參酚酸A 20mg/支 96574-01-5
41517 丹酚酸B Salvianolic acid B 丹參酚酸B 20mg/支 115939-25-8
41518 丹參酮IIA Tanshinone IIA 20mg/支 568-72-9
41519 丹參酮IIA-磺酸鈉
41520 丹參酮I Tanshinone I 20mg/支 568-73-0
41521 二氫丹參酮I Dihydrotanshinone I 二氫丹參酮 20mg/支 87205-99-0
41522 隱丹參酮 Cryptotanshinone 20mg/支 35825-57-1
41523 丹參素鈉 Sodium Danshensu 20mg/支 67920-52-9
41524 冬凌草甲素 Oridonin 20mg/支 28957-04-2
41525 * Coenzyme Q10 20mg/支 303-98-0
41526 * Podophyllotoxin 20mg/支 518-28-5
41527 黃芪總皂苷人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒 Astragaloside 20mg/支 17429-69-5
41528 黃芪甲苷 Astragaloside IV 黃芪甲甙;黃芪皂苷IV 20mg/支 84687-43-4
41529 黃芪皂苷I Astragaloside I 黃芪皂甙I 10mg/支 84680-75-1
41530 黃芪皂苷II Astragaloside II 黃芪皂甙II 10mg/支 84676-89-1
41531 黃芪皂苷III Astragaloside III 黃芪皂甙III 10mg/支 84687-42-3
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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