人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

40739 乙酸丁酯標(biāo)準(zhǔn)品 Butyl Acetate 1.2ml×3ampules 123-86-4
40740 鹽酸比哌立登標(biāo)準(zhǔn)品 Biperiden Hydrochloride 200mg 1235-82-1
40741 3-甲基-丁醇標(biāo)準(zhǔn)品 3-Methyl-1-butanol 1.2ml×3ampules 123-51-3 
40742 *酯delta-3-異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 123458-61-7
40743 *標(biāo)準(zhǔn)品 Hydroquinone 500mg 123-31-9 
40744 4-氨基*標(biāo)準(zhǔn)品 4-Aminophenol 100mg 123-30-8
40745 *標(biāo)準(zhǔn)品 Cefepime Hydrochloride 500mg 123171-59-5
40746 苯氧基乙醇標(biāo)準(zhǔn)品 500mg 122-99-6 
40747 鹽酸甲吡吩嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Methdilazine Hydrochloride 200mg 1229-35-2 
40748 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Doxepin Hydrochloride 500mg 1229-29-4
40749 鹽酸普羅替林標(biāo)準(zhǔn)品 Protriptyline Hydrochloride 200mg 1225-55-4 
40750 碘泊酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Ipodate Sodium 200mg 1221-56-3 
40751 磺胺二甲氧嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfadimethoxine  200mg 122-11-2 
40752 *標(biāo)準(zhǔn)品 Gemcitabine Hydrochloride  200mg 122111-03-9 
40753 鹽酸多佐胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 122028-36-8
40754 氯碳頭孢標(biāo)準(zhǔn)品 Loracarbef  200mg 121961-22-6 
40755 金硫葡糖標(biāo)準(zhǔn)品 Aurothioglucose 100mg 12192-57-3
40756 *標(biāo)準(zhǔn)品 Xylometazoline Hydrochloride  125mg 1218-35-5 
40757 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 1218-34-4 
40758 沒(méi)食子酸丙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Propyl Gallate  200mg 121-79-9 
40759 馬拉硫磷標(biāo)準(zhǔn)品 Malathion 500mg 121-75-5 
40760 磷酸三鈣標(biāo)準(zhǔn)品 1g 12167-74-7
40761 硝唑尼特相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 121-66-4 
40762 卡巴胂標(biāo)準(zhǔn)品 Carbarsone 200mg 121-59-5
40763 對(duì)氨基苯磺酸標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfanilic Acid  200mg 121-57-3 
40764 芐索氯銨標(biāo)準(zhǔn)品 Benzethonium Chloride 500mg 121-54-0
40765 *（Z）-異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品 Cefprozil (Z)-Isomer 200mg 121412-77-9
40766 香蘭素標(biāo)準(zhǔn)品 Vanillin  200mg 121-33-5 
40767 香蘭素熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品 1g 121-33-5 
40768 乙基香蘭素標(biāo)準(zhǔn)品 Ethyl Vanillin 200mg 121-32-4
40769 苯并噻二嗪相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 121-30-2
40770 阿侖磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Alendronate Sodium 200mg 121268-17-5
40771 安普羅銨標(biāo)準(zhǔn)品 Amprolium 200mg 121-25-5
40772 氯化銨標(biāo)準(zhǔn)品 Ammonium Chloride 200mg 12125-02-9
40773 洛克沙砷標(biāo)準(zhǔn)品 Roxarsone  200mg 121-19-7 
40774 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 1210-35-1
40775 3-叔丁基-4-羥基茴香醚標(biāo)準(zhǔn)品 3-tert-Butyl-4-hydroxyanisole 200mg 121-00-6
40776 雙氯非那胺標(biāo)準(zhǔn)品 Dichlorphenamide 200mg 120-97-8
40777 2,4-二氯酚標(biāo)準(zhǔn)品 2,4-Dichlorophenol 100mg 120-83-2
40778 苯甲酸芐酯標(biāo)準(zhǔn)品 Benzyl Benzoate 5g 120-51-4
40779 *標(biāo)準(zhǔn)品 Anastrozole 200mg 120511-73-1
40780 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 120511-72-0
40781 尼泊金乙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Ethylparaben 200mg 120-47-8
40782 *相關(guān)雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 120202-71-3
40783 維拉帕米相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 Verapamil Related Compound E 50mg 120-14-9 
40784 釓特醇標(biāo)準(zhǔn)品 Gadoteridol  500mg 120066-54-8 
40785 釓特醇相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒 50mg 120041-08-9 
40786 *標(biāo)準(zhǔn)品 Donepezil Hydrochloride 200mg 120011-70-3
40787 *有關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 119812-29-2 

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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