人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

39589 *標(biāo)準(zhǔn)品 Meglumine (AS) 500mg 6284-40-8 
39590 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Amrinone Related Compound A 100mg 62749-46-6
39591 敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)品 Dichlorvos (AS) 150mg 62-73-7
39592 *標(biāo)準(zhǔn)品 Captopril 200mg 62571-86-2
39593 醋酸鈣標(biāo)準(zhǔn)品 Calcium Acetate (AS) 1g 62-54-4
39594 伊班膦酸相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 625120-81-2 
39595 氯化乙酰甲*標(biāo)準(zhǔn)品 Methacholine Chloride (AS) 500mg 62-51-1 
39596 西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 62498-67-3
39597 *相關(guān)物質(zhì)D和F混合物標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 624742-53-6 
39598 *標(biāo)準(zhǔn)品 Phenacetin  500mg 62-44-2 
39599 非那西汀熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品 500mg 62-44-2 
39600 丙戊酸相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 62391-99-5 
39601 醋酸*標(biāo)準(zhǔn)品 1.91mg 62357-86-2
39602 羥可待酮鑒別標(biāo)準(zhǔn)品 Oxytocin Identification 15mg 6233-83-6 
39603 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dopamine Hydrochloride 200mg 62-31-7
39604 *鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfacetamide Sodium  500mg 6209-17-2 
39605 鹽酸環(huán)苯扎林標(biāo)準(zhǔn)品 Cyclobenzaprine Hydrochloride 200mg 6202-23-9
39606 地*標(biāo)準(zhǔn)品 Dirithromycin 200mg 62013-04-1
39607 奧克立林標(biāo)準(zhǔn)品 Octocrylene  500mg 6197-30-4 
39608 L-*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Leucine  200mg 61-90-5 
39609 甲磺酸二氫麥角胺標(biāo)準(zhǔn)品 Dihydroergotamine Mesylate 500mg 6190-39-2
39610 *標(biāo)準(zhǔn)品(系統(tǒng)使用性用) 25mg 61848-66-6 
39611 *標(biāo)準(zhǔn)品 Phosphated Riboflavin  100mg 6184-17-4 
39612 *對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品 Oxaliplatin  125mg 61825-94-3 
39613 氨馬尿酸標(biāo)準(zhǔn)品 Aminohippuric Acid 200mg 61-78-9
39614 多沙唑嗪相關(guān)雜質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 617677-53-9
39615 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 * Hydrochloride  125mg 61-76-7 
39616 *相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 61758-77-8 
39617 托西溴芐銨標(biāo)準(zhǔn)品 Bretylium Tosylate 200mg 61-75-6
39618 *標(biāo)準(zhǔn)品 Fluvoxamine Maleate  200mg 61718-82-9 
39619 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Tioconazole Related Compound A 25mg 61709-33-9 
39620 乙酰半*標(biāo)準(zhǔn)品 Acetylcysteine 200mg 616-91-1
39621 **標(biāo)準(zhǔn)品 Mefenamic Acid  200mg 61-68-7 
39622 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 10mg 61643-23-0 
39623 糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Saccharin Sodium  100mg 6155-57-3 
39624 *標(biāo)準(zhǔn)品 Oxytetracycline  200mg 6153-64-6 
39625 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 6153-56-6 
39626 鹽酸阿的平標(biāo)準(zhǔn)品 Quinacrine Hydrochloride  200mg 6151-30-0 
39627 槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品 Quercetin  500mg 6151-25-3 
39628 *胺標(biāo)準(zhǔn)品 Procainamide Hydrochloride  200mg 614-39-1 
39629 *標(biāo)準(zhǔn)品 Triprolidine Hydrochloride  500mg 6138-79-0 
39630 海藻糖標(biāo)準(zhǔn)品 Trehalose  400mg 6138-23-4 
39631 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 15mg 61337-68-6 
39632 *標(biāo)準(zhǔn)品 Amoxicillin 200mg 61336-70-7
39633 普魯卡因*標(biāo)準(zhǔn)品 Penicillin G Procaine 200mg 6130-64-9 
39634 *鈉標(biāo)準(zhǔn)品 人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒1g 61270-78-8
39635 奎寧單鹽酸鹽二水合物標(biāo)準(zhǔn)品 1g 6119-47-7 
39636 克拉維酸鋰標(biāo)準(zhǔn)品 Clavulanate Lithium 200mg 61177-44-4
39637 *標(biāo)準(zhǔn)品 Methoxamine Hydrochloride  200mg 61-16-5 
39638 巰基嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品 Mercaptopurine 500mg 6112-76-1 

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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