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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-18 06:43:51瀏覽次數(shù):245次
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人C多肽(CP) ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人C多肽(CP) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人C多肽(CP) ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
41140 貝那普利相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
41141 苯那普利相關(guān)化合物E標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
41142
1-芐基-3-甲基-5-氨基吡唑鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品
25mg
41143 beta-胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品 ea
41144 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
41145 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
41146 越橘提取物標(biāo)準(zhǔn)品 Powdered Bilberry Extract 500mg
41147 生物活性測定陽性對照標(biāo)準(zhǔn)品 Positive Bioreaction 3 strips
41148 *溶液混合物標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
41149 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
41150 乳香提取物標(biāo)準(zhǔn)品 Boswellia Serrata Extract 1g
41151 11-羰基-Β-乙酰乳香酸標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
41152 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Bupivacaine Related Compound A 50mg
41153 *標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
41154 *雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品 20mg
41155 5-羥基吲哚-2-羧酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品 ea
41156 辛酰己酰聚氧甘油酯標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
41157 一水合*鈉標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
41158 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
41159 *系統(tǒng)適應(yīng)性混合物標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
41160 *標(biāo)準(zhǔn)品 75mg
41161 *系統(tǒng)適應(yīng)性用標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
41162 頭孢吡肟相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 ea
41163 頭孢吡肟相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 ea
41164 *懸濁液標(biāo)準(zhǔn)品 30mg
41165 *相關(guān)雜質(zhì)H標(biāo)準(zhǔn)品 30mg
41166 *相關(guān)雜質(zhì)k標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
41167 * ea
41168 *△3-異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品 Ceftazidime, Delta-3-Isomer 10mg
41169 硅化微晶纖維素標(biāo)準(zhǔn)品 1g
41170 *標(biāo)準(zhǔn)品 Celecoxib 200mg
41171 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
41172 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
41173 綠蓮吉寧標(biāo)準(zhǔn)品 beta-Chlorogenin 20mg
41174 氯甲基碳酸異丙酯標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
41175 過硫*鈉標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
41176 吡啶甲酸鉻標(biāo)準(zhǔn)品 Chromium Picolinate 100mg
41177 環(huán)吡酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Ciclopirox Related Compound A 25mg
41178 西司他丁銨標(biāo)準(zhǔn)品 Cilastatin Ammonium Salt 100mg
41179 西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)G標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
41180 西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
41181 西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
41182 西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
41183 *乙二胺同系物標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
41184 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品人C多肽(CP) ELISA試劑盒 25mg
41185 克拉維酸-2-羧酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品 3.5 micrograms
41186 克利溴銨相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 250mg
41187 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
41188 可樂定雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人C多肽(CP) ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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