人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

40639 標(biāo)準(zhǔn)品 Manganese Chloride (AS) 1g 13446-34-9 
40640 托卡朋標(biāo)準(zhǔn)品 Tolcapone  200mg 134308-13-7 
40641 *鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Dicloxacillin Sodium 500mg 13412-64-1
40642 鄰氨基苯甲酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品 Menthyl Anthranilate 500mg 134-09-8 
40643 10-甲酰*標(biāo)準(zhǔn)品 10-Formylfolic Acid  25mg 134-05-4 
40644 抗壞血酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Ascorbate  200mg 134-03-2 
40645 三*標(biāo)準(zhǔn)品 Trichlormethiazide 200mg 133-67-5 
40646 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 133627-17-5 
40647 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 133481-09-1 
40648 前列腺素B1標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 13345-51-2 
40649 *標(biāo)準(zhǔn)品 Flutamide  200mg 13311-84-7 
40650 賴脯胰島素標(biāo)準(zhǔn)品(2-8℃) Insulin Lispro 5.97mg 133107-64-9 
40651 *V鉀標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillin V Potassium  200mg 132-98-9 
40652 *標(biāo)準(zhǔn)品 Rifampin  300mg 13292-46-1 
40653 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 132685-02-0 
40654 *標(biāo)準(zhǔn)品 Olanzapine  200mg 132539-06-1 
40655 甘油二硬脂酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Glyceryl Distearate 500mg 1323-83-7 
40656 *標(biāo)準(zhǔn)品 Pheniramine Maleate 150mg 132-20-7 
40657 甲磺酰苯扎托品標(biāo)準(zhǔn)品 Benztropine Mesylate 200mg 132-17-2
40658 鹽酸*對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品 Ropivacaine Hydrochloride  200mg 132112-35-7 
40659 蘭素拉唑相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 131926-99-3 
40660 帕立骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 131918-61-1 
40661 苯酰*標(biāo)準(zhǔn)品 Metronidazole Benzoate  100mg 13182-89-3 
40662 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 0．2ml 13171-18-1 
40663 鈉曲酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 131670-05-8 
40664 羥苯甲酮標(biāo)準(zhǔn)品 Oxybenzone  150mg 131-57-7 
40665 二羥苯宗標(biāo)準(zhǔn)品 Dioxybenzone 150mg 131-53-3
40666 N-乙酰神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 N-Acetylneuraminic Acid  200mg 131-48-6 
40667 氧化鋅標(biāo)準(zhǔn)品 Zinc Oxide (AS) 2g 1314-13-2 
40668 釓雙胺標(biāo)準(zhǔn)品 Gadodiamide  500mg 131410-48-5 
40669 甘羅溴銨相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 75mg 13118-11-1 
40670 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 13114-72-2 
40671 釓弗塞胺標(biāo)準(zhǔn)品 Gadoversetamide  200mg 131069-91-5 
40672 *標(biāo)準(zhǔn)品 Magnesium Hydroxide (AS) 1g 1309-42-8 
40673 恩他卡朋標(biāo)準(zhǔn)品 Entacapone 150mg 130929-57-6
40674 撲酸標(biāo)準(zhǔn)品 Pamoic Acid  250mg 130-85-8 
40675 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 130855-30-0 
40676 *相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 130793-27-0 
40677 鹽酸多佐胺標(biāo)準(zhǔn)品 Dorzolamide Hydrochloride 200mg 130693-82-2
40678 鹽酸硫利達(dá)嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Thioridazine Hydrochloride  200mg 130-61-0 
40679 氫氧化鈣標(biāo)準(zhǔn)品 Calcium Hydroxide (AS) 1g 1305-62-0
40680 *標(biāo)準(zhǔn)品 Clioquinol 500mg 130-26-7
40681 醋酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Mafenide Acetate 400mg 13009-99-9 
40682 鹽酸吡哌酯標(biāo)準(zhǔn)品 Piperidolate Hydrochloride  200mg 129-77-1 
40683 無水*標(biāo)準(zhǔn)品 Nevirapine Anhydrous  100mg 129618-40-2 
40684 半水*標(biāo)準(zhǔn)品 Nevirapine Hemihydrate  100mg 129618-40-2 
40685 馬來酸*標(biāo)準(zhǔn)品人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 100mg 129-51-1
40686 維替泊芬標(biāo)準(zhǔn)品 Verteporfin  200mg 129497-78-5 
40687 馬來酸美西麥角標(biāo)準(zhǔn)品 Methysergide Maleate 350mg 129-49-7 

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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