人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

40539 膦甲酸相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 Foscarnet Related Compound D 0.27ml 1474-78-8 
40540 *標(biāo)準(zhǔn)品 Diphenhydramine Hydrochloride 200mg 147-24-0
40541 2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 14685-79-1 
40542 鹽酸氟*標(biāo)準(zhǔn)品 Fluphenazine Hydrochloride  125mg 146-56-5 
40543 *標(biāo)準(zhǔn)品 Selegiline Hydrochloride  200mg 14611-52-0 
40544 曲氟胸苷相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 14599-46-3 
40545 鹽酸噻加賓標(biāo)準(zhǔn)品 Tiagabine Hydrochloride 300mg 145821-59-6 
40546 阿米洛利相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 1458-01-1
40547 醋酸戈舍瑞林標(biāo)準(zhǔn)品 Goserelin Acetate 100mg 145781-92-6 
40548 多奈哌齊A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 145546-80-1
40549 ?；悄懰釅A標(biāo)準(zhǔn)品 Bile Salts 10mg 145-42-6
40550 *標(biāo)準(zhǔn)品 Piperazine Phosphate 200mg 14538-56-8 
40551 恩他卡朋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Entacapone Related Compound A 25mg 145195-63-7
40552 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfapyridine  200mg 144-83-2 
40553 *熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品 1g 144-83-2 
40554 磺胺甲噻二唑標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfamethizole 200mg 144-82-1 
40555 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfacetamide  300mg 144-80-9 
40556 *相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 144750-52-7
40557 *相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 144750-42-5
40558 *標(biāo)準(zhǔn)品 misartan  150mg 144701-48-4 
40559 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Bicarbonate (AS) 3g 144-55-8 
40560 枸椽酸哌嗪標(biāo)準(zhǔn)品 Piperazine Citrate 200mg 144-29-6 
40561 酚磺酞標(biāo)準(zhǔn)品 Phenolsulfonphthalein  100mg 143-74-8 
40562 *標(biāo)準(zhǔn)品 Emtricitabine 200mg 143491-57-0
40563 鹽酸那拉曲坦標(biāo)準(zhǔn)品 Naratriptan Hydrochloride 125mg 143388-64-1 
40564 月桂酸標(biāo)準(zhǔn)品 Lauric Acid 500mg 143-07-7 
40565 棕櫚酸異丙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Isopropyl Palmitate 500mg 142-91-6 
40566 哌嗪己二酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Piperazine Adipate 200mg 142-88-1 
40567 庚烷標(biāo)準(zhǔn)品 Heptane 1.2ml×3ampules 142-82-5 
40568 哌嗪二鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Piperazine Dihydrochloride 200mg 142-64-3 
40569 帕苯達(dá)唑標(biāo)準(zhǔn)品 Parbendazole  200mg 14255-87-9 
40570 *一鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Monosodium Glutamate (AS) 1g 142-47-2 
40571 馬來酸二乙基己酯標(biāo)準(zhǔn)品 Bis(2-ethylhexyl)maleate 2ml 142-16-5
40572 △-4，6-膽甾二烯醇標(biāo)準(zhǔn)品 Delta-4,6-cholestadienol 30mg 14214-69-8
40573 乙酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)品 Ethyl Acetate 1.2ml×3ampules 141-78-6
40574 鹽酸替來他明標(biāo)準(zhǔn)品 Tiletamine Hydrochloride 200mg 14176-50-2 
40575 前列腺素A1標(biāo)準(zhǔn)品 Prostaglandin A1  25mg 14152-28-4 
40576 乙醇胺標(biāo)準(zhǔn)品 Monoethanolamine  1ml 141-43-5 
40577 二異丙酚相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 141214-18-8 
40578 格拉司瓊相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 141136-01-8 
40579 錳福地吡三鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Mangafodipir Trisodium 200mg 140678-14-4 
40580 依西酸噴他脒標(biāo)準(zhǔn)品 Pentamidine Isethionate 200mg 140-64-7 
40581 短*標(biāo)準(zhǔn)品 Gramicidin  200mg 1405-97-6 
40582 *鋅標(biāo)準(zhǔn)品 Bacitracin Zinc 200mg 1405-89-6
40583 *標(biāo)準(zhǔn)品人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒 1g 1405-87-4
40584 甘草酸標(biāo)準(zhǔn)品 Glycyrrhizic Acid 25mg 1405-86-3 
40585 酒石酸泰洛星標(biāo)準(zhǔn)品 Tylosin Tartrate  100mg 1405-54-5 
40586 *標(biāo)準(zhǔn)品 Olopatadine Hydrochloride  150mg 140462-76-6 
40587 *標(biāo)準(zhǔn)品 Candicidin 200mg 1403-17-4
40588 阿莫沙平標(biāo)準(zhǔn)品 Amoxapine 200mg 14028-44-5

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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