人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

40489 甲酚曲唑三硅氧烷標(biāo)準(zhǔn)品 Drometrizole Trisiloxane 200mg 155633-54-8
40490 *標(biāo)準(zhǔn)品 Methscopolamine Bromide  200mg 155-41-9 
40491 *標(biāo)準(zhǔn)品 Ritonavir  200mg 155213-67-5 
40492 泮庫(kù)溴銨標(biāo)準(zhǔn)品 Pancuronium Bromide  200mg 15500-66-0 
40493 鹽酸曲吡那敏標(biāo)準(zhǔn)品 Tripelennamine Hydrochloride 200mg 154-69-8 
40494 磷酸安他唑啉標(biāo)準(zhǔn)品 Antazoline Phosphate 200mg 154-68-7
40495 依法韋侖標(biāo)準(zhǔn)品 Efavirenz 200mg 154598-52-4
40496 硫*標(biāo)準(zhǔn)品 Thioguanine 200mg 154-42-7 
40497 鹽酸*胺標(biāo)準(zhǔn)品 250mg 154-41-6 
40498 碘普羅胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 154361-51-0 
40499 *標(biāo)準(zhǔn)品 Capecitabine 200mg 154361-50-9
40500 (+)-兒茶酸標(biāo)準(zhǔn)品 (+)-Catechin 25mg 154-23-4
40501 D-2-脫氧葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 2-Deoxy-D-Glucose (AS) 100mg 154-17-6
40502 布林佐胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 154127-19-2
40503 雙氯芬酸相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 15362-40-0
40504 鹽酸去甲*標(biāo)準(zhǔn)品 Nor* Hydrochloride 25mg 15308-34-6 
40505 *標(biāo)準(zhǔn)品 Diclofenac Potassium 200mg 15307-81-0
40506 *標(biāo)準(zhǔn)品 Diclofenac Sodium 200mg 15307-79-6
40507 醋硝香豆素標(biāo)準(zhǔn)品 Acenocoumarol 200mg 152-72-7
40508 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 152628-02-9 
40509 去氫孕酮標(biāo)準(zhǔn)品 Dydrogesterone 200mg 152-62-5
40510 *△3-異構(gòu)體標(biāo)準(zhǔn)品 Cefaclor, Delta-3 Isomer 30mg 152575-13-8
40511 *標(biāo)準(zhǔn)品 Flurandrenolide  100mg 1524-88-5 
40512 *標(biāo)準(zhǔn)品 Verapamil Hydrochloride  200mg 152-11-4 
40513 *標(biāo)準(zhǔn)品 Monukast Sodium 150mg 151767-02-1 
40514 *磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Betamethasone Sodium Phosphate 500mg 151-73-5
40515 氟烷標(biāo)準(zhǔn)品 Halothane 1ml 151-67-7 
40516 莫西沙星相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 151213-15-9
40517 普伐他汀1，1，3，3－四甲基氨基丁烷標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 151006-14-3 
40518 鹽酸丙環(huán)定標(biāo)準(zhǔn)品 Procyclidine Hydrochloride 200mg 1508-76-5 
40519 *標(biāo)準(zhǔn)品 Tropicamide 200mg 1508-75-4 
40520 氯化奧昔布寧標(biāo)準(zhǔn)品 Oxybutynin Chloride  200mg 1508-65-2 
40521 *標(biāo)準(zhǔn)品 Balsalazide Disodium 200mg 150399-21-6
40522 *標(biāo)準(zhǔn)品 Rimantadine Hydrochloride  300mg 1501-84-4 
40523 氨苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)品 Aminobenzoic Acid 200mg 150-13-0
40524 群多普利相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 149881-40-3 
40525 甲磺酸沙奎拉韋標(biāo)準(zhǔn)品 Saquinavir Mesylate  200mg 149845-06-7 
40526 *標(biāo)準(zhǔn)品 Clemastine Fumarate 250mg 14976-57-9
40527 赤蘚糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 Erythritol 200mg 149-32-6
40528 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Folic Acid Related Compound A 50mg 1492-18-8 
40529 亞*鈣標(biāo)準(zhǔn)品 Leucovorin Calcium  500mg 1492-18-8 
40530 反鉑對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品 Transplatin  25mg 14913-33-8 
40531 *標(biāo)準(zhǔn)品 Bismuth Subsalicylate 100mg 14882-18-9
40532 噻苯咪唑標(biāo)準(zhǔn)品 Thiabendazole 100mg 148-79-8 
40533 三水多烯*標(biāo)準(zhǔn)品人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 Docetaxel 200mg 148408-66-6
40534 環(huán)吡酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Ciclopirox Related Compound B 25mg 14818-35-0
40535 *相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 148146-51-4
40536 阿糖胞苷標(biāo)準(zhǔn)品 Cytarabine 250mg 147-94-4
40537 L-*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Proline  200mg 147-85-3 

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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