人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

38559 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 25mg
38560 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sertraline Hydrochloride  100mg 79559-97-0 
38561 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sevoflurane 1ml 28523-86-6 
38562 *相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 0．2ml 58109-34-5 
38563 *標(biāo)準(zhǔn)品 100mg
38564 *相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 0．2ml 13171-18-1 
38565 *相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 0．2ml 920-66-1 
38566 *銀標(biāo)準(zhǔn)品 Silver Sulfadiazine  200mg 22199-08-2 
38567 N-乙酰神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 N-Acetylneuraminic Acid  200mg 131-48-6 
38568 *標(biāo)準(zhǔn)品 Silybin  50mg 22888-70-6 
38569 水飛薊寧標(biāo)準(zhǔn)品 Silydianin  20mg 29782-68-1 
38570 二甲基硅油標(biāo)準(zhǔn)品 Simethicone  50g 8050-81-5 
38571 西地那非雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 10mg
38572 *標(biāo)準(zhǔn)品 Simvastatin  200mg 79902-63-9 
38573 西布曲明相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 Sibutramine Related Compound A 20mg
38574 西布曲明相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 Sibutramine Related Compound B 20mg
38575 西布曲明相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 Sibutramine Related Compound C 20mg
38576 西布曲明相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 20mg 84467-94-7 
38577 β-谷固醇β-谷固醇標(biāo)準(zhǔn)品 Beta-Sitosterol  300mg 83-46-5 
38578 乙酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Acetate (AS) 1g 127-09-3 
38579 抗壞血酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Ascorbate  200mg 134-03-2 
38580 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Benzoate  1g 532-32-1 
38581 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Bromide 1g 7647-15-6 
38582 丁酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Butyrate 25mg 156-54-7 
38583 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Bicarbonate (AS) 3g 144-55-8 
38584 碳酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 1g 497-19-8 
38585 氯化鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Chloride (AS) 1g 7647-14-5 
38586 檸檬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Citrate (AS) 1g 6132/4/3
38587 氟化鈉標(biāo)準(zhǔn)品 1g 7681-49-4 
38588 乙二胺四乙酸鐵鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Iron EDTA  200mg 15708-41-5 
38589 乳酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Lactate  200mg 867-56-1 
38590 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Nitroprusside  500mg 13755-38-9 
38591 丙酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Propionate 200mg 6700-17-0 
38592 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Salicylate  500mg 54-21-7 
38593 羧甲基淀粉鈉標(biāo)準(zhǔn)品（A型） Sodium Starch Glycolate Type A 400mg 9063-38-1 
38594 羧甲基淀粉鈉標(biāo)準(zhǔn)品（B型） Sodium Starch Glycolate Type B 400mg 9063-38-1 
38595 硬脂富馬酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Stearyl Fumarate  200mg 4070-80-8 
38596 酒石酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium Tartrate Dihydrate 500mg×4vials 6106-24-7 
38597 人生長激素標(biāo)準(zhǔn)品 Somatropin 1 vial 12629-01-5 
38598 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)品 Sorbic Acid  1g 110-44-1 
38599 1,4-脫水山梨糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 1,4-Sorbitan  300mg 27299-12-3 
38600 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sorbitol  125mg 50-70-4 
38601 *標(biāo)準(zhǔn)品 Sotalol Hydrochloride  300mg 959-24-0 
38602 索他洛爾相關(guān)化合物A標(biāo)準(zhǔn)品 50mg 5576-49-8 
38603 索他洛爾相關(guān)化合物B標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
38604 索他洛爾相關(guān)化合物C標(biāo)準(zhǔn)品人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒 50mg
38605 大豆粉標(biāo)準(zhǔn)品 Defatted Powdered Soy 2．5g 68513-95-1 
38606 鹽酸*標(biāo)準(zhǔn)品 Spectinomycin Hydrochloride  200mg 22189-32-8 
38607 *標(biāo)準(zhǔn)品 Spironolactone  125mg 1952/1/7

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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