人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

40589 *標(biāo)準(zhǔn)品 Tylosin  250mg 1401-69-0 
40590 單寧酸標(biāo)準(zhǔn)品 Tannic Acid (AS) 2g 1401-55-4 
40591 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 1400-61-9 
40592 *醌標(biāo)準(zhǔn)品 Rifampin Quinone  25mg 13983-13-6 
40593 *標(biāo)準(zhǔn)品 125mg 1397-89-3
40594 硫鏈絲菌素標(biāo)準(zhǔn)品 Thiostrepton  200mg 1393-48-2 
40595 R-佐米曲坦異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 139264-24-7 
40596 氨基三乙酸標(biāo)準(zhǔn)品 Nitrilotriacetic Acid  50mg 139-13-9 
40597 *標(biāo)準(zhǔn)品 Ziprasidone Hydrochloride  200mg 138982-67-9 
40598 *標(biāo)準(zhǔn)品 Ibandronate Sodium 100mg 138926-19-9 
40599 鹽酸倍他唑標(biāo)準(zhǔn)品 Betazole Hydrochloride 200mg 138-92-1
40600 布林佐胺標(biāo)準(zhǔn)品 Brinzolamide 200mg 138890-62-7
40601 氨苯甲酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品 Aminobenzoate Potassium 200mg 138-84-1
40602 *鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Pantoprazole Sodium  200mg 138786-67-1 
40603 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 138564-59-7 
40604 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fexofenadine Hydrochloride  200mg 138452-21-8 
40605 *標(biāo)準(zhǔn)品 Irbesartan  200mg 138402-11-6 
40606 *標(biāo)準(zhǔn)品 Enflurane 1ml 13838-16-9
40607 三氯氨絡(luò)鉑酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 13820-91-2 
40608 左*標(biāo)準(zhǔn)品 Levofloxacin  350mg 138199-71-0 
40609 L-*鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 L-Glutamic Acid Hydrochloride 100mg 138-15-8 
40610 去鐵銨標(biāo)準(zhǔn)品 Deferoxamine Mesylate 500mg 138-14-7
40611 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 137863-20-8 
40612 *相關(guān)化合物 A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 137862-87-4 
40613 *棕櫚酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Ascorbyl Palmitate (AS) 2g 137-66-6
40614 *標(biāo)準(zhǔn)品 Lidocaine  250mg 137-58-6 
40615 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Nitroprusside  500mg 13755-38-9 
40616 諾孕酯相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 13732-69-9 
40617 *相關(guān)物質(zhì)B 10mg 137234-63-0 
40618 *標(biāo)準(zhǔn)品 Voriconazole 100mg 137234-62-9 
40619 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 137-08-6
40620 己基*標(biāo)準(zhǔn)品 Hexylresorcinol 200mg 136-77-6 
40621 *標(biāo)準(zhǔn)品 Irinotecan Hydrochloride  100mg 136572-09-3 
40622 阿巴卡韋相關(guān)物質(zhì)混合物標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 136470-78-5
40623 *標(biāo)準(zhǔn)品 Tetracaine Hydrochloride 200mg 136-47-0 
40624 度洛西汀標(biāo)準(zhǔn)品 Duloxetine Hydrochloride 100mg 136434-34-9
40625 非那吡啶鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Phenazopyridine Hydrochloride 200mg 136-40-3 
40626 鹽酸二甲胺四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品 Minocycline Hydrochloride  200mg 13614-98-7 
40627 氯胍相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Proguanil Related Compound C 25mg 13590-98-2 
40628 心得樂標(biāo)準(zhǔn)品 Pindolol  200mg 13523-86-9 
40629 依替膦酸鈉相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Etidronate Disodium 300mg 13517-23-2
40630 氫氟甲噻標(biāo)準(zhǔn)品 Hydroflumethiazide 200mg 135-09-1 
40631 *標(biāo)準(zhǔn)品 Methyclothiazide  200mg 135-07-9 
40632 *標(biāo)準(zhǔn)品 Repaglinide  200mg 135062-02-1 
40633 *鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 134-80-5
40634 *標(biāo)準(zhǔn)品人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 Lamivudine  200mg 134678-17-4 
40635 *標(biāo)準(zhǔn)品 Titanium Dioxide (AS) 1g 13463-67-7 
40636 避蚊胺標(biāo)準(zhǔn)品 Diethyltoluamide 3g 134-62-3
40637 托卡朋相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Tolcapone Related Compound B 25mg 134612-80-9 

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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