人補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

39539 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 64-73-3
39540 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 200mg 64-72-2
39541 芝麻油相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 6mg×3vials 64550-34-1 
39542 *酯標(biāo)準(zhǔn)品 Cefuroxime Axetil 350mg 64544-07-6
39543 鹽酸心得平標(biāo)準(zhǔn)品 Oxprenolol Hydrochloride  200mg 6452-73-9 
39544 異麥芽酮糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 Isomalt  200mg 64519-82-0 
39545 六甲密胺標(biāo)準(zhǔn)品 Altretamine 500mg 645-05-6
39546 托美丁鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Tolmetin Sodium  500mg 64490-92-2 
39547 *鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Cefotaxime Sodium 350mg 64485-93-4
39548 *標(biāo)準(zhǔn)品 Tizanidine Hydrochloride  200mg 64461-82-1 
39549 西酞普蘭相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg 64372-56-1
39550 硬脂酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Erythromycin Stearate 200mg 643-22-1
39551 苯磺酸阿曲庫銨標(biāo)準(zhǔn)品 Atracurium Besylate 100mg 64228-81-5
39552 甲酸標(biāo)準(zhǔn)品 Formic Acid  1.2ml×3ampules 64-18-6 
39553  
乙醇測定用乙醇對照溶液標(biāo)準(zhǔn)品（乙醇水溶液） 
Alcohol Determination--Alcohol 5mlX5ampules 64-17-5
39554 乙醇標(biāo)準(zhǔn)品 Alcohol 1.2mLx5ampules 64-17-5
39555 *標(biāo)準(zhǔn)品 Dipivefrin Hydrochloride 200mg 64019-93-8
39556 阿莫地喹鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Amodiaquine Hydrochloride 500mg 6398-98-7
39557 麥角異胺標(biāo)準(zhǔn)品 Ergotaminine (List Chemical) 100mg 639-81-6
39558 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 63968-75-2 
39559 *標(biāo)準(zhǔn)品 Phenoxybenzamine Hydrochloride  250mg 63-92-3 
39560 L-苯*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Phenylalanine  200mg 63-91-2 
39561 甲氯滅酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Meclofenamate Sodium 500mg 6385-02-0 
39562 乙二胺四乙酸二鈉鹽標(biāo)準(zhǔn)品 Edetate Disodium 200mg 6381-92-6
39563 糖精鈣標(biāo)準(zhǔn)品 Saccharin Calcium 100mg 6381-91-5 
39564 酒石酸鉀鈉標(biāo)準(zhǔn)品 2g 6381-59-5 
39565 鹽酸普莫卡因標(biāo)準(zhǔn)品 Pramoxine Hydrochloride 500mg 637-58-1 
39566 磺胺磺胺標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfanilamide  5g 63-74-1 
39567 磺胺熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)品 500mg 63-74-1 
39568 *標(biāo)準(zhǔn)品 Clofibrate 1g 637-07-0
39569 聚甘油-3 二異硬脂酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 Polyglyceryl 3 Diisostearate 1ml 63705-03-3 
39570 *標(biāo)準(zhǔn)品 Calcium Lactate 1g 63690-56-2
39571 L-*標(biāo)準(zhǔn)品 L-Methionine  200mg 63-68-3 
39572 *標(biāo)準(zhǔn)品 Betaxolol Hydrochloride 200mg 63659-19-8
39573 水楊酸相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 636-46-4 
39574 麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)品 Maltose Monohydrate  500mg 6363-53-7 
39575 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Prilocaine Related Compound A 100mg 636-21-5 
39576 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 30mg 63-56-2 
39577 莫達(dá)非尼相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Modafinil Related Compound A 20mg 63547-24-0 
39578 N/A標(biāo)準(zhǔn)品 kit 63516-30-3 
39579 *標(biāo)準(zhǔn)品 Primaquine Phosphate 200mg 63-45-6 
39580 無水乳糖標(biāo)準(zhǔn)品 Anhydrous Lactose  100mg 63-42-3 
39581 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 100mg 6341-72-6 
39582 5-胞苷酸標(biāo)準(zhǔn)品 5-Cytidylic Acid 500mg 63-37-6
39583 *標(biāo)準(zhǔn)品 Berberine Chloride 50mg 633-65-8
39584 骨化二醇標(biāo)準(zhǔn)品 人補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒Calcifediol 75mg 63283-36-3
39585 *標(biāo)準(zhǔn)品 Phenytoin Sodium  200mg 630-93-3 
39586 己酸孕酮標(biāo)準(zhǔn)品 Hydroxyprogesterone Caproate  200mg 630-56-8 
39587 *標(biāo)準(zhǔn)品 Nandrolone Phenpropionate CIII 250mg 62-90-8 

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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