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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-09 20:16:15瀏覽次數:169次
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人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
40139 *相關物質C標準品 15mg 330838-52-3
40140 *標準品 Paclitaxel 200mg 33069-62-4
40141 富馬酸噻吡二胺標準品 Methapyrilene Fumarate 200mg 33032-12-1
40142 *標準品 Tobramycin 350mg 32986-56-4
40143 睡茄交酯 A標準品 Withanolide A 15mg 32911-62-9
40144 *相關物質A標準品 15mg 328385-86-0
40145 綠原酸標準品 Chlorogenic Acid 50mg 327-97-9
40146 *標準品 Labetalol Hydrochloride 200mg 32780-64-6
40147 *相關物質A標準品 0.1ml 32778-08-8
40148 苯磺酸美索達嗪標準品 Mesoridazine Besylate 250mg 32672-69-8
40149 *相關物質A標準品 15mg 32634-68-7
40150 鈣三醇標準品 10mg 32222-06-3
40151 *溶液標準品 Calcitriol Solution 5ml 32222-06-3
40152 *相關雜質A標準品 10mg 3219-99-6
40153 *相關物質F標準品 25mg 321571-07-7
40154 L-硒代蛋氨酸標準品 Selenomethionine 100mg 3211-76-5
40155 鹽酸乙基*標準品 200mg 3198-07-0
40156 *標準品 Propranolol Hydrochloride 200mg 318-98-9
40157 *標準品 Meclizine Hydrochloride 500mg 31884-77-2
40158 曲米帕明標準品 25mg 315-69-5
40159 丙二醇單辛酸酯I型標準品 1g 31565-12-5
40160 丙二醇單辛酸酯II型標準品 1g 31565-12-5
40161 庚酸睪酮標準品 Testosterone Enanthate CIII 200mg 315-37-7
40162 *標準品 Allopurinol 250mg 315-30-0
40163 紫外線吸收劑UV-329標準品 25mg 3147-75-9
40164 甲苯達唑標準品 Mebendazole 200mg 31431-39-7
40165 環(huán)戊丙酸雌二醇標準品 Estradiol Cypionate 200mg 313-06-4
40166 *磷酸鈉標準品 Dexamethasone Phosphate 200mg 312-93-6
40167 *相關雜質C標準品 15mg 31251-41-9
40168 3-氨基-2,4,6-三碘苯甲酸標準品 50mg 3119-15-1
40169 *相關化合物A標準品 100mg 31127-80-7
40170 甲泛葡胺標準品 Metrizamide 500mg 31112-62-6
40171 鹽酸氟*庚酸酯標準品 125mg 3105-68-8
40172 *相關物質E標準品 25mg 31055-19-3
40173 氯氟舒松標準品 Halcinonide 200mg 3093-35-4
40174 *相關物質B標準品 100mg 3086-91-7
40175 阿糖尿苷標準品 Uracil Arabinoside 50mg 3083-77-0
40176 *相關物質B標準品 25mg 30806-86-1
40177 氫溴酸羥苯丙胺標準品 200mg 306-21-8
40178 巴吉林鹽酸鹽標準品 Pargyline Hydrochloride 200mg 306-07-0
40179 苯妥英相關物質A標準品 Phenytoin Related Compound A 50mg 3060-50-2
40180 *標準品 Stavudine 250mg 3056-17-5
40181 替扎尼定相關物質A標準品 50mg 30536-19-7
40182 *標準品 Zidovudine 400mg 30516-87-1
40183 *標準品 Hydralazine Hydrochloride 200mg 304-20-1
40184 輔酶 Q10標準品 人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒200mg 303-98-0
40185 輔酶 Q10環(huán)境標準品 25mg 303-98-0
40186 輔酶 Q10雜質標準品 15mg 303-97-9
40187 新生霉素標準品 Novobiocin 200mg 303-81-1
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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